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  • CT纳米造影剂的肿瘤诊断研究进展

    作者:郭晋纲;张晓丽;郑永明;庄坤;王东新

    X-射线计算断层扫描技术(Computed Tomography,CT)主要是利用组织对X-射线的不同吸收来进行解剖结构成像,对实体组织(如骨、肝等)具有较好的成像功能,但是对血管成像能力较差,所以需要研发更高效的纳米造影剂.本文首先介绍了目前CT纳米造影剂的研究方向,以及CT纳米造影剂的肿瘤诊断技术,接着,对CT纳米造影剂的研究目标进行说明,然后,综述了CT纳米造影剂能解决的关键问题,并在本文的后,对CT纳米造影剂未来的发展方向做出了展望.本文为CT纳米造影剂的研究指明了方向,对CT纳米造影剂肿瘤诊断技术的发展具有一定的指导与铺垫作用.

  • 术中荧光引导技术在泌尿外科应用的现状

    作者:杨晓峰

    本文根据微创泌尿外科发展的趋势,结合文献深入研究了术中荧光成像引导外科手术的理论和技术体系,阐述了术中荧光成像引导技术的工作原理,明确了临床可以使用或临床前期使用的荧光示踪剂,同时全面分析了国内外术中荧光成像设备的技术性能和应用范围,以及在泌尿外科手术中应用的现状,提出了进一步深入研究的科学问题。

  • 健脾疏肝抗毒汤对裸鼠MDA-MB-231-pAcGFP异种移植瘤生长及转移能力的影响

    作者:谢淮冰;王瑞平;胡守友;胡玥;张力;房良华

    目的:观察健脾疏肝抗毒汤对荷MDA-MB-231-pAcGFP裸鼠移植瘤生长及转移能力的影响,并探讨其作用机制.方法:应用Fugene HD Transfection Reagent转染三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞,经G418筛选获得稳定表达绿色荧光蛋白的乳腺癌细胞(MDA-MB-231-pAcGFP).流式细胞仪检测荧光细胞百分率.采用皮下接种法建立MDA-MB-231-pAcGFP细胞异种移植瘤裸鼠,观察移植瘤的生长情况,荧光成像技术观察各脏器转移瘤的数目和大小.结果:流式细胞仪检测乳腺癌细胞转染率高达96.5%,表达有绿色荧光蛋白的MDA-MB-23 1-pAcGFP细胞成瘤率为100%.模型组(A组),健脾疏肝抗毒汤组(B组),趋化因子基质细胞衍生因子-1 (CXCL12)特异受体(CXCR4)抑制剂组(C组)、健脾疏肝抗毒汤联合CXCR4抑制剂组(D组)瘤体质量分别为(1.30±0.11),(0.75±0.12),(0.48±0.09),(0.44±0.07)g,瘤体体积分别为(6.635±0.500),(4.017±0.466),(2.664±0.700),(2.323±0.492) cm3,与模型组比较,3组瘤体质量及体积均明显降低(P<0.05).3组的抑瘤率分别为42.18,%,62.95%,66.28%.A,C组肝脏可见散在荧光转移结节,B组及D组肝脏未见有荧光结节.结论:健脾疏肝抗毒汤具有抑制MDA-MB-231-pAcGFP移植瘤生长及肝转移的能力,可为健脾疏肝抗毒汤防治三阴性乳腺癌的生长转移提供实验依据.

