紫草素对乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体的表达和增殖及凋亡的影响

目的：探讨紫草素( shikonin,SK)对乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体表达及其对细胞的增殖和凋亡的影响。方法用MTT法检测不同浓度SK(0,1,2,4,8μmol/L)处理MCF-7细胞24,48,72 h的增殖抑制作用；集落克隆形成实验观察低浓度SK(0,0.1,0.2,0.4μmol/L)对MCF-7细胞增殖的影响；DAPI染色观察SK处理24 h对MCF-7细胞凋亡的影响；流式细胞术(PI单染法)检测不同浓度SK(0,1,2,4,8μmol/L)作用MCF-7细胞24 h细胞凋亡比率；Western blot法检测SK对雌激素受体表达的影响。结果 SK作用于MCF-7后细胞存活率随浓度增加而降低(P<0.05)。0.1,0.2,0.4μmol/L SK作用MCF-7细胞后抑制集落克隆形成,0.1,0.2,0.4μmol/L SK组分别与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。 DAPI荧光染色结果显示,随SK浓度(1,2,4,8μmol/L)增加,浓缩深染致密状的细胞核数目逐渐增加。不同浓度的SK(1,2,4,8μmol/L)作用于MCF-7细胞凋亡率分别为(7.0±1.27)%,(11.6±1.45)%,(15.1±1.36)%,(29.5±1.41)%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。 MCF-7细胞株中雌激素受体的表达随SK浓度的增加而降低；2,4μmol/L组与对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 SK可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖,并诱导其凋亡,其机制可能与雌激素受体表达降低有关。

双歧杆菌对母婴分离大鼠成年后肠道敏感性及结肠脑源性神经营养因子表达的影响

目的：研究双歧杆菌干预对母婴分离大鼠成年后内脏敏感性与脑源性神经营养因子( BDNF)表达的影响。方法新生期SD大鼠随机分成正常组( NS)、模型组( MS)、双歧杆菌组( MS+Bif)和溶剂对照组( MS+vehicle),通过新生期母婴分离建立大鼠肠道高敏感性模型。新生鼠断奶后双歧杆菌组及溶剂对照组给予灌胃干预。至大鼠成年(8周龄)时通过阶梯体积(0,0.4,0.8,1.2 ml)直肠球囊扩张评价四组大鼠内脏敏感性。蛋白质印迹法检测大鼠结肠BDNF的表达,免疫组织化学检测肥大细胞及类胰蛋白酶表达。结果与正常组比较,模型组VMR值在0.8 ml、1.2 ml显著升高(P<0.01),BDNF表达显著升高(P<0.01),肥大细胞计数及类胰蛋白酶表达均显著升高(P<0.01)。与模型组和溶剂对照组比较,双歧杆菌组VMR值在0.8 ml、1.2 ml显著降低(P<0.01或P<0.05),BDNF表达显著降低(P<0.05),肥大细胞计数及类胰蛋白酶均显著降低(P<0.01)。结论 BDNF参与母婴分离模型大鼠内脏高敏感性的发生,双歧杆菌干预可降低大鼠成年后BDNF表达而改善内脏高敏感性。

马尾松树皮提取物预处理对根面牙本质耐酸蚀和脱矿能力的影响

目的：观察马尾松树皮提取物(pinus massoniana bark extract,PMBE)预处理对根面牙本质耐酸蚀和抗脱矿能力的影响。方法制备根面牙本质块40个,并根据所用处理液的不同分为去离子蒸馏水组( deionized and distilled water,DDW)、NaF组、4%PMBE组和8%PMBE组。试件行pH循环处理8 d,测定pH循环前后牙体表面硬度差( D-value of surface micro-hardness,ΔSMH),观察脱矿牙本质表面形貌,酸性缓冲液中的钙离子释出率( calcium depletion rate,CDR)。结果各组pH循环前牙本质表面显微硬度无统计学差异(P>0.05)。4%PMBE组和8%PMBE组ΔSMH显著低于DDW组(P<0.05),8%PMBE组与NaF组无统计学差异(P>0.05)。各PMBE组CDR显著低于DDW组,8%PMBE组CDR显著高于NaF组,显著低于4%PMBE组(P<0.05)。 DDW组牙本质表面牙本质小管完全开放,NaF组牙本质小管处基本封闭,PMBE各组牙本质小管口成梭形或狭长微裂隙。结论 PMBE能提高牙本质的耐酸蚀脱矿能力,8%PMBE溶液效果较好,具备一定的预防牙本质过敏的作用。

