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鹿角脱盘5种提取部位对H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用研究
目的:评价鹿角脱盘5种提取部位对肝癌H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用.方法:以抑瘤率、脾脏指数、胸腺指数、肿瘤组织病理变化、细胞因子水平和肿瘤细胞的凋亡为评价指标,评价鹿角脱盘的盐酸、氢氧化钠、氯化钠、乙醇和水5种提取部位对肝癌H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用.结果:与模型组比较,鹿角脱盘5种提取部位均提高了荷瘤小鼠脾脏指数、胸腺指数以及血清中IL-2、TNF-α、IFN-γ的水平,均促进了肿瘤细胞凋亡;并显著降低了血清中TGF-β的水平.结论:鹿角脱盘5种提取部位均有抗肿瘤作用,其中碱提取部位效果好;鹿角脱盘可能通过调整T细胞的分化和促进相关细胞因子分泌诱导肿瘤细胞凋亡来发挥抗肿瘤作用.
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鹿角及鹿骨中总多糖含量比较分析
目的:通过比较鹿角、鹿角脱盘、鹿骨中总多糖含量,为鹿角与鹿角脱盘同用,以及鹿骨的药用提供依据.方法:分别采用苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法,测定鹿角、鹿角脱盘、鹿骨中总多糖含量.结果:两种测定方法中,三者总多糖含量由高到低依次为:鹿角脱盘,鹿角,鹿骨;两种测定方法中,蒽酮-硫酸法测定结果,各样品总多糖含量均高于苯酚-硫酸法测定结果.结论:从总多糖角度,鹿角及鹿角脱盘含量具有显著差异,不宜作同一药材使用;同为鹿的骨化部分的鹿骨,与鹿角总多糖含量差异较大,应分别药用.
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鹿角脱盘对辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤 Notch2基因表达和免疫功能的影响
目的：观察鹿角脱盘对辐射诱发小鼠胸腺淋巴瘤 Notch2基因的表达和免疫功能的影响，探讨其在辐射致癌过程中的作用。方法：将90只近交系 BALB／c 小鼠随机分成对照组、照射组和照射给药组，每组30只。照射组和照射给药组小鼠采用 X 射线照射，建立胸腺淋巴瘤动物模型，照射后给予照射给药组小鼠喂饲含鹿角脱盘超微粉的鼠粮。6个月后，取全血和胸腺，采用 RT-PCR 和 Western blotting 法分别检测胸腺淋巴瘤组织中 Notch2 mRNA 和蛋白表达水平；采用 ELISA 法检测血清免疫球蛋白（IgG、IgA 和 IgM）水平，应用SOD 试剂盒检测血清中 SOD 活性。结果：照射组和照射给药组小鼠胸腺瘤发生率分别为53.33％（16／30）和36.67％（11／30）；照射组小鼠胸腺瘤组织中 Notch2 mRNA 和蛋白表达水平较对照组小鼠正常胸腺组织均明显升高（P ＜0.05），而照射给药组小鼠胸腺瘤组织中 Notch2 mRNA 和蛋白表达水平均低于照射组（P ＜0.05）；照射组小鼠血清中 IgG、IgA 和 IgM 水平均低于对照组（P ＜0.05），而照射给药组小鼠血清中 IgG、IgM 和血红蛋白水平及 SOD 活性均高于照射组（P ＜0.05）。结论：电离辐射激活 Notch2基因和蛋白的高表达及降低小鼠免疫功能可能是辐射诱发胸腺淋巴瘤的发生机制之一；鹿角脱盘可通过抑制 Notch2基因和蛋白的表达及提高小鼠免疫功能而降低辐射致癌的发生率，起到抑制肿瘤的作用。
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复方麦鹿芪人参制剂主要成分变化及其在肝癌H22荷瘤小鼠体内的抗肿瘤作用
目的:分析复方麦鹿芪人参制剂配伍后主要成分的变化,探讨其对肝癌H22荷瘤小鼠的体内抗肿瘤作用.方法:采用HPLC法测定复方麦鹿芪人参制剂中人参皂苷和氨基酸的含量,苯酚硫酸法测定复方麦鹿芪人参制剂中多糖的含量.将144只雌性昆明小鼠随机分为正常对照组,模型组,阳性药组,低、中、高剂量复方麦鹿芪人参组,人参羹组,人参原粉组和鹿角脱盘原粉组,每组16只.除正常对照组外,其余8组构建肝癌H22荷瘤小鼠模型,造模后次日给药,连续给药10 d后测定各组小鼠瘤质量,计算各组小鼠肿瘤抑制率、脾脏指数和胸腺指数,HE染色法观察肿瘤组织和脾脏组织的形态表现,流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡率.结果:以人参和鹿角脱盘单味生药量计,复方麦鹿芪人参制剂中人参皂苷、多糖和氨基酸含量明显高于单味药(P<0.05).与模型组比较,各剂量给药组小鼠肿瘤抑制率明显增加(P<0.01),各剂量复方麦鹿芪人参组小鼠脾脏指数和胸腺指数明显升高(P<0.01),肿瘤细胞凋亡率明显升高(P<0.05).与模型组比较,各剂量复方麦鹿芪人参组小鼠肿瘤组织被破坏,细胞排列疏松,形状不规则,可见坏死灶;脾脏组织白髓结构逐渐趋于正常,边缘区可辨,淋巴细胞排列密集.结论:复方麦鹿芪人参制剂中皂苷、多糖和氨基酸含量与单味药相比均明显增加,且其抗肿瘤作用较单味药更强.