  • 芳香外敷方对肺癌骨转移模型小鼠转移瘤体生长的影响

    作者:何佩珊;冯兴中;杨萌;齐慧;杨公博

    目的 观察中药芳香外敷方对肺癌骨转移癌的作用.方法 通过股骨内注射转染绿色荧光蛋白的人肺腺癌A549细胞建立肺癌骨转移癌小鼠模型,造模成功后随机分为中药外敷组[芳香外敷方0.5g/(kg·d)局部外敷,造模后7 ~21天每日1次]、唑来膦酸组[造模后7、10、14、19天腹腔注射唑来膦酸注射液30 μg/(kg·d)]、模型组(生理盐水局部外涂,0.5ml/只,每日1次),每组10只,另设假手术组(生理盐水局部外涂,0.5 ml/只,每日1次)10只.于造模当日及造模后第3、7、11、14、17、21天分别测量各组小鼠体质量,并采用FluorVivo成像系统观察小鼠肿瘤面积及转移情况.于造模21天称量瘤体重量.结果 各组小鼠不同时间体质量比较差异均无统计学意义(P>0.05).各组小鼠未出现其他部位和器官的转移.第21天中药外敷组小鼠肿瘤面积为(12.32±6.94) mm2,小于模型组的(23.91±9.86) mm2及唑来膦酸组的(17.16±7.37) mm2 (P<0.05),且瘤体重量亦小于模型组(P<0.01).唑来膦酸组与模型组比较,肿瘤面积与瘤体重量差异均无统计学意义(P>0.05).结论 芳香外敷方可抑制肺癌骨转移瘤体增长.

  • 小鼠神经损伤后慢性痛的早期机制

    作者:姜红

    通常,神经病理痛由手术恢复后的行为学检测来鉴定.而一般手术的恢复需要几天甚至一周之久,所以神经病理痛的早期机制很少受到关注.Katsuei Shibuki等从脊髓和大脑皮层可塑性改变的角度,深入探讨神经损伤早期的触诱发痛机制.作者首先从解剖结构方面进行研究.利用经颅黄素蛋白荧光成像发现,切断正中神经/尺神经(M/U)后,用足底毛刷刺激其感受野,该神经支配区域的皮层反应减弱,而邻近桡神经/肌皮神经(R/Mc)所对应的皮层区域开始出现反应,而且在3小时后反应增强,持续1~2周.切断R/Mc后,该现象消失.说明在一侧神经损伤后,该神经支配区域的皮层活动降低,而邻近神经支配区域的皮层活动增强,即皮层发生了可塑性改变.切断脊髓背柱后该现象不受影响,但在切断脊髓丘脑束后该现象消失.

  • 胰腺癌LyP-1靶向性磁共振—荧光双模态分子探针实验

    作者:史张;宋长恩;施睿峰;陆建平;邓勇辉;蒋涛

    目的 构建胰腺癌LyP-1靶向性磁共振—荧光双模态分子探针,观察其表征并进行MR显像.方法 构建50 nm核壳结构的磁共振—荧光双模态介孔探针,表面经环形多肽LyP-1(Cys-Gly-Asn-Lys-Arg-Thr-Arg-Gly-Cys)修饰,通过荧光及MR T2WI联合成像,验证该分子探针能否特异性识别并结合胰腺癌细胞.结果 新型LyP-1靶向性磁共振—荧光双模态分子探针可用于小鼠原位胰腺癌的荧光显像和磁共振成像,可有效结合胰腺癌细胞并在体外使T2WI信号明显降低.体内实验表明,该分子探针可与荧光标记的胰腺癌组织靶向结合,并作为MRI对比剂显示C57BL/6小鼠原位胰腺癌.结论 LyP-1靶向性磁共振—荧光双模态分子探针可靶向性地高效结合原位移植的小鼠胰腺癌细胞,用于早期胰腺癌诊断的转化研究.

