生理学报杂志
Acta Physiologica Sinica 생리학보
- 主管单位： 中国科学院
- 主办单位： 中国科学院上海生命科学研究院,中国生理学会
- 影响因子： 0.86
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0371-0874
- 国内刊号： 31-1352/Q
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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触液核神经元蛋白激酶C磷酸化水平调制炎性痛大鼠的痛觉
本研究旨在探讨触液核在炎性疼痛中的作用及其机制.用大鼠左侧足底皮下注射完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)来建立炎性痛模型,用Western blot检测炎性痛模型大鼠触液核中蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)磷酸化水平的变化,用热缩足反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)检测来了解大鼠炎性痛觉情况.结果显示,炎性痛大鼠CFA注射后第1、3和7天TWL显著降低,注射CFA后24 h时触液核中p-PKC蛋白水平显著高于正常对照大鼠;侧脑室注射PKC抑制剂GF109203X可降低炎性痛大鼠触液核PKC磷酸化水平并提高痛觉阈值.以上结果提示,阻断触液核中PKC通路的信号转导可能是减轻或消除炎性痛的有效手段.
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外周神经损伤小鼠不同脊髓节段小胶质细胞和星形胶质细胞的激活状态
脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞在外周神经损伤引起的痛行为敏化中发挥重要作用.但是,神经损伤引起的胶质细胞激活在脊髓背角的空间分布尚不清楚.本文采用坐骨神经慢性压迫(chronic constriction injury, CCI)模型,研究了神经病理性疼痛小鼠之颈、胸、腰、骶段脊髓背角胶质细胞的激活状态.采用von Frey方法测定CX3CRlYFP、GFAPYFP转基因小鼠和野生型(wild type,WT)小鼠CCI模型组和假手术组小鼠后爪对机械刺激反应的阈值.免疫荧光标记方法用于检测脊髓背角小胶质细胞和星形胶质细胞的激活状态.结果显示,野生型、CX3CR1YFP和GFAPYFP小鼠在CCI术后3天,术侧后爪均出现明显的触诱发痛,即von Frey刺激引起的缩腿反应阈值(paw withdrawal threshold, PWT)与非手术侧和假手术组动物后爪相比显著下降,并且一直持续到术后第14天;CCI术后14天,CX3CR1YFP小鼠术侧腰段脊髓背角CX3CR lYFP-GFP免疫荧光强度明显增高(P＜0.01,n=6),其他各节段无明显改变;GFAPYFP小鼠术侧胸段、腰段和骶段脊髓背角GFAPWP-GFP免疫荧光强度均显著增高;小胶质细胞和星形胶质细胞的激活情况在WT小鼠Iba-1和GFAP免疫荧光组织化学染色中得到进一步证实;CX-3CR1YFP-GFP和GFApYFP-GFP免疫荧光信号分别与小胶质细胞标志物Iba-1和星形胶质细胞标志物GFAP共定位;WT小鼠CCI术后3天,术侧胸、腰和骶段脊髓背角Iba-1表达水平均明显上调,但GFAP上调仅发生在脊髓腰段.上述结果表明,较为广泛的脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞激活分别发生在痛觉敏化的早期和维持期,提示脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞的激活可能分别与继发性痛觉敏化的产生和维持相关.
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血管紧张素Ⅱ诱导血管外膜成纤维细胞表达炎症介质
血管外膜成纤维细胞可能是血管炎症反应的重要参与者.本研究旨在探讨血管外膜成纤维细胞在血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,AngⅡ)诱导下能否表达包括趋化因子、黏附分子、炎症因子在内的各种炎症介质及其对炎性细胞的黏附、趋化作用.以AngⅡ诱导的血管外膜成纤维细胞和AngⅡ灌注的大鼠分别进行细胞水平和动物水平的研究.用1×10-7 mol/LAngⅡ诱导体外培养的大鼠胸主动脉外膜成纤维细胞,real-time RT-PCR检测各炎症介质mRNA表达,免疫印迹、酶联免疫吸附法(ELISA)检测炎症介质蛋白表达和分泌.使用小鼠RAW264.7单核/巨噬细胞系进行体外细胞黏附和Transwell法体外细胞迁移趋化实验.结果显示,检测的12种炎症介质中,AngⅡ上调血管外膜成纤维细胞中4种炎症介质包括细胞间黏附分子1(ICAM-1)、P选择素(P-selectin)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、白细胞介素6(IL-6) mRNA的表达;AngⅡ上调ICAM-1、P-selectin蛋白表达和IL-6分泌,但对MCP-1的分泌量无影响.AngⅡ诱导后的血管外膜成纤维细胞及其上清培养液能增加RAW264.7单核/巨噬细胞的黏附和迁移.采用皮下埋泵输入AngⅡ (200 ng/kg per min)2周的方法制备大鼠整体模型,取大鼠的胸主动脉进行免疫荧光染色.结果显示AngⅡ灌注大鼠的胸主动脉外膜侧有明显CD68阳性细胞聚集,且外膜侧ICAM-1、P-selectin、MCP-1和IL-6的表达都较对照组有不同程度上调.本研究结果表明血管外膜成纤维细胞在AngⅡ诱导下能表达分泌ICAM-1等炎症介质,这些炎症介质可能参与黏附、趋化单核/巨噬细胞,提示血管外膜成纤维细胞可能介导血管的炎症反应.