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慢性低钠血症2例报告及常见病因分析

低钠血症指血清钠小于135 mmol/L,伴有或者不伴有细胞外液容量的改变。慢性低钠血症是临床常见的电解质紊乱之一,其病因种类繁多,主要危害神经系统、消化系统和骨骼肌功能。在临床上极为常见,约占住院患者的15%-30%[1]。其病因种类繁多,临床表现缺乏特异性,容易漏诊或误诊。抗利尿激素不适当分泌综合征( SIADH)是低渗性等容量低钠血症的常见病因,但容易漏诊或误诊。本文通过近期我科收治的2例不同病因的SIADH引起的低钠血症重新梳理慢性低钠血症的病因诊断思路。

糖尿病大鼠心肌组织内质网应激因子GRP78及caspase-12的表达及其对心脏结构和功能的影响

目的：观察糖尿病大鼠心肌内质网应激( endoplasmic reticulum stress, ERS)相关因子GRP78和caspase-12表达的变化,探讨其对心脏结构和功能的影响。方法采用链脲佐菌素腹腔注射制备糖尿病大鼠模型,取15只造模成功的大鼠,随机分为0周组、8周组和16周组,每组5只。采用颈动脉插管法检测大鼠血压、心率及心功能的各项指标。称取体质量、全心质量及左心室质量,计算大鼠心肌肥厚指数HWI及LVEI。 Masson染色观察心肌胶原纤维含量的改变,免疫组化及Western blot检测大鼠心肌组织中GRP78及caspase-12表达水平,Western blot检测cleaved caspase-3表达水平。结果三组大鼠血压及心率无统计学差异(P>0.05)。与0周组相比,大鼠平均左心室舒张末期压(LVEDP)及平均压下降大速率(-dp/dtmax)在8周及16周时明显升高(P<0.05)；平均压力上升大速率(+dp/dtmax)在16周时明显降低(P<0.05)。与0周组相比,大鼠心肌肥厚指标HWI及LVWI在8周时无明显变化(P>0.05),HWI及LVWI在16周时明显升高(P<0.05)。与0周组相比,大鼠心肌Masson染色在8周和16周时心肌细胞排列紊乱,胶原纤维明显增多。与0周组相比,免疫组化及Western blot检测大鼠心肌组织GRP78表达8周时明显增高(P<0.05),16周时GRP78表达明显降低(P<0.05)；caspase-12表达在8周时明显增高(P<0.05),16周时显著增高(P<0.01)；Western blot检测cleaved caspase-3表达在8周时明显增高(P<0.05),在16周时显著增高(P<0.01)。结论高血糖可以直接影响大鼠心肌结构和功能。高血糖早期GRP78表达的升高；随应激时间的延长, caspase-12及cleaved caspase-3表达明显升高。因此,心肌细胞ERS的激活可能是高血糖所致大鼠心肌结构和功能改变的原因之一。

血清脂蛋白相关磷脂酶A2与不稳定心绞痛患者主要危险因素的相关性

目的：探讨血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)与不稳定心绞痛患者主要危险因素的相关性。方法选择本院心脏内科2015-03~2015-06不稳定心绞痛住院就诊的52例患者为研究组,同期58例因胸痛行冠状动脉造影术( CAG)冠状动脉狭窄<30%且排除冠心病的患者为对照组。不稳定心绞痛患者入院后24 h内采用TIMI评分进行危险分层以及Gensi-ni积分,并检测血压,心率,肝、肾功能,血脂,凝血功能,心肌酶,N端脑利钠肽前体( NT-proBNP),高敏性C反应蛋白等指标。ELISIA法测定血清Lp-PLA2水平,并评价Lp-PLA2与不稳定心绞痛主要危险因素的相关性。结果不稳定心绞痛组脂蛋白( a)、低密度脂蛋白、肌钙蛋白I、肌酸激酶、NT-proBNP、纤维蛋白降解产物( FDP)、hs-CRP和Lp-PLA2水平明显高于对照组(P<0.05或P<0.01),Apo-A1则明显降低(P<0.05)；TIMI评分高危组和中危组Lp-PLA2水平与Gensini积分高于低危组(P<0.01)；不稳定心绞痛组血清Lp-PLA2水平与TIMI评分、Gensini积分、LDL、脂蛋白a、APTT以及D-二聚体呈现明显的正相关(P<0.05)；Lp-PLA2水平与TIMI评分、Gensini积分、LDL和脂蛋白a呈线性回归。结论 Lp-PLA2水平是不稳定心绞痛高危人群危险程度和冠脉病变严重程度的有力预测因素,并且Lp-PLA2水平的升高也直接反映了LDL和脂蛋白( a)与动脉粥样硬化不稳定斑块发展的相关性。