  • 吲哚菁绿荧光成像在腹腔镜肝脏外科手术中的应用

    作者:张中林;李晓勉;李锟;唐胜利;杨智勇;常磊;刘志苏;袁玉峰

    目的 探讨吲哚箐绿(ICG)荧光成像在腹腔镜肝脏外科手术中的临床应用价值.方法 回顾分析武汉大学中南医院2016年9月-2018年10月利用ICG荧光成像技术完成的68例腹腔镜肝脏手术患者临床及病理资料,统计分析手术方法、荧光导航方式、ICG注射时间及剂量、肿瘤显影特点、术后肿瘤病理结果等.结果 68例患者中3例中转开腹,65例按预先计划实施ICG荧光腹腔镜肝脏手术.其中32例实施ICG荧光成像引导下腹腔镜肝段/肝叶解剖性切除(正显影17例,负显影15例),19例ICG成功显影(19/32,59.4%).患者术后病理证实原发性肝实体瘤(31例)、继发性肝肿瘤(12例)、肝囊肿(4例)、肝血管瘤(5例)、肝内胆管结石(12例)以及肝脏局灶性结节增生(1例),合并乙肝肝硬化背景29例.结论 ICG荧光成像技术在腹腔镜肝脏外科手术中有积极意义.合理的术前ICG注射有助于术中肿瘤的识别、定位和手术引导,特别是对于位置深在的中央区肿瘤;有助于提高腹腔镜肝脏手术的肿瘤根治性和手术安全性.术中ICG注射的目标肝段显影和手术导航,有助于实施更加精准的解剖性肝段或肝叶切除.术中ICG荧光技术对肝血管瘤、肝囊肿、肝内胆管结石等肝良性病变亦具有临床应用价值.

  • 多模态影像技术在原发性肝癌外科中的应用

    作者:杨剑;王壮雄;方驰华

    原发性肝癌(肝癌)是我国第4 位常见恶性肿瘤及第3 位肿瘤致死病因,手术切除是治疗肝癌的有效方法[1].精准肝切除是理想的手术方式,而如何精确定位肿瘤,发现全部病灶是实现精准肝切除的前提[2].尽管现代影像学技术在不断更新进步,但任何单一模态影像均存在局限性,无法在术前和术中完全实现对肝脏肿瘤的精确诊断.

  • 多光谱分光融合外科手术引导系统在阴茎癌前哨淋巴结活检中的应用

    作者:杨晓峰;张瑞;梁学志;曹晓明;马彦杰;王璟琪;薛亚洲;王东文

    目的 探讨采用多光谱分光融合外科手术引导系统(MGS)在阴茎癌前哨淋巴结活检中的临床价值.方法 回顾性分析2017年4月至2018年4月我院采用MGS进行阴茎癌前哨淋巴结活检的7例患者的临床资料.年龄62 ~ 78岁,平均65岁.肿物位于阴茎头或冠状沟,均<T3期;3例腹股沟淋巴结可触及,4例不能触及,但超声检查直径>1 cm.所有患者均在阴茎肿瘤近端正常皮肤下或皮内12、4、6和9点处,采用1 ml注射器在各点注射吲哚菁绿溶液0.25 m1(2.5 mg/ml),共1 ml,立刻将成像探头对准注射点,观察MGS显示器上荧光影像的动态变化.MGS显示的图像包括可见光图像、荧光图像和融合图像,融合图像为绿色伪彩.按照图像的动态特征,荧光影像依次包括注射点部、阴茎体部、耻骨联合部、腹股沟部和前哨淋巴结部5个部分.结果 7例患者14侧,除1侧未见显影外,其余13侧显影良好.显影良好的13侧,在注射后15 min左右,其他部位荧光逐渐消失,腹股沟区荧光影像逐渐浓聚固定,为前哨淋巴结体外确定位点.切开该处皮肤后即刻看到荧光强度更强的淋巴结样组织,与周围组织有明确的边界,沿此边界分离、结扎、切除,并送病理检查;淋巴样组织切除后,仍有3侧有残余荧光斑点,进一步切除.未显影的1侧,未找到淋巴结.术后病理证实13侧按照荧光影像体外定位、体内示踪的荧光显影组织为淋巴结,符合率为100%;3侧有残余荧光的组织,病理证实为淋巴管.结论 MGS辅助术中荧光成像,显著提高医生的视觉深度,能够实时、动态、准确地体外定位和体内示踪阴茎癌前哨淋巴结.

