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新型羧甲基壳聚糖-聚乳酸-聚乙二醇共聚物合成及细胞相容性

陈凌峰;沈鑫;李荣烨;郗来顺;宿烽

摘要: 目的 将聚乳酸(PLA)与聚乙二醇(PEG)接枝聚合到羧甲基壳聚糖(CMCS)上,利用PLA的可降解性和PEG的亲水性对CMCS进行改性,并研究共聚物的细胞相容性.方法 以乳酸为原料,锌粉为催化剂在高温真空环境下聚合制备丙交酯,PEG开环丙交酯制备PEG-PLA两嵌段共聚物;以PEG-PLA为原料、DCC为偶联剂来制备中间体PEG-PLA-CHO,与CMCS反应终得到产物CMCS-PLA-PEG,并对合成的产物进行核磁共振氢谱及红外光谱检测,以确认结构;使L929细胞与得到的聚合物共培养,利用细胞噻唑蓝(MTT)方法,检测共聚物的细胞相容性.结果 用L-乳酸成功合成L-丙交酯,相对分子质量为144;然后利用PEG对丙交酯开环聚合得到PEG-PLA,相对分子质量为12 290;对PEG-PLA-OH进行醛化,与CMCS反应得到终产物CMCS-PLA-PEG,相对分子质量为223 670.将CMCS-PLA-PEG浸提液与L929细胞共培养,细胞相对生长率均在90%以上.表明新型共聚物CMCS-PLA-PEG浸提液不影响L929细胞的生长,无细胞毒性,具有较好的细胞相容性.结论 新型CMCS-PLA-PEG的细胞相容性良好,具有应用于生物医学领域的潜力.

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  • 羟基化多壁碳纳米管对RAW264.7细胞增殖及功能影响研究

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    目的 研究羟基化多壁碳纳米管对巨噬细胞RAW264.7的活性、吞噬功能及氧化应激的影响.方法 将质量浓度分别为1、10、100、200 μg/mL的羟基化多壁碳纳米管与原始多壁碳纳米管分别与小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞共育24、48、72h,采用CellTiter-Glo(R)发光法进行细胞活性测定,用2’,7’-二氯荧光黄双乙酸盐法(DCFH-DA)检测细胞内活性氧自由基(ROS)的生成.选24只小鼠,雌雄不限,鼠龄5~6周,体质量18~25g,随机分为4组,同时通过鸡红细胞吞噬实验检测细胞吞噬能力的变化.结果 CellTiter-Glo(R)发光法检测显示碳纳米管的细胞毒性作用呈现浓度依赖性,只有在质量浓度为10 μg/mL时,羟基化多壁碳纳米管比原始碳纳米管细胞毒性小,其他浓度两者之间差异无统计学意义(P>0.05).鸡红细胞吞噬实验证实两种碳纳米管具有促进小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的作用.结果还显示,在碳纳米管质量浓度为1 μg/mL和10 μg/mL时,羟基化多壁碳纳米管诱导细胞内ROS含量升高程度高于原始多壁碳纳米管,而在高浓度组(100 μg/mL和200 μg/mL),随着孵育时间延长,原始多壁碳纳米管诱导细胞内ROS含量不断增加,明显高于羟基化多壁碳纳米管对细胞的作用.结论 两种碳纳米管可显著抑制巨噬细胞增殖并提高细胞吞噬活性;不同浓度的多壁碳纳米管与细胞相互作用时,羟基化多壁碳纳米管与原始多壁碳纳米管诱导细胞内ROS升高机制不同.

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