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Flor-Essence营养补剂对运动大鼠IL-6、IL-12、肿瘤坏死因子-α和自然杀伤细胞的影响
本文旨在探讨运动和Flor-Essence营养补剂干预对大鼠免疫功能的影响.将8周龄Sprague-Dawley (SD)大鼠随机分为6组:对照组、生理盐水+训练组、低剂量Flor-Essence+训练组、低剂量Flor-Essence组、高剂量Flor-Esse nce+训练组和高剂量Flor-Essence组.生理盐水+训练组、低剂量Flor-Essence+训练组和高剂量Flor-Essence+训练组大鼠每日在水箱中进行游泳训练,时间为35 min/天,每周训练6天,持续4周.低剂量Flor-Essence+训练组、低剂量Flor-Essence组、高剂量Flor-Essence+训练组和高剂量Flor-Essence组每日训练前灌胃2.5(低剂量)或5mg/mL(高剂量)Flor-Essence补剂,生理盐水+训练组灌胃同体积生理盐水.在第4周后一天对所有大鼠进行一次性力竭运动,力竭后即刻处死,取动脉血用试剂盒测定血清白细胞介素-6 (IL-6)、白细胞介素-12 (IL-12)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,取脾制备单细胞悬液测定自然杀伤细胞(NK细胞)活性.结果显示,生理盐水+训练组大鼠血清IL-6含量低于对照组.与对照组相比较,低剂量和高剂量Flor-Essence组血清IL-6、IL-12和TNF-α含量降低,力竭运动时间增加.5 mg/mL Flor-Essence对于大鼠血清IL-6、TNF-α含量和力竭运动时间的改善作用要强于2.5 mg/mL Flor-Essence.与生理盐水+训练组相比,低剂量和高剂量Flor-Essence+训练组血清IL-6、TNF-α含量均降低,力竭运动时间增加;只有高剂量Flor-Essence+训练组血清IL-12含量显著降低,NK细胞活性显著增加.以上结果提示,Flor-Essence结合运动可以改善大鼠免疫功能和运动机能,且5mg/mL浓度的作用效果要优于2.5 mg/mL.
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增强型绿色荧光蛋白融合对Ano1钙激活Cl-通道生理特性的影响
本研究旨在探讨融合在Ano1钙激活Cl-通道(anoctamin1)C末端的增强型绿色荧光蛋白(EGFP)对Ano1生理特性的影响.分别构建融合和未融合EGFP的Ano1真核表达载体,通过脂质体介导分别将这两类真核表达载体转染至Fischer大鼠甲状腺滤泡上皮(FRT)细胞,倒置荧光显微镜下观察融合和未融合EGFP的Ano1在FRT细胞中的表达与定位;荧光淬灭动力学检测Ano1转运I-的能力.结果显示,融合和未融合EGFP的Ano1均表达于FRT细胞膜上,且均能被Ca2+激活,融合和未融合EGFP的Ano1转运I-的能力无明显差异.以上结果提示,Ano1和EGFP-Ano1具有相似的生理特性.
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异丙酚对离体视上核神经元兴奋性突触传递的抑制作用
为了解静脉全麻药异丙酚对视上核神经元兴奋性突触传递的作用并分析其可能机制,本研究采用细胞内记录技术,观察异丙酚(0.1～3.0 mmol/L)对下丘脑冠状切片视上核(supraoptic nucleus,SON)神经元突触后电位(postsynaptic potential,PSP)的作用.结果显示,在局部电刺激SON背外侧区域可诱发PSP的8个细胞中,异丙酚能浓度依赖性降低88％细胞的PSP幅度(P＜0.01)、曲线下面积、时程、半幅时程和10％～90％衰减时间(P＜0.05).1.0 mmol/L异丙酚能可逆地完全取消29％ (2/7)细胞的PSP.压力喷射外源性谷氨酸在SON神经元诱发伴有膜电阻减小的去极化反应,异丙酚对谷氨酸反应呈可逆的浓度依赖性抑制,但0.3 mmol/L异丙酚仅完全取消同步记录的PSP,却未能完全抑制谷氨酸反应.用GABAA受体阻断剂印防己毒素(30 μmol/L)预处理后,7个细胞兴奋性突触后电位(excitatory postsynaptic potential,EPSP)增大,再灌流异丙酚后观察到异丙酚对EPSP的抑制作用减弱.结果提示,异丙酚抑制SON神经元兴奋性突触传递的作用可能同时涉及突触前和突触后机制.在突触后可能通过激活GABAA受体而抑制SON神经元的兴奋性突触传递,但高浓度的异丙酚也可能涉及对兴奋性谷氨酸受体的直接抑制.