  • 荧光法联合染色法前哨淋巴结活检在早期乳腺癌中的应用

    作者:刘军;王宁;陈平;黄林平

    目的 探讨吲哚菁绿引导的荧光法联合染色法进行早期乳腺癌前哨淋巴结活检的临床应用价值.方法 40例早期乳腺癌患者通过荧光法联合染色法进行前哨淋巴结活检,全部前哨淋巴结均进行术中冰冻及术后石蜡切片病理检查.结果 40例患者均成功行前哨淋巴结活检,其中前哨淋巴结荧光显影率为100%,平均每例2.88枚;蓝染率为92.5%,平均每例1.75枚.7例患者术中冰冻检查发现前哨淋巴结转移癌并立即行腋窝淋巴结清扫.其余33例患者前哨淋巴结术中冰冻病理检查及术后石蜡切片病理检查均未发现转移癌.结论 染色法联合荧光法前哨淋巴结活检具备检出率高、创伤小等优势,适宜在临床推广.

  • 量子点荧光成像在肿瘤诊治应用研究进展

    作者:高振;朱立新;许小亮

    量子点(quantum dot,QD),又名“人造原子”,是一种用原子人工合成的纳米材料,其在紫外光激发下可发出不同波长的荧光.QD直径小、发出的荧光峰窄、荧光亮度持久,具有取代有机染料用于肿瘤诊治的潜能.总结近年QD在荧光成像及肿瘤诊治方面的研究进展.方法 应用PubMed及中国知网(CNKI)数据库检索系统,以“quantum dots,fluorescence imaging,oncotherapy,tumor therapy,量子点,肿瘤治疗,肿诊断,荧光成像”为关键词,检索2005-01-2016-03的相关文献391篇.纳入标准:(1)可用于生物荧光成像的低毒化QD;(2)靶向识别的功能化QD.根据纳入标准终分析31篇文献.结果 低毒化QD在细胞成像、活体靶向成像、淋巴结成像、活体肿瘤成像、活体肿瘤细胞示踪等荧光成像方面的研究,使正确定位淋巴结、利用QD深成像能力发现极小的肿瘤、乃至彻底切除肿瘤组织成为可能.功能化QD在肿瘤早期诊断和治疗上发挥更大作用,QD的药物靶向和QD介导的光热治疗肿瘤也有很好的临床应用前景.结论 QD在生物荧光成像及肿瘤诊疗中的潜力巨大,具有进一步探索开发利用于临床的价值.

  • 基于图像引导的小动物立体放疗系统介绍

    作者:卿淦;王佳舟;胡伟刚;章真

    小动物放疗模型的相关理论及其应用,对于放射生物学和临床肿瘤放疗学的研究与发展至关重要.而综合考虑普适性与成本效应等因素,研究人员常运用小鼠模型来研究肿瘤与正常组织的放射生物学机制.近年来,基于不同图像引导的小动物立体放疗设备也取得了巨大发展,它们已能较好模拟人体放疗流程.本文着重介绍了基于不同图像方式(如CBCT与MRI)引导的小动物放疗系统,其次对小动物荧光成像技术进行理解学习,总结对比了不同生物发光与荧光成像设备在小动物成像系统中的应用,后对未来小动物放疗设备优化方向提出展望.

  • 碳量子点对神经细胞荧光成像及生物安全性评价

    作者:邓邦莲;陈雪峰;秦文;刘龑;孟蕾;易子安;彭超

    目的:检测碳量子点对神经细胞的生物成像效果,及其生物安全性评估.方法:使用动态光散射法和荧光分光光度计对碳量子点进行表征,使用共聚焦显微镜观察碳量子点的生物成像效果,用MTT法检测碳量子点对细胞的毒性效应.结果:碳量子点光学效应好,激发光为375nm时,碳量子点荧光强度强,而且碳量子点荧光强度与其浓度正相关.碳量子点可被PC12细胞摄取并发出明亮的荧光,显示出良好的荧光成像效应.同时发现,碳量子点对PC12细胞毒性低,500μg/mL碳量子点孵育48h后,细胞活力仍保持在70%以上.结论:碳量子点荧光成像特性优异,生物安全性好,在口腔医学领域应用时不会造成神经系统损伤.

