首页 > 文献资料
-
二氯乙酸对人尿路上皮细胞膀胱癌相关基因甲基化、转录和蛋白表达的影响
目的 探讨二氯乙酸对人尿路上皮SV-HUC-1细胞膀胱癌相关癌基因c-myc和抑癌基因APC、SFRP1、SFRP5甲基化、转录水平以及蛋白表达量的影响,为阐明其毒性机制提供科学依据.方法 采用CCK-8法检测二氯乙酸对SV-HUC-1细胞的细胞毒性,确定不显著影响细胞存活率的浓度及处理时间.以1和2 mmol/L浓度二氯乙酸分别对SV-HUC-1细胞染毒24、48和72 h,采用甲基化特异性PCR(MSP)和real-time PCR对细胞中c-myc、APC、SFRP1和SFRP5基因的甲基化状态和mRNA表达量进行检测.以2 mmol/L浓度二氯乙酸对SV-HUC-1细胞染毒72 h,采用Western blot 对c-myc蛋白进行蛋白表达量检测.结果 二氯乙酸可使SV-HUC-1细胞中c-myc基因非甲基化程度升高,mRNA和蛋白表达量上升;可使APC、SFRP1和SFRP5基因甲基化程度升高,mRNA表达量下降.结论 二氯乙酸可影响SV-HUC-1细胞癌基因c-myc和抑癌基因APC、SFRP1、SFRP5的甲基化和表达,提示其可能有一定的表观遗传毒性.
-
缺血性卒中后认知障碍与颗粒蛋白前体(PGRN)及分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)的相关性研究
目的 探讨缺血性脑卒中后认知障碍患者血清中PGRN及SFRP5表达水平及与认知障碍的相关性.方法 选择2016年7月—2017年6月于佳木斯大学附属第一医院神经内科就诊的缺血性脑卒中患者120例作为研究对象.使用CDR认知障碍功能检测后进行分组,分成缺血性卒中后非认知障碍组(A组)48例、缺血性卒中后轻度认知障碍组(B组)42例、缺血性卒中后痴呆(C组)30例.同时选择正常人群(40名)作为对照.分别检测不同组别人群血清中PGRN及SFRP5表达水平,同时使用MMSE量表对认知功能进行检测.对结果进行数据分析处理.结果 ①四组患者血清中PGRN表达水平之间的差异有统计学意义(F=36.6,P=0.000).组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05).其中C组表达水平高(38.39±6.75)pg/mL,D组表达水平低(24.17±5.06)pg/mL.4组患者血清中SFRP5表达水平之间的差异有统计学意义(F=87.46,P=0.000).组间两两比较,差异有统计学意义(P<0.05).其中D组表达水平高(8.03±1.14)μg/L,C组表达水平低(4.67±0.69)μg/L.③急性缺血性脑卒中后的3组患者MMSE评分之间的差异有统计学意义(F=123.92,P=0.000).其中以A组高(26.31±3.57)分,C组低(11.08±4.36)分.缺血性脑卒中后认知能力量表MMSE评分与PGRN呈负相关(r=-0.245,P=0.006),MMSE评分与SFPR5呈正相关(r=0.229,P=0.011).结论 PGRN及SFRP5在缺血性卒中后认知障碍程度不同的患者血清中表达水平不同,且PGRN及SFRP5两者有助于认知障碍的早期评估与诊断.
