生理学报杂志
Acta Physiologica Sinica 생리학보
- 主管单位： 中国科学院
- 主办单位： 中国科学院上海生命科学研究院,中国生理学会
- 影响因子： 0.86
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0371-0874
- 国内刊号： 31-1352/Q
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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CyPA-CD147-ERK1/2-cyclin D2信号通路在大鼠左心室肥厚过程中表达上调
亲环素A (cyclophilin A,CyPA),其受体CD147及其下游信号通路在心肌肥厚过程中变化情况不清楚.本实验目的是研究血清CyPA、心肌中CyPA、CD147及其信号通路与心肌肥厚的关系.大鼠左心室肥厚模型用2肾2夹(2-kidney,2-clip,2K2C)方法制备,并观察1周,4周和8周.用左心质量和体重比值(ratio of left ventricular heart weight to body weight,LVW/BW)及心肌横切面面积(cross sectional area,CSA)评价左心室肥厚.用ELISA检测血清中CyPA水平.用蛋白免疫印迹和免疫组化观察CyPA、CD147、磷酸化ERK1/2和cyclin D2在心肌组织中表达水平.在第4周和8周,与对照组比较,2K2C组大鼠血压明显增高,LVW/BW和CSA显著增加.ELISA结果显示2K2C组大鼠血清中CyPA水平随着左心室肥厚程度加剧而明显增加.蛋白免疫印迹和免疫组化结果表明,CyPA、CD147、磷酸化ERK1/2和cyclin D2在2K2C组大鼠心肌组织中表达水平也随左心室肥巴厚发展而增加.本研究表明血清中CyPA水平以及心肌组织中CyPA-CD 147-ERK 1/2-cyclin D2信号通路在心肌肥厚发展过程中被激活并表达上调,提示该信号通路在左心室肥厚发病机制中可能发挥了作用.
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Calcineurin在心衰小鼠左心室跨壁电压依赖性钾电流下调中的作用
本文旨在探讨钙调神经磷酸酶(calcineurin,CaN)在心衰心脏左室跨壁电压依赖性钾电流下调中的作用及意义.主动脉弓部分结扎法制备小鼠压力超负荷心衰模型,采用全细胞膜片钳技术,记录应用CaN抑制剂环孢素A(cyclosporine A,CsA)后,假手术或心衰小鼠心室肌内膜下(subendocardial,Endo)、外膜下(subepicardial,Epi)心肌细胞电压依赖性钾电流各种成分及动作电位(action potential,AP)的变化.结果显示:各组小鼠左室游离壁心肌细胞的CaN活性存在明显区域性差异,Endo细胞CaN活性均高于Epi.心衰时Endo、Epi细胞CaN活性明显升高,而使用CsA后CaN活性降低.在心衰模型小鼠上,CsA可部分逆转I10密度的下调,完全逆转Endo和Epi细胞IK,slow密度的下调,完全逆转Endo细胞Iss密度的下调.CsA可部分逆转心衰小鼠心室肌细胞动作电位时程(action potential duration,APD)的延长,使得增高了的AP跨壁复极离散度(transmural dispersion of repolarization,TDR)明显降低,Endo、Epi细胞APD90的比值由心衰时的4.8∶1恢复到2.6∶1.以上结果提示,心衰时Endo、Epi细胞CaN不同程度的激活是电压依赖性钾电流非同步下调,AP的TDR增大的重要原因,抑制CaN可望成为防治心衰心律失常和猝死的新策略.