  • 028 荧光成像的进展:药剂学的机会

    作者:

    关键词: 荧光成像
  • 基于荧光图像的抗肿瘤细胞迁移药物筛选方法

    作者:聂晓静;赵筱萍;王毅

    本文建立了一种基于荧光图像的抗肿瘤细胞迁移药物筛选方法.应用Hoechst 33342荧光染料染色和96孔Transwell板,通过细胞荧光图像采集与分析平台对正常组和加药组细胞荧光图像进行定量分析,建立了一种快速筛选抗肿瘤细胞迁移药物的新方法.对本方法的稳定性、精密度、荧光染色时间和迁移时间进行了考察和优化,并对抗肿瘤药紫杉醇的肿瘤细胞迁移抑制作用进行了定量分析,计算得到紫杉醇抗肿瘤细胞迁移的IC50为0.717μmol·L-1.采用该方法对中药泽泻24个组分进行筛选,发现1个活性组分.结果表明,该方法快速、准确、重现性好,能够用于抗肿瘤细胞迁移药物的快速筛选.

  • 结合活体荧光成像技术为两亲性嵌段共聚物建立一种荧光标记方法

    作者:夏自花;刘意;于丽萍;俞安安;杨帆

    结合活体荧光成像技术,为基于β-环糊精的两亲性嵌段4臂聚合物(β-CD-[P(AA-co-MMA)-b-PVP]4)建立一种荧光标记方法.通过酯交换反应为罗丹明B分子中引入含有双键的甲基丙烯酸羟乙酯,然后通过双键聚合反应将罗丹明B标记到两亲性嵌段共聚物上.借助红外、荧光光谱对标记产物进行表征,并通过紫外分光光度法计算荧光标记产率;制备长春西汀(VP)荧光载药胶束,进行动物组织分布实验和小动物活体荧光成像实验,对比两个实验结果来验证荧光标记结果.荧光标记产率为4.13%;荧光标记前后该聚合物的临界胶束浓度(CMC)基本未改变,分别为5.09×10-3和4.96×10-3 mg·L-1;对比组织分布和小动物活体荧光成像实验结果发现,二者反映的该胶束在小动物体内的分布情况基本相似,不仅证明了该标记产物的荧光示踪作用,同时结合红外、荧光表征也确证了此荧光标记实验的成功.结合活体荧光成像技术为两亲性嵌段共聚物建立一种荧光标记方法.

  • HaloTag 技术在α-突触核蛋白质的细胞影像与定量分析中的应用

    作者:冯雪婷;张晨光;张敏;岳志霞;邢天禹;李慎涛;丁卫

    目的:探讨 HaloTag 技术用于α-突触核蛋白质(α-synuclein,SNCA)在细胞内荧光成像及半定量分析的方法及其应用。方法采用重组克隆技术构建 pHalo-SNCA 质粒,将其转染至 HEK293人胚肾细胞中,经 Western blotting 鉴定 Halo-SNCA 融合蛋白质的表达;通过激光共聚焦显微镜观察 Halo-SNCA 在细胞内的定位与分布;通过蛋白酶催化的解偶联反应的荧光强度测定细胞内 Halo-SNCA 的荧光强度进行目的蛋白质的间接定量分析。结果本研究成功构建了 Halo-SNCA 真核表达质粒,能够在转染的真核细胞中高效表达目的融合蛋白质,该融合蛋白质结合特定的荧光配基后,可通过激光共聚焦显微成像分析 Halo-SNCA 在细胞中的动态水平与分布状况。此外,经水解释放的荧光配基可用于表达融合蛋白质在细胞中较为精确的相对定量分析。结论HaloTag 技术能够用于 SNCA 在细胞内成像和定量分析,同时可以作为细胞生物学和生物化学分析的可关联检测指标。对于SNCA 的生理功能以及在神经系统病变中的作用等相关研究,HaloTag 具有令人瞩目的潜在应用前景。