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地高辛逆转乳腺癌MCF-7/阿霉素细胞的耐药性及其机制
本研究旨在探究地高辛对乳腺癌MCF-7/阿霉素(ADR)细胞耐药性的影响,并探讨其分子机制.将正常培养的MCF-7和MCF-7/ADR细胞分别设为对照组和ADR组;经地高辛(100 nmol/L)处理48 h后的MCF-7/ADR细胞为ADR+ digoxin组;用shRNA技术沉默HIF-1a基因的MCF-7/ADR细胞为shHIF-1α组,并设置对照组为shcontrol组.采用CCK-8法检测ADR的细胞毒作用,以测定IC50与耐药指数;用RT-PCR法检测缺氧诱导因子-1α (HIF-1α)和多药耐药基因1(multidrug resistance-1,MDR1)的mRNA水平;用Western blot方法检测HIF-1α和MDR1蛋白的表达水平;用流式细胞术检测细胞凋亡.结果显示,ADR组细胞对ADR的耐药指数高达115.6,地高辛使其耐药指数下降至47.2 (P＜ 0.05);ADR组细胞中HIF-1α与MDR1的mRNA和蛋白水平均高于对照组细胞(均P＜ 0.05),而地高辛可显著降低ADR组细胞HIF-1α与MDR1的蛋白水平,以及MDR1的mRNA水平(P＜0.05),但对HIF-1α的mRNA水平无明显影响;经shRNA干扰HIF-1a基因表达后,HIF-1α和MDR1的蛋白水平均显著降低(P＜0.05);沉默HIF-1a基因能显著增强ADR对ADR组细胞的促凋亡作用(P＜0.05).地高辛可有效地诱导shcontrol组和shHIF-1α组细胞凋亡(P＜0.05),但二组之间无显著差异.以上结果提示,地高辛可通过下调HIF-1α蛋白表达从而在转录水平抑制MDR1的表达,也可通过不依赖HIF-1α的通路诱导MCF-7/ADR细胞凋亡,进而在一定程度上逆转MCF-7/ADR细胞的耐药性.
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屋尘螨和卵蛋白对小鼠气道上皮粘附分子整合素β4和细胞间粘附分子-1表达的影响
为了探明不同变应原与气道粘附分子之间的关系,本研究采用屋尘螨(house dust mite,HDM)和卵蛋白(ovalbumin,OVA)分别致敏BABL/c小鼠,采用Buxco小动物肺功能分析系统观察气道的反应性,计数外周血白细胞数目,肺部HE染色观察气道的病理改变,利用免疫组织化学技术检测气道上皮粘附分子整合素β4 (integrin β4,ITGB4)和细胞间粘附分子-1(inter-cellular adhesion molecule-1,ICAM-1)的表达.结果显示,与对照组比较,HDM组和OVA组小鼠外周血白细胞数目明显增加,肺部炎症细胞浸润,气道上皮ITGB4表达下调,而ICAM-1表达上调.然而,OVA组小鼠气道上皮ICAM-1的表达上调较HDM组更为明显,炎症细胞的浸润也更严重.采用siRNA沉默16HBE人支气管上皮细胞株ITGB4的表达后,ICAM-1的表达上调.以上结果均提示,变应原能够通过改变气道粘附分子谱来影响肺内炎症反应.
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线粒体乙醛脱氢酶在心肌缺血再灌注中的作用——从实验台到临床
急性心肌梗死是目前严重威胁人类健康的致死疾病之一,及时再灌注是限制心肌梗死面积的有效方法,然而,再灌注本身会导致进一步的心肌损伤.线粒体乙醛脱氢酶(mitochondrial aldehyde dehydrogenase,ALDH2)被广泛熟知为代谢乙醛的酶.越来越多的证据表明ALDH2在心肌缺血再灌注中起到心肌保护的作用.动物实验表明ALDH2可减少心肌梗死面积,减轻心功能紊乱,防止再灌注性心律失常的发生.突变型ALDH2*2基因编码的ALDH2酶活性显著降低,而该基因的突变率在亚洲人群中约为40％.在亚洲人中的流行病学调查表明,ALDH2基因多态性与急性心肌梗死面积和冠状动脉疾病发生率紧密相关.因此,将ALDH2作为治疗心肌缺血再灌注损伤的靶点将很有前景.本文综述ALDH2对缺血再灌注心肌的保护作用及机制,并探讨ALDH2的转化应用研究前景.