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微环境诱导iPSCs和BMSCs向神经元样细胞分化——Reelin对细胞分化和极性化的调节作用
本文旨在研究小鼠诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)和骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)在大脑微环境的诱导下向神经元样细胞分化的过程,探讨与细胞极性化相关的关键分子,以及Reelin蛋白对干细胞的分化的影响.用细胞脑片共培养以及细胞脑匀浆上清共培养的方法,将iPSCs和BMSCs分别与野生型(WT)和reelin基因缺失小鼠(reeler小鼠)的海马脑片以及脑匀浆上清共培养,观察二者在脑片微环境下的细胞分化和极性化改变.结果显示,与WT和reeler小鼠脑片共培养的iPSCs和BMSCs均出现神经元样细胞的分化;与WT小鼠海马脑片共培养的这两种细胞呈双C字型海马片层化分布,同时表现出很强的方位性,而与reeler小鼠海马脑片共培养的细胞分布则无明显规律性,呈均匀分布.脑匀浆上清培养基共培养的iPSCs和BMSCs在共培养72 h后,部分类神经元样细胞可以被神经元特异标记物(NeuN)所标记,显示出分化成为功能性神经元.而在共培养初期(2～4天),reeler微环境培养基中神经元分化和突起生长相对滞后.以上结果提示,在大脑微环境的诱导下,iPSCs和BMSCs可以向神经元样细胞,甚至向功能性神经元分化,Reelin蛋白参与了细胞极性化过程,而Reelin缺乏可造成神经细胞极性紊乱,延迟神经元分化及突起生长.
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全细胞膜片钳研究离体小鼠下丘亚核神经元电生理特性
下丘(inferior colliculus,IC)是听觉通路的重要中继站.本实验采用红外可视脑片全细胞膜片钳技术对昆明小鼠IC神经元的电生理特性进行研究.共记录获得88个神经元,其中背侧核(dorsal cortex of IC,ICd)神经元21个,中央核(central nucleus of IC,ICc)神经元43个,外侧核(external cortex of IC,ICx)神经元24个.根据神经元对注入正电流的发放模式,将其分为起始型(6.8％,n=6),适应型(39.8％,n=35)和持续型(53.4％,n=47)三种类型.约一半的神经元(49/88)具有超极化电流激活的内向电流(hyperpolarization-activated inward current,Ih).ICd和ICc神经元主要表现为持续型(61.9％和67.4％),ICx主要为适应型(75％).比较发现,ICd、ICc及ICx神经元之间在动作电位发放阈值和膜时间常数等参数上存在显著差异.以上结果表明IC亚核神经元的电生理特性存在差异,这些差异可能与神经元的类型、它们所接受的投射以及在声信息处理中作用不同相关.
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激活脊髓MrgC受体抑制大鼠痛觉过敏
本研究旨在探讨激活脊髓MrgC (Mas-related gene C)受体对痛觉过敏的作用及细胞学机制.在大鼠足底皮下注射(Tyr6)-γ2-MSH-6-12 (MSH)或完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)形成痛觉过敏或炎性痛模型,通过缩足反射和免疫组织化学等方法观察鞘内给予MrgC受体特异性激动剂MSH或牛肾上腺髓质8-22肽(bovine adrenal medulla 8-22,BAM8-22)对痛觉过敏的影响.结果显示,鞘内给予MSH不影响正常大鼠对热伤害性刺激引起的缩足潜伏期变化,但能抑制足底注射MSH引起的急性痛觉敏感反应,还能降低CFA引起的痛觉过敏,鞘内给予μ阿片受体(μ-opioid receptor,MOR)拮抗剂CTAP(D-Phe-Cys-Tyr-D-Trp-Arg-Thr-Pen-Thr-NH2)能阻止鞘内给予MSH的延迟抗痛觉过敏作用.鞘内给予BAM8-22能显著降低CFA引起的脊髓背角L3～L5节段一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)阳性神经元数量和降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)样免疫活性物质的表达.以上结果提示,鞘内激活MrgC受体通过抑制NOS阳性神经元活性和下调CGRP阳性产物表达来降低痛觉过敏,并能通过间接机制调制MOR起到延时持续抗痛觉过敏作用.因此,MrgC受体激动剂有望成为一类新型抗炎症痛觉过敏的药物.
