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  • 生长激素释放肽调控Akt信号通路对高糖诱导的胰岛β细胞凋亡的影响

    作者:张霞;薛文郁;薛雁明

    目的 探讨生长激素释放肽对高糖诱导的胰岛β细胞凋亡的影响及机制.方法 以NIT-1胰岛β细胞为研究对象,分为正常组(正常培养)、高糖组(高糖培养)、实验组(生长激素释放肽预处理后用高糖培养),用Akt信号通路抑制剂处理实验组细胞记为实验组+抑制剂,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western印迹检测蛋白激酶B(Akt)、磷酸化(p)-Akt表达.结果 高糖组OD值、p-Akt/Akt明显低于正常组(P<0.05),细胞凋亡率明显高于正常组(P<0.05);实验组OD值、p-Akt/Akt明显高于高糖组(P<0.05),细胞凋亡率明显低于高糖组(P<0.05).结论 生长激素释放肽能够抑制高糖诱导的胰岛β细胞凋亡,其作用机制可能与Akt信号通路有关.

  • Eya2基因沉默对前列腺癌细胞生物学行为的影响及其机制

    作者:刘重远

    目的 探讨前列腺癌细胞Eya2表达变化及Eya2基因沉默对前列腺癌细胞生物学行为影响的可能机制.方法 采用Western blotting 法检测正常前列腺上皮细胞RWPE-1 及前列腺癌细胞PC-3、DU145、LNCAP中Eya2蛋白相对表达量.收集对数生长期PC-3细胞,随机分为沉默组和对照组,分别转染Eya2 siRNA以及Negative siRNA,作用24 h.采用Western blotting法及实时荧光定量PCR法检测两组Eya2蛋白及mRNA相对表达量,MTT法检测细胞增殖能力(OD490),流式细胞术检测细胞凋亡能力(细胞凋亡率),Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力(穿膜细胞数),Western blotting法检测蛋白激酶B(AKT)信号通路相关因子p-AKT、Bcl-xl蛋白相对表达量.结果前列腺癌细胞PC-3、DU145、LNCAP中Eya2蛋白相对表达量均高于RWPE-1细胞,沉默组Eya2 mRNA蛋白和相对表达量均低于对照组(P均<0.05).随着培养时间的延长,两组细胞增殖能力均呈上升趋势,细胞培养2~5天沉默组OD490均低于对照组(P均<0.05).沉默组细胞凋亡率高于对照组,穿膜细胞数低于对照组(P均<0.05),沉默组p-AKT、Bcl-xl蛋白相对表达量均低于对照组(P均<0.05).结论 沉默Eya2基因可降低前列腺癌PC-3细胞增殖、侵袭能力,提高其凋亡能力;抑制AKT信号通路可能是其作用机制.

  • 芬太尼及Ly294002对人肝癌HepG2细胞增殖及迁移的抑制作用及其机制

    作者:陈玲珊;伍天影;李志强;陈冠宇;周成茂;阮林

    目的 探讨芬太尼及Ly294002对人肝癌HepG2细胞增殖、迁移的抑制作用及其机制.方法 将对数生长期的人肝癌HepG2细胞分为芬太尼组、Ly294002组、联合组和对照组,分别给予500 ng/ml 芬太尼、25 μmol/L Ly294002、500 ng/ml芬太尼联合25 μmol/L Ly294002、等量培养基进行干预.用四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖活性,用吸光度A值表示,划痕实验观察细胞迁移能力并计算愈合率,流式细胞仪观察细胞周期和细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR法检测细胞中人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)mRNA 和核转录因子 κB(NF-κB)mRNA 的表达水平.结果 芬太尼组、Ly294002组和联合组的A值、愈合率、(S+G2/M)期细胞比例、NF-κB mRNA相对表达水平均低于对照组(均P<0.05),而G0/G1期细胞比例、凋亡率、PTEN mRNA相对表达水平高于对照组(P<0.05);联合组的A值、愈合率、(S+G2/M)期比例、NF-κB mRNA相对表达水平低于芬太尼组及Ly294002组(P<0.05),而G0/G1期细胞比例、凋亡率、PTEN mRNA相对表达水平高于芬太尼组及Ly294002组(P<0.05).结论 芬太尼和Ly294002均可抑制人肝癌HepG2细胞增殖和迁移,且两者有协同作用,这可能均与蛋白激酶B(Akt)信号转导通路有关.

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