  • 双模态对比剂Fe3O4-Cy5.5-NGR在卵巢癌的体外靶向效能研究

    作者:张紫欣;孟颖;梁宇霆

    目的 合成并验证磁共振-荧光双模态对比剂Fe3O4-Cy5.5-NGR对卵巢癌ES-2细胞的体外靶向效能情况.方法 化学方法合成Fe3O4-Cy5.5-NGR颗粒作为实验组对比剂,Fe3O4-Cy5.5颗粒作为对照组对比剂,在透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)、红外光谱仪(far infrared spectrometer,FITR)和紫外分光光度仪(ultraviolet spectrophotometer-2600,UV-2600)等设备下检测对比剂的普通物理化学性质是否满足成像需要;选取ES-2人卵巢癌透明细胞株传代培养,细胞生长稳定后进行CD13免疫组织化学染色,观察细胞膜表面CD13表达量;两种对比剂与ES-2细胞共同孵育后检测粒子的细胞毒性,并用流式细胞仪验证细胞与粒子的体外特异性结合情况.在7.0TMR下验证磁性纳米颗粒Fe3O4-Cy5.5-NGR和Fe3O4-Cy5.5作为MR对比剂的磁敏感性.结果 TEM观察两种对比剂形态规则,水溶液中分散性良好,通过连接NGR短肽,实验组对比剂的平均直径达(8.930±0.773)nm,对照组对比剂直径约(7.480±0.695)nm;Fe3O4-Cy5.5-NGR和Fe3O4-Cy5.5激发波为628.0 nm,发射波为675.2 nm;FITR中Fe3O4-Cy5.5-NGR和Fe3O4-Cy5.5在2 882 cm-1、1 632 cm-1处出现特征性波峰,实验组对比剂在841 cm-1处另外出现了波峰.细胞毒性实验(CCK-8)中对比剂与细胞共孵育后,细胞活性保持在90%左右.细胞免疫组织化学染色,荧光显微镜观察细胞呈侵袭性生长,细胞膜位置CD13高表达,细胞核及周围间质表达量很低.Fe3O4-Cy5.5-NGR和Fe3O4-Cy5.5对比剂r2值分别为155.49 mmol·L-1·s-1,180.74mmol·L-1·s-1.流式细胞仪下观察到Fe3O4-Cy5.5-NGR较Fe3O4-Cy5.5对比剂的荧光强度高,在不同浓度(40、80和1601μmol)分别为后者的3.1、1.65和1.26倍.结论 Fe3O4-Cy5.5-NGR作为磁共振-荧光双模态对比剂在ES-2细胞的体外靶向性能良好,可以满足体外成像需求,为进一步的裸鼠卵巢癌在体实验提供了实验基础.

  • 自制超声/荧光双功能造影剂在兔正常淋巴结中的显像

    作者:曲恩泽;戴志飞;王淑敏;梁晓龙;柯亨特;王金锐

    目的 制备一种能够超声/荧光双模式成像的造影剂,通过动物实验观察其对淋巴管及淋巴结超声造影和近红外活体荧光成像的效果.方法 组装嵌合淋巴结靶向配体(磷脂酰丝氨酸)和近红外荧光物质的双功能靶向造影微泡,行光学显微镜及粒径检测,观察其形态与大小.选取5只正常新西兰大白兔,于双侧足垫注射双功能造影剂,同时观察其淋巴结、淋巴管超声造影及近红外荧光表现.于同部位注射活性蓝染料,5 min后处死动物后取淋巴结行病理检查.结果 脂质微泡超声造影剂粒径分布均匀、形态规则,直径约3 ~5 μm.超声造影剂经皮下注射后可很快显示流入的淋巴管及相应淋巴结,近红外荧光成像与超声造影图像有良好的一致性.解剖证实所有蓝染的淋巴结均可荧光成像.结论 自制双功能超声造影剂经皮下注射对兔正常淋巴结的造影效果良好,且同步可行近红外荧光成像,有望成为一种淋巴结示踪的良好方法.

  • 激光共聚焦显微镜的使用和管理

    作者:丁文骏;欧阳贵

    激光扫描共聚焦显微镜(ConfocalLaser Scanning Micoscope,CLSM),简称共聚焦显微镜,是目前生物医学领域中先进的荧光成像和细胞分析工具之一,其应用领域日趋广泛.

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