-
SFRP5对小鼠肝癌细胞系Hepa1-6糖代谢的影响
目的 探讨SFRP5过表达和表达抑制对小鼠肝癌细胞Hepa1-6糖代谢相关基因的影响.方法 分别用空载病毒(Ad-GFP)、SFRP5过表达(Ad-SFRP5)及抑制病毒(Ad-shSFRP5)感染小鼠肝癌细胞Hepa1-6,通过real-time PCR和Western blot测定细胞中病毒感染效率;用葡萄糖氧化酶(GOD)法测定细胞的葡萄糖摄取率(GUR);采用real-time PCR和Western blot检测肝糖异生指标(PEPCK和G6Pase),经典胰岛素信号通路分子(InsR和AKT)的磷酸化水平.结果 在小鼠肝癌细胞Hepa1-6中,与Ad-GFP组相比,Ad-SFRP5病毒可明显上调SFRP5基因的表达,而Ad-shSFRP5则相反.与Ad-GFP组相比,SFRP5基因上调可提高葡萄糖摄取率,降低PEPCK和G6Pase mRNA(P<0.01)和蛋白水平(P<0.05),增强胰岛素信号通路分子InsR(P<0.01)和AKT(P<0.05)的磷酸化水平,而抑制SFRP5则作用相反.结论 SFRP5基因在Hepa1-6细胞中过表达,可改善糖代谢紊乱,降低肝细胞糖异生,增强胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗.
-
Wnt通路抑制因子SFRP5在皮肤鳞癌组织的甲基化状态及其作用
目的 检测皮肤鳞癌组织中Wnt通路抑制因子SFRP5甲基化状态及其与临床病理的关系,以探讨 SFRP5 在皮肤鳞癌发生发展中可能的作用机制.方法 运用 MassARRAY 质谱仪EpiTYPER甲基化方法检测皮肤鳞癌组织、癌旁组织和正常皮肤组织各40例样本中SFRP5基因启动子甲基化状态.结果 对皮肤鳞癌组织、癌旁组织、正常皮肤组织中SFRP5共2个CpG片段11个CpG位点1 142个(86.52%)CpG单位的甲基化率进行非参数秩和检验,在皮肤鳞癌与正常组织相比中检测到 6 个(6/11,54.54%)CpG位点甲基化率差异具有统计意义(P<0.05),其甲基化率在皮肤鳞癌高于正常对照组.癌旁组织与正常组织相比,有6个(6/11,54.54%)CpG位点甲基化率差异具有统计意义(P<0.05),其甲基化率在癌旁组织高于正常对照组织.其中CpG 1_5位点甲基化率在不同病理级别具有统计学差异(P<0.05),CSCCⅢ级>CSCCⅡ级>CSCCⅠ级.结论 SFRP5在皮肤鳞癌中呈现高甲基化率,可能参与了皮肤鳞癌的发生与发展过程.
-
冠心病患者血清中SFRP5水平及临床意义
目的 探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者血清中分泌型卷曲蛋白5(SFRP5)水平及临床意义.方法 选择2015年1月～2015年10月于大连医科大学附属大连市中心医院收治的冠心病患者97例为观察组,另选同期非冠心病患者45例为对照组,采用SYNTAX评分评价所有患者冠状动脉病变程度,采集血液标本检测血清分泌型卷曲蛋白5(SFRP5)及其它血液生化指标.结果 观察组患者体质指数(BMI)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)显著高于对照组(P均<0.05),血清低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇(TC)水平显著低于对照组(P均<0.05);观察组患者SFRP5水平为(37.49±4.95),显著低于对照组(t=15.275,P<0.001),急性冠脉综合征(ACS)患者SFRP5水平低于稳定型心绞痛(SAP)患者(P<0.05),ACS患者SYNTAX得分显著高于SAP患者(t=2.042,P=0.044);多元线性回归分析,结果显示SFRP5和hs-CRP与SYNTAX评分呈线性回归关系,且SFRP5的相关程度高于hs-CRP.结论 冠心病患者血清SFRP5水平显著降低,并且与冠状动脉病变程度呈负相关.