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Caveolin-1与葡萄糖转运蛋白4共同参与PC12细胞缺糖应激调节
近年研究表明,作为构成胞膜窖(Caveolae)主要的组分之一,窖蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)除了在细胞胆固醇平衡、信号转导和整合以及细胞生长等过程中起重要作用外,还参与细胞营养改变的神经元代谢调节过程.本文旨在探讨Cav-1和葡萄糖转运蛋白4 (glucose transporter 4,GLUT4)在神经细胞内营养环境改变时的功能变化和关系.采用Western blot和激光共聚焦法观察了两种蛋白在PC12细胞葡萄糖剥夺(glucose deprivation,GD)前后的表达水平与分布,发现GD 6h后能诱导PC12细胞内Cav-1和GLUT4蛋白表达水平增加,CCK检测和流式细胞术结果显示细胞活力下降、细胞内钙离子浓度([Ca2+]i升高、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)下降.采用siRNA技术敲低Cav-1基因后,GD组PC12细胞死亡率和[Ca2+]i进一步升高,MMP进一步下降;Cav-1敲低细胞系和甲基化β环化糊精(methylated-β-Cyclodextrin,M-β-CD)法处理实验组中,Cav-1和GLUT4蛋白表达均下降.此外还发现,GD可促进GLUT4从细胞质转位到细胞膜.结果提示,Cav-1可能通过调节GLUT4在GD情况下发挥神经保护作用.
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第四脑室注射orexin-A及OX1R拮抗剂对大鼠摄食及自由活动的影响
本文旨在探讨第四脑室注射orexin-A及orexin 1型受体(orexin-1 receptor,OX1R)拮抗剂SB334867对肥胖和正常大鼠摄食和自由活动的影响.采用高脂饲料诱导建立肥胖大鼠模型,分别在肥胖和正常大鼠第四脑室注射不同剂量orexin-A或SB334867,观察光照和黑暗环境下两种大鼠0～4 h摄食量及活动量的变化.结果显示,第四脑室注射不同剂量orexin-A,光照条件下,正常和肥胖大鼠0～4 h摄食量和活动量均较生理盐水对照组明显增加,呈剂量依赖关系(P＜ 0.05～0.01);且肥胖大鼠摄食量和活动量显著高于正常大鼠;黑暗条件下,不同剂量的orexin-A对正常和肥胖大鼠摄食量和活动量均没有明显改变(P＞0.05).第四脑室注射不同剂量SB334867,光照条件下,正常和肥胖大鼠0～2 h,2～4h摄食量和活动量均较生理盐水对照组明显减少(P＜0.05);且肥胖大鼠摄食量和活动量均显著高于正常大鼠;黑暗条件下,正常和肥胖大鼠摄食量和活动量均没有明显改变(P＞0.05).以上结果提示,第四脑室周核团可能是orexin-A及OX1R作用靶点之一;光照条件对orexin-A和OX1R生理功能的发挥可能具有重要影响.
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亚低温状态下冷诱导RNA结合蛋白调节氧化还原系统对海马神经元的保护作用
本文旨在探讨冷诱导RNA结合蛋白(cold inducible RNA-binding protein,CIRP)是否通过抑制氧自由基的生成而起到抑制神经元凋亡的作用.采用体外分离培养的原代大鼠海马神经元,随机分为5组:常温对照组(37℃)、空病毒感染组、CIRP过表达组、CIRP干扰组、亚低温32℃处理组.将后四组移入32℃含有5％ CO2培养箱内培养.采用Annexin V-FITC/PI标记后用流式细胞术对海马神经元进行细胞凋亡检测、Western blot检测CIRP的表达,同时采用ELISA方法进行相关氧化还原指标(T-AOC,GSH-Px,SOD,MDA)检测.Western blot及流式凋亡检测结果显示:与常温对照组相比,单纯亚低温处理组及CIRP过表达组海马神经元中CIRP的表达量明显增加(P＜0.01),神经元的凋亡率明显下降;而干扰CIRP的表达后,与单纯亚低温处理组相比,细胞凋亡的数目则明显增加(P＜0.05).相关氧化还原指标检测结果显示:亚低温32℃处理组、CIRP过表达组与常温对照组、CIRP干扰组、空病毒感染组相比均有显著差异(P＜ 0.05或P＜0.01).以上结果表明:亚低温处理通过上调CIRP的表达,抑制细胞内氧自由基的生成,从而直接或间接地抑制了氧自由基诱导的神经元凋亡,进而起到海马神经元的保护作用.