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鹿角脱盘5种提取部位对H22荷瘤小鼠免疫功能的影响
目的 评价鹿角脱盘5种提取部位对肝癌H22荷瘤小鼠免疫功能的影响.方法 将90只SPF级昆明种小鼠随机分成正常阴性对照组、模型组、阳性对照组、鹿角脱盘酸(盐酸)、碱(氢氧化钠)、盐(氯化钠)、醇(乙醇)和水5种提取部位组和鹿角脱盘原粉组共9组,每组10只.分别以脾脏组织病理变化、外周血和脾脏CD4+和CD8+T淋巴细胞百分比、血清中细胞因子IL-6、IL-12和抗体IgE、IgG、IgM水平为指标,评价鹿角脱盘的盐酸、氢氧化钠、氯化钠、乙醇和水5种提取部位提高荷瘤小鼠免疫功能的作用.结果 与模型组比较,鹿角脱盘5种提取部位能够保护荷瘤小鼠脾脏结构;提高脾脏和外周血CD4+/CD8+比值(P＜0.05);提高荷瘤小鼠血清中细胞因子IL-6、IL-12和抗体IgE、IgG、IgM的水平(P＜0.05).结论 鹿角脱盘碱溶液提取部位效果好;鹿角脱盘可能通过提高荷瘤小鼠体液免疫和细胞免疫的功能,逆转肿瘤发生发展对机体免疫功能的抑制作用,发挥抗肿瘤作用.
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梅花鹿角脱盘多肽的分离纯化及对乳腺癌细胞端粒酶活性的影响
目的 分离纯化梅花鹿鹿角脱盘多肽；以小鼠乳腺癌细胞系MA782为体外研究对象,初步研究鹿角脱盘多肽对肿瘤细胞端粒酶活性的影响.方法 采用酸提醇沉法提取鹿角脱盘多肽,再经Sephadex G-25凝胶过滤层析除盐,BCA法测定的多肽蛋白质含量,TRAP-银染法分析MA782细胞端粒酶活性的变化,再利用相对荧光定量PCR技术检测MA782细胞端粒酶催化亚基TERT基因的表达水平.结果 分离纯化出鹿角脱盘多肽粗提物,其蛋白质含量为91.800％;TRAP-银染法检测MA782细胞端粒酶的活性发现,与对照组细胞比较,多肽使细胞端粒酶活性有所下降,典型的重复序列条带数依次减少,多肽处理24 h、48 h、72 h、96 h、120 h后,MA782细胞中相对端粒酶活力分别为91.4、78.3、66.5、47.8、29.2、20.5,呈时间依赖性;相对荧光定量PCR法分析结果表明,与对照组比较,TERT基因的表达水平降低.结论 鹿角脱盘多肽对乳腺癌细胞端粒酶活性有一定的抑制作用,可为深入研究鹿角脱盘多肽抗肿瘤活性提供依据.