-
妊娠期糖尿病孕妇孕期SFRP5表达与胰岛素抵抗的关系
目的 探讨妊娠期糖尿病(GDM)孕妇孕期分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)的表达与胰岛素抵抗的关系.方法 筛选2016年1月～2017年3月在内蒙古自治区妇幼保健院产检的50名正常孕妇作为对照组,50例确诊为GDM的孕妇为实验组.比较两组孕24～28周空腹胰岛素、空腹血糖、血脂检查结果;采用酶联免疫吸附法对两组产妇剖宫产分娩时的肘静脉血清中的SFRP5表达水平进行检测;③分别取对照组及实验组各30例孕妇皮下脂肪,采取RT-PCR方法检测人脂肪细胞中SFRP5 mRNA的表达水平.结果 两组孕妇血清与脂肪中均有SFRP5表达,实验组的血清及脂肪中的SFRP5表达水平显著低于对照组(P＜0.01);血清SFRP5的表达与HOMA-IR、胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇呈负相关(r=-0.5706、-0.1479、-0.1541、-0.1366,均P＜0.05),与高密度脂蛋白胆固醇呈正相关(r=0.0866,P＜ 0.01).结论 SFRP5的异常表达与GDM的发生发展有关,通过临床监测SFRP5的表达情况能早期发现胰岛素抵抗的发生,降低GDM发病率.因此,孕期对孕妇进行良好的营养指导,严格体重管理,可以减少胰岛素抵抗,改善GDM结局.
-
脂肪细胞因子Sfrp5的研究进展
分泌型卷曲相关蛋白5(Sfrp5)是分泌型卷曲相关蛋白家族(Sfrs)的一员,作为Wnt信号通路的抑制剂,可通过调控Wnt信号转导通路参与胚胎发育、细胞增殖及肿瘤生成等过程.近研究表明Sfrp5是一种脂肪细胞因子,前体脂肪细胞分化成熟过程中被强烈诱导表达；其也可通过阻断脂肪组织Wnt信号通路,促进脂肪细胞分化,增加饮食诱导的肥胖.Sfrp5表达水平与肥胖和糖尿病相关,通过减弱非经典Wnt信号转导通路而减轻机体胰岛素抵抗.深入研究Sfrp5的生物学功能,将为治疗肥胖及相关代谢性疾病提供新的机会.
关键词： SFRP5 非经典Wnt信号通路 脂肪细胞因子 胰岛素抵抗 -
Wnt通路拮抗基因SFRP1SFRP2SFRP4SFRP5甲基化状态与肾透明细胞癌关系的研究
目的:研究SFRPs家族中SFRP1、SFRP2、SFRP4、SFRP5基因启动子区甲基化状况,探讨基因的甲基化与肾透明细胞癌发生发展的关系.方法:采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)方法检测66例肾透明细胞癌及30例癌旁组织中SFRP1、SFRP2、SFRP4、SFRP5基因启动子区甲基化状态及其与临床病理学资料之间的关系.结果:肾透明细胞癌组织中SFRP1、SFRP2、SFRP4、SFRP5基因甲基化率分别为77.3%(51/66)、72.7%(48/66)、59.1%(39/66)、69.7%(46/66)均显著高于相应的癌旁组织,结果有统计学意义(P<0.05).与临床病理学资料相联系,肾透明细胞癌组织中SFRP1、SFRP5基因,甲基化与肿瘤TNM分期相关;SFRP4基因甲基化与肿瘤的病理学分级相关(P<0.05).结论:SFRP1、SFRP2、SFRP4、SFRP5基因的甲基化均可能参与肾透明细胞癌的发生.SFRP1、SFRP5基因甲基化可能与肾透明细胞癌的发展,浸润和转移有关.SFRP4基因甲基化可能与肾透明细胞癌的恶性行为有关.