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E3泛素连接酶Cbl-b对白细胞介素1诱导细胞效应的负调控作用
本研究旨在探讨E3泛素连接酶Cbl-b对滑膜细胞中白细胞介素1(interleukin-1,IL-1)信号通路的影响.采用Western blot方法检测Cbl-b基因缺失小鼠滑膜细胞中Cbl-b及IL-1诱导的基质金属蛋白酶13 (matrix metalloproteinase 13,MMP-13)的表达水甲.胶原底物与滑膜细胞培养上清进行共孵育后通过SDS-PAGE分析胶原的降解情况.结果显示,与野生型相比,Cbl-b基因敲除的小鼠滑膜细胞在IL-1刺激条件下表达更多的MMP-13,且培养上清具有更强的降解胶原的能力.这些结果提示,Cbl-b对IL-1诱导的细胞效应具有负调控作用.
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Wnt5a与炎症信号在炎症性疾病中的交叉互动
Wnt5a是一种分泌型糖蛋白,是高度保守的Wnts蛋白家族成员之一.在生物体内Wnts家族参与调控细胞命运、胚胎发育、细胞增殖、迁移和分化等重要过程.研究表明,Wnt5a的表达调控及其信号转导与炎症应答密切相关,提示Wnt5a及其信号通路在炎症性疾病的发生、发展中发挥着重要作用.本文从Wnt5a与炎症因子、炎症信号转导通路以及炎症疾病等方面进行阐述和展望,旨在为以Wnt5a为靶点进行炎症性疾病的防治提供理论依据.
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肾上腺髓质素在炎性疼痛和吗啡耐受中的作用
背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)和脊髓背角中痛介质(pronociceptive mediator)的增加是炎性疼痛与阿片耐受发生的重要病理机制.肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)属于降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)家族,是新近证实的痛介质.研究表明,炎症和重复应用吗啡时,DRG和脊髓背角中AM含量和释放都增加.鞘内给予AM受体阻断剂AM22-52能抑制炎性疼痛与吗啡耐受,表明DRG和脊髓背角中AM受体活动的增加参与炎性疼痛和吗啡耐受发生的病理过程.本文综述了近有关研究进展,讨论了AM参与这两类疾患发生的神经学机制.
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密度梯度离心法同时分离新生大鼠原代心肌细胞与成纤维细胞
本文旨在探讨一种改良的同时分离新生大鼠原代心肌细胞和成纤维细胞的方法,以建立良好的原代心肌细胞及成纤维细胞研究模型.无菌状态下取Wistar乳鼠(出生不超过2天)心室,用Ⅱ型胶原酶消化,控制消化时间及次数、搅拌速度、离心次数和速度等,结合Percoll密度梯度离心法分离心肌细胞及成纤维细胞,进行体外培养,观察细胞形态,继而用0.2％台盼蓝染色检测细胞存活率,免疫荧光染色法检测心肌肌钙蛋白Ⅰ (cardiac troponin Ⅰ,cTnⅠ)、波形蛋白(Vimentin)及α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达,分别用于鉴定心肌细胞和成纤维细胞纯度.结果显示,本方法5次分离的心肌细胞平均存活率达92％,纯度达95％以上,细胞生长状态良好,可见贴壁自发搏动;成纤维细胞平均存活率达96％,纯度达94％.本方法能同时获得新生大鼠原代心肌细胞和成纤维细胞,具有很高的产量、存活率及纯度,且操作简便,耗时短,重复性好,是一种较为理想的原代细胞分离、培养方法,可满足各种后续实验要求.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 02 03 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1997 | 01 02 03 04 05 06 |