蜂胶对大鼠实验性脂肪肝的疗效及其机制

目的：观察蜂胶对大鼠实验性脂肪肝的疗效,并分析其作用原理。方法50只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、蜂胶低剂量组、高剂量组、易善复组。除正常组外,其余各组采用喂食高脂乳液(1 ml/100 g)+喂食含56%酒精的酒溶液(1 ml/100 g)+腹腔注射10%的CCl4菜籽油溶液(0.08 ml/100 g)的方法,使大鼠产生脂肪肝。所有大鼠于末次给药后禁食16 h,股动脉取血,检测血清谷草转氨酶( AST)、谷丙转氨酶( ALT)、甘油三酯( TG)、胆固醇( TC)、游离脂肪酸( FFA)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平；计算肝脏器系数,做肝组织病理学检验。结果利用喂食高脂乳液+喂食56%的酒溶液+腹腔注射CCl4菜籽油溶液的方法,可使大鼠产生脂肪肝,完成实验模型建立。相对于模型组,蜂胶高剂量组的TG、AST、TC、ALT、FFA水平下降明显(P<0.05),且效果优于低剂量组,与易善复组接近；与模型组比较,蜂胶高剂量组的血清炎症因子水平(IL-6、IL-8、TNF-α)也明显降低(P<0.05)；蜂胶高剂量组的肝脏器系数与模型组比较下降明显(P<0.05),病理结果也显示肝细胞的水肿和坏死现象减轻,脂肪空泡减少。结论蜂胶对大鼠脂肪肝有明显的疗效,其作用机制可能与影响血清炎症因子水平具有一定的关联。

表皮生长因子受体对乙醇所致肝细胞损伤中脂肪酸合酶表达的影响

目的：观察乙醇所致原代培养小鼠肝细胞损伤中脂肪酸合酶( FASN)的表达情况,探讨表皮生长因子受体( EGFR)在此过程中可能的作用。方法常规原代培养小鼠肝细胞,随机分为对照组(生理盐水组)、乙醇组、Gefitinib组及Gefitinib加乙醇组,收集并测定细胞裂解液中丙氨酸氨基转移酶( ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶( AST)活性和丙二醛( MDA)浓度；提取细胞总RNA及蛋白质,分别采用real time-PCR及Western blot方法检测FASN、固醇调节元件结合蛋白( sterol regulatory ele-ment binding proteins,SREBP-1c)及p-EGFR的基因及蛋白的表达。结果经150 mmol/L乙醇作用10 h的小鼠原代培养肝细胞贴壁生长状况变差,与对照组比较,细胞裂解液中ALT、AST活性及MDA浓度显著上升(P<0.01),出现肝细胞损伤。与对照组比较,Gefitinib组肝细胞的FASN、SREBP-1c及EGFR在基因及蛋白水平均无明显变化(P>0.05),乙醇组肝细胞的FASN、SREBP-1c及p-EGFR在基因及蛋白水平表达丰度均明显升高,其差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与乙醇组比较,Gefitinib加乙醇组肝细胞中FASN及SREBP-1c的基因及蛋白表达水平显著降低(P<0.01),其p-EGFR mRNA的表达量仍处于高值,但差异无统计学意义(P>0.05),而其蛋白表达水平出现显著下降(P<0.05)。结论 FASN在正常肝细胞中仅微量表达,而在乙醇所致肝损害的肝细胞中呈高表达,其表达水平可能受EGFR调节。