-
Wnt5 a、Sfrp5水平与寻常型银屑病及肥胖的相关性分析
目的：探讨Wnt5a、Sfrp5水平与寻常型银屑病及肥胖的关系。方法：收集正常人和寻常型银屑病血浆，分为非肥胖正常人组、肥胖正常人组、非肥胖银屑病组和肥胖银屑病组，每组各20例。采用ELISA检测血浆Wnt5a及Sfrp5水平，比较组间血浆 Wnt5a及Sfrp5水平并作相关分析。结果：与非肥胖正常人组血浆Wnt5a水平（0.082±0.054）ng／mL比较，非肥胖银屑病患者[（0.105±0.049）ng／mL]和肥胖银屑病患者[（0.320±0.155）ng／mL]血浆Wnt5a水平明显升高（P值均＜0.01），肥胖正常人群组[（0.105±0.049）ng／mL]无明显改变。非肥胖正常人组血浆Sfrp5水平为（75.11±19.72）ng／mL，肥胖正常人组[（55.85±13.65） ng／mL]、非肥胖银屑病组[（58.09±16.78） ng／mL]及肥胖银屑病组[（52.21±15.72）ng／mL]血浆Sfrp5水平较其降低（P值均＜0.05）。结论：Wnt5a及Sfrp5可能与寻常型银屑病及肥胖发生发展相关，是联系银屑病和代谢综合征之间的重要介质。
-
糖尿病肾病患者血清SFRP5、Klotho表达量与氧化应激、脂肪细胞因子分泌的相关性
目的:目的:探讨糖尿病肾病患者血清SFRP5、Klotho表达量与氧化应激、脂肪细胞因子分泌的相关性.方法:18O 例 DN 患者作为 DN 组、1OO 例健康志愿者作为正常对照组.对比两者血清SFRP5、Klotho表达量,氧化应激指标、脂肪细胞因子含量的差异.采用Pearson检验评估DN 患者血清SFRP5、Klotho表达量与氧化应激、脂肪细胞因子分泌量的相关关系.结果:DN组血清中SFRP5、Klotho的含量低于正常对照组;氧化应激指标MDA、LHP的含量高于正常对照组,SOD、CAT 的含量低于正常对照组;脂肪细胞因子Visfatin、Nesfatin-1、APN 的含量低于正常对照组,LEP的含量高于正常对照组.Pearson检验发现,DN患者血清中SFRP5、Klotho表达量与氧化应激指标含量、脂肪细胞因子分泌量直接相关.结论:DN患者血清SFRP5、Klotho异常低表达,且具体表达量可客观反映机体氧化应激程度、脂肪细胞因子异常分泌程度.
-
sFRP5抑制Wnt3a对黑素细胞黑素形成作用的初步研究
目的 研究sFRP5抑制Wnt3a对黑素细胞黑素形成的作用.方法 以永生化的黑素细胞为模型,利用腺病毒表达载体,设置Control组、Wnt3a处理组、Wnt3a+ sFRP5处理组进行以下实验:L-DOPA测定酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)活性;Masson-Fontanas银染色法观察黑素形成情况;RT-PCR检测酪氨酸酶相关蛋白1(tyrosinase-related protein 1, TRP-1)、TYR基因的表达;Western blot检测TRP-1、TYR蛋白的表达水平.结果 L-DOPA测定酪氨酸酶活性结果显示Wnt3a+ sFRP5处理组TYR活性低于Wnt3a处理组,差异有统计学意义(P＜0.05);Masson-Fontanas银染色法显示Wnt3a+sFRP5处理组形成的黑素明显低于Wnt3a处理组;RT-PCR检测结果显示Wnt3a+ sFRP5处理组能下调TRP-1、TYR基因的表达(P＜ 0.05);Western blot检测结果显示Wnt3a+ sFRP5处理组能下调TRP-1、TYR蛋白的表达水平(P＜0.05).结论 sFRP5能抑制Wnt3a对黑素细胞黑素生成的作用.
-
WNT信号抑制基因SFRP5 mRNA表达与胃癌的关系
目的 为了探讨WNT信号通路抑制基因SFRP5 mRNA表达水平与胃癌发生及临床病理之间的关系.方法 课题组前期收集了35例胃癌及癌旁样本,通过real-time PCR(Taqman探针法)检测该基因mRNA表达水平,利用2-ΔCt及2-ΔΔCt公式对表达数据进行处理,然后将表达数据与临床信息进行据统计分析.结果 终研究发现:①SFRP5基因在胃癌组织中表达水平较癌旁组织明显降低(P=0.0002),说明该基因的表达下调,在胃癌发生中起着重要作用;②表达数据与临床信息统计后发现该基因的表达水平与患者的淋巴结转移密切相关.结论 S FR P5基因的异常表达在胃癌进展中可能也起着重要作用.