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梅花鹿鹿角脱盘总肽的分离纯化及其抗肿瘤活性研究
目的 分离纯化梅花鹿鹿角脱盘总肽,以小鼠乳腺癌细胞系MA782为体外研究对象,初步研究鹿角脱盘总肽的抗肿瘤活性.方法 采用酸提醇沉、真空旋转蒸发及冷冻干燥提取鹿角脱盘总肽,再经Sephadex G-25凝胶过滤层析除盐,BCA法测定总肽的蛋白质浓度,SDS-PAGE电泳分析总肽中的蛋白质,MTT法和流式细胞仪检测鹿角脱盘总肽对小鼠乳腺癌细胞系MA782增殖的影响和细胞周期的变化.结果 分离纯化出鹿角脱盘总肽粗提物,其蛋白质含量为91.800％;SDS-PAGE分析显示,鹿角脱盘总肽中主要含有11 kDa,18 kDa,40 kDa,64 kDa和80 kDa 5种多肽,总肽对小鼠乳腺癌细胞的增殖具有明显抑制作用,细胞周期各期细胞比例变化明显,当总肽浓度为30 mg/L时,作用72 h后细胞抑制率高为69.200％,Go/G1期细胞百分比为81.621％,S期细胞百分比为8.983％.结论 鹿角脱盘总肽对乳腺癌细胞具有抑制作用,为深入研究鹿角脱盘的抗肿瘤活性提供了实验依据.
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鹿角脱盘活性物质的研究与开发利用
鹿角脱盘为传统名贵中药鹿茸的副产品,其药用价值一直被忽视.随着科学技术的进步,对鹿角脱盘中生物活性物质的研究逐渐引起了人们的重视,文章综述了近年来鹿角脱盘的活性成分和药理作用的研究进展以及开发利用情况.
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鹿角脱盘治疗乳腺增生症的理论依据分析
乳腺增生症困扰多数育龄期女性.该文从乳腺增生症的中医学认识、鹿角脱盘的药用历史与现代研究,分析鹿角脱盘治疗乳腺增生症的可行性,为其以后的药用开发、机制研究提供理论依据.
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2015年版《中华人民共和国药典》收载的鹿源药材中硫酸软骨素含量分析
目的:研究2015年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)收载的鹿源药材中硫酸软骨素的含量差异.方法:采用稀碱-浓盐法提取,硫酸软骨素ABC酶酶解样品中的硫酸软骨素,应用高效液相色谱法对样品中的总硫酸软骨素及硫酸软骨素A、B、C含量进行测定;色谱条件:Hypersil SAX强阴离子硅胶色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以2 mol·L-1的氯化钠溶液(盐酸调pH至3.5)和水(盐酸调pH至3.5)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL· min-1,检测波长232 nm,柱温40℃.结果:梅花鹿鹿茸、鹿角(鹿角脱盘)、鹿角胶(鹿角脱盘胶)、鹿角霜(鹿角脱盘霜)中硫酸软骨素含量分别为2.06、0.46(0.42)、0.93(1.10)、0.22(0.17)g· kg-1;马鹿鹿茸、鹿角(鹿角脱盘)、鹿角胶(鹿角脱盘胶)、鹿角霜(鹿角脱盘霜)中硫酸软骨素含量分别为1.83、0.41(0.34)、0.91(0.87)、0.19(0.15)g· kg-1.结论:《中国药典》收载的鹿源药材中硫酸软骨素的含量差异很大,鹿茸中的高,鹿角胶、鹿角、鹿角霜中的依次递减.
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鹿角脱盘及其5种提取部位21种氨基酸含量对比分析
目的:建立RP-HPLC法同时检测鹿角脱盘及其提取部位中21种水解氨基酸含量,分析鹿角脱盘5种提取部位氨基酸含量和组成.方法:采用RP-HPLC法,异硫氰酸苯酯(PITC)作为衍生剂,乙腈-水(4∶1)为流动相A,0.1 mol· L-1乙酸钠溶液(乙酸调pH 6.5)-乙腈(97∶3)为流动相B,检测波长254 nm,流速1 mL· min-1,柱温36℃,以梯度洗脱的方法(0 min,100％B;11 min,98.5％ B;21.7 min,92.4％B;23.9min,89％B;27 min,86.6％B;39 min,70％B;42 min,30％B;45 min,0％B;52 min,0％B;55 min,100％B;70 min,100％B)检测鹿角脱盘及其5种提取部位中水解氨基酸含量.结果:21种氨基酸质量浓度在0.001 9～2.700 0μmol· mL-1范围内线性关系良好,R2均＞0.992 0,水解氨基酸的加样回收率在93.2％～102.8％,RSD在0.65％～2.6％之间;5种提取部位的氨基酸含量均显著高于鹿角脱盘粉(P＜0.05),但水提取部位、碱提取部位和醇提取部位间氨基酸含量无显著性差异(P＞0.05);药用氨基酸的比例达60％以上;鹿角脱盘碱提取部位中必需氨基酸与总氨基酸的含量比值和必需氨基酸与非必需氨基酸的含量比值为各组高.结论:本方法适合鹿角脱盘及其提取部位水解氨基酸含量的测定;5种提取部位较鹿角脱盘有更高的医学和营养学价值.