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疼痛共情:一个新的生物-社会心理-行为学实验动物模型
疼痛共情是一种亲社会行为,是一种能够理解和分享他人情绪状态的能力.从广义上讲,共情也是利他主义的社会行为学基础.共情发育受损可能与自闭症、自恋症、人格障碍、精神分裂症和抑郁等发生密切相关.研究共情的脑机理不仅具有重要的科学和临床意义,还具有普遍的社会意义.然而,由于共情一直被认为是人之所以区别于其它动物的主要特征,所以长期以来很少有学者触及,致使这个领域一直处于空白状态.2006年加拿大麦吉尔大学一个研究组首先发现一只处于疼痛状态的小鼠可以在社交时通过情绪传染把疼痛传染给它的同笼伴侣,使其痛阈下降,痛反应增强,但陌生者间无此现象.2014年我们实验室又发现一只大鼠在与处于疼痛状态的同笼大鼠社交30 min后,痛阈仍下降,痛反应仍增强,提示疼痛共情可长时间持续(共情记忆).我们还探查出内侧前额叶(包括前扣带回、前边缘皮质、下边缘皮质)参与大鼠的疼痛共情持续,提示中枢神经系统内存在一个与疼痛共情有关的神经网络环路.本文将简要介绍人和啮齿类动物疼痛共情的研究现状和挑战,旨在为研究疼痛及其情绪共病提供一个新的模型和研究思路,更为认识脑功能提供一个生物-社会心理-行为学研究范式.
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突触囊泡循环研究进展
神经信号传递始于神经递质从突触囊泡的释放.在此过程中,突触囊泡需要经历释放-回收的动态过程以维持突触前终末的结构和功能的完整性.突触的传递始于一个动作电位沿轴突传递到终扣(bouton)使其去极化,突触前轴突末梢内的钙离子浓度升高并触发突触囊泡膜与突触前膜融合而导致递质释放,然后囊泡膜被回收利用.这些看似简单的"释放—回收—再释放"的过程其实包含了很多极其精细的调控步骤、中间过程和动态变化;越来越多的证据表明在不同刺激条件下囊泡释放的能力和运动方式有很大的差别.分子和细胞水平的研究一直致力于研究突触囊泡的这些多样性,希望找出囊泡的结构与其功能的确切关系,了解对囊泡的调控如何影响突触传导和可塑性.不同类型突触表现出不同的突触前囊泡活动性质也逐渐为人们所认识.科学家们对突触前囊泡循环过程的深入研究过程与研究技术手段的进步相辅相成,推动了这个领域的发展.本文将主要从三个方面对突触前囊泡循环的研究进展进行总结和讨论:(1)突触前囊泡池(vesicle pools)与囊泡循环(vesicle recy-cling);(2)谷氨酸能和GABA能突触前囊泡循环分子机制差异研究进展;(3)突触前囊泡循环机制研究的方法比较和新发展.
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大鼠肾小球分离和离体培养方法的建立
本文旨在建立大鼠肾小球分离和离体培养的实验方法.应用差异过筛法分离技术分离大鼠肾小球,用Ⅳ型胶原酶消化法去除Bowman囊,用相差显微镜观察肾小球纯度和形态结构,台盼蓝拒染法检测肾小球的活性,双标免疫荧光技术鉴定肾小球固有细胞的标志蛋白nephrin和α-SMA的表达分布,荧光显微镜和酶标仪检测Ang Ⅱ对离体培养肾小球ROS水平的影响,real-time PCR方法观察离体培养的肾小球中TGF-β1 mRNA和collagen Ⅳ mRNA的水平.结果显示,离体培养的肾小球结构完整,无包囊,毛细血管袢结构清晰;离体培养48 h后,肾小球内细胞仍具有活性;激光共聚焦显微镜下可见肾小球内足细胞和间质细胞的标志蛋白nephrin和α-SMA表达清晰;给予离体培养的肾小球Ang Ⅱ刺激后,肾小球ROS的产生明显增加,TGF-β1和collagen Ⅳ mRNA水平升高.以上结果提示,大鼠肾小球的分离及离体培养技术建立成功,该分离方法获得的肾小球可以进行离体培养及药物作用观察,为基础和临床研究提供实验技术和研究手段.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 02 03 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1997 | 01 02 03 04 05 06 |
