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  • 维生素E、维生素C、牛磺酸对苯并[a]芘致SH-SY5Y细胞能量代谢损伤的影响

    作者:王丹;吕懿;曹彬;成丽霞;任学科;穆箭兵;郑金平

    [目的]观察维生素E、维生素C、牛磺酸对苯并[a]芘(BaP)暴露引起人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)能量代谢损伤的影响.[方法]分别用DMSO、BaP (1μmoL/L)、BaP (1μmoL/L)+维生素E(S0μmoL/L)、BaP (1 μmoL/L)+维生素C (100μmoL/L)、BaP (1μ moL/L)+牛磺酸(100 μmoL/L)处理SH-SY5Y细胞24h后,用MTT法检测细胞存活率,ROS活性氧检测试剂盒检测细胞内ROS水平,细胞丙二醛(MDA)测定试剂盒检测细胞内MDA含量,超氧化物歧化酶(SOD)分型测试盒检测细胞内SOD活性,Seahorse XFp细胞能量分析仪检测细胞线粒体呼吸功能和糖酵解功能.[结果]BaP染毒组细胞存活率(84.2%±1.2%)、SOD活性[(60.19±1.02)U/mg]低于溶剂对照组[100%±3.74%、(67.37±0.78) U/mg] (P<0.05),ROS水平(60.73%±3.15%)和MDA含量[(0.837±0.104) μmol/g]则高于溶剂对照组[31.27%±1.40%、(0.382±0.083) μmol/g] (P<0.0B).BaP染毒组基础有氧呼吸速率[(2.64±0.43) pmol/min]、ATP偶联的有氧呼吸速率[(2.09±0.32) pmol/min]、有氧呼吸大值[(3.42±0.03) pmol/min]、有氧呼吸储备值[(0.78±0.44)pmol/min]均低于溶剂对照组[(4.89±0.43、4.16±0.24、7.06±0.11、2.18±0.35)pmol/min](P<0.05),质子漏耗氧速率[(0.55±0.16) pmol/min]、糖酵解水平[(3.54±1.02)mpH/min]、糖酵解大值[(5.94±0.47) mpH/min]、糖酵解储备值[(2.40±0.61)mpH/min]与溶剂对照组[(0.73±0.27) pmol/min、(2.71±0.66) mpH/min、(5.75±0.65) mpH/min、(3.04±0.19)mpH/min]相比,差异无统计学意义(P>0.05).维生素E、维生素C、牛磺酸干预组细胞存活率(90.2%±1.1%、91.9%±3.1%、98.2%±2.1%)、SOD活性[(67.28±0.43)、(66.23±0.70)、(65.47±1.17)U/mg]明显高于BaP染毒组[84.2%±1.2%、(60.19±1.02) U/mg] (P<0.05),细胞内ROS水平(34.53%±1.96%、37.07%±2.42%、38.77%±2.31%)、MDA含量[(0.477±0.095)、(0.544±1.09)、(0.558±0.152)μmol/g]则低于BaP染毒组[60.73%±3.15%、(0.837±0.104) μmol/g] (P<0.05).维生素E、维生素C、牛磺酸干预组基础有氧呼吸速率[(4.30±0.36)、(4.44±0.35)、(4.42±0.51) pmol/min],ATP偶联的有氧呼吸速率[(3.45±0.20)、(3.70±0.19)、(3.60±0.34) pmol/min],有氧呼吸大值[(5.53±0.03)、(5.52±0.04)、(5.56±0.02) pmol/min]均高于BaP染毒组[(2.64±0.43)、(2.09±0.32)、(3.42±0.03) pmol/min](P<0.05),有氧呼吸储备值[(1.23±0.35)、(1.08±0.31)、(1.14±0.50) pmol/min]与BaP染毒组[(0.78±0.44) pmol/min]相比,差异无统计学意义(P>0.05).糖酵解压力测试结果显示,5组间3项指标的差异均无统计学意义(P>0.05).[结论]BaP暴露可导致SH-SY5Y细胞氧化损伤,降低线粒体呼吸功能,维生素E、维生素C、牛磺酸对BaP暴露引起的能量代谢损伤具有一定的保护作用.

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