生理学报杂志
Acta Physiologica Sinica 생리학보
- 主管单位： 中国科学院
- 主办单位： 中国科学院上海生命科学研究院,中国生理学会
- 影响因子： 0.86
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0371-0874
- 国内刊号： 31-1352/Q
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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大鼠垂体细胞液泡内存在黄体生成激素(LH)
研究者普遍认为糖蛋白激素存在于促性腺激素(gonadotrophin, GTH)细胞的颗粒内, 目前在生殖内分泌领域内对糖蛋白激素形成与释放的研究也主要集中在细胞内颗粒的变化上.我们近年的研究发现, 大鼠垂体GTH细胞内黄体生成激素(luteinizing hormone, LH)的分泌与细胞内液泡的形态变化有密切的关系, 细胞的形态也随液泡的形态变化而变化, 因而推测"LH的储存与释放可能与液泡有极大的关系”.为进一步揭示垂体细胞的液泡内是否存在LH和探讨哺乳动物垂体细胞的液泡是否具有储存与释放LH的功能, 本研究对大鼠垂体细胞的液泡进行了分离和纯化, 用SDS-PAGE、 Western immunobloting及Con A/HRP等方法分别对纯化的垂体、大脑皮层及肝脏组织的液泡进行了蛋白质、 LH及糖蛋白的分析.结果显示: (1)垂体、皮层及肝脏细胞的液泡内均含有丰富的、分子量大小不等的蛋白质成分, 不同组织的细胞液泡内蛋白质成分有许多是相似的; (2)垂体组织及其液泡内均含有LH, 而且在相同浓度的蛋白量中, 两者LH的水平并无明显差异; (3)垂体、皮层和肝脏组织液泡内均有分子量不同的糖蛋白, 但只有垂体细胞的液泡内才有与LH位置相同的糖蛋白染色谱带.上述结果表明: 虽然哺乳动物不同组织的细胞液泡内含有许多相似的蛋白质成分, 但LH是特异性地存在于垂体细胞液泡内.在这些LH分子中, 至少有一部分是已经装配了糖基的完整LH分子.因此, 垂体细胞的液泡有可能具有储存与释放LH的功能.
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应激大鼠肾胞液[～3H]醛固酮结合活性的变化
为探讨烫伤引起病理性应激时大鼠肾胞液醛固酮结合活性的变化及可能的调节机制, 以[～3H]-醛固酮为配体, 用放射性配基-受体结合分析法测定了正常对照组、轻度烫伤组和重度烫伤组大鼠肾胞液醛固酮结合活性的结合容量(Rt)和表观解离常数(Kd); 采用体内注射TNF-α、 IL-1β中和抗体和α-促黑色素细胞刺激激素(α-melanocyte-stimulating hormone, α-MSH)和合成肽KPV (Ac-D-Lys-L-Pro-D-Val)等措施调节其改变.结果发现, 肾胞液存在两种不同结合容量、不同亲和力的醛固酮结合活性受体.与正常对照组的Rt (Rt1: 41.6±7.2 fmol/mg pro; Rt2: 317.6±70.0 fmol/mg pro)相比, 轻烫组的Rt (Rt1: 41.4±5.0 fmol/mg pro; Rt2: 314.8±45.7 fmol/mg pro)无显著差异(P>0.05; P>0.05); 重烫组的Rt (Rt1: 22.4±5.4 fmol/mg pro; Rt2: 196.3±32.5 fmol/mg pro)则显著下降(P<0.01; P<0.01).体内注射TNF-α与 IL-1β中和抗体、α-MSH及KPV均能明显提高重烫组Rt值.结果提示, 重度烫伤大鼠肾胞浆醛固酮结合活性降低, TNF-α、 IL-1β中和抗体、α-MSH及KPV均可防止重度烫伤引起病理性应激时醛固酮结合活性降低.
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17β-雌二醇下调血管平滑肌内皮素A型受体的表达
为进一步探讨雌激素对心血管的保护作用, 实验在双侧卵巢去势大鼠模型和培养的血管平滑肌细胞(VSMCs)上, 观察17β-雌二醇(E2)对血管反应性及VSMCs增殖的影响, 以RT-PCR 和Western blot检测内皮素受体(ETAR)的表达.结果显示: 去势雌性大鼠血管对内皮素(ET-1)的反应性明显增高, ETAR特异性受体阻断剂BQ123能完全阻断ET-1对VSMCs增殖的影响, E2能明显抑制ET-1对VSMCs增殖的作用, RT-PCR结果显示E2能抑制ETAR mRNA的表达, Western blot进一步证实E2能抑制ETAR蛋白表达; E2受体阻断剂Tamoxifen能部份抑制ET-1对VSMCs的增殖及ETAR的mRNA和蛋白的表达.以上结果提示: ET-1促VSMCs增殖的效应主要是由ETAR介导的, 雌激素能通过下调ETAR来抑制ET-1对VSMCs促增殖的作用和血管对ET-1的反应, 且此作用与雌激素受体有关.
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成年大鼠海马CA1区锥体细胞KATP通道的特性
为了解成年大鼠海马CA1区锥体细胞KATP通道的特性, 实验采用膜片钳技术的内面向外式记录法, 在急性分离的CA1区锥体神经元上, 研究了可被胞浆侧ATP所抑制的钾离子单通道的特性.当细胞膜内外两侧的K+浓度均为140 mmol/L时, 通道的电导为63 pS, 翻转电位为1.71 mV, 通道呈弱内向整流性.在负钳制电位时, 通道开放时常被短时程的关闭所打断, 而在正钳制电位时, 这种短时程的关闭状态明显少于负钳制电位时.但通道开放概率未见明显的电压依赖性.ATP对通道活动的抑制作用呈浓度依赖性, 抑制通道活动50%的ATP浓度为0.1 mmol/L.KATP通道的特异性阻断剂tolbutamide (甲糖宁, 1 mmol/L)可完全阻断通道的活动, 而KATP通道开放剂diazoxide (二氮嗪, 1 mmol/L)则不增强通道的活动.
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肾上腺髓质素对大鼠损伤性心肌肌浆网功能的改善
通过观察下述五个指标, 评价肾上腺髓质素(adrenomedullin, Adm)对大鼠损伤性心肌肌浆网功能的改善程度: 左心室压力大变化速率(±dp/dtmax)、肌浆网钙摄取和释放及钙泵活性.皮下注射异丙肾上腺素(isoproterenol, ISO, 69 μmol/kg体重)制备大鼠心肌损伤坏死模型.摘取心脏后用Adm 灌流, 观察左心室压力大变化速率(±dp/dtmax); 制备并提纯心肌肌浆网(sarcoplasmic reticulum, SR)膜, 测定SR Ca2+摄取和释放速率、 SR 钙泵活性和钙通道蛋白～3H-ryanodine受体的大结合量.结果发现, 5×10-5 mol/L Adm灌流能使ISO损伤的大鼠心脏左室±dp/dtmax分别增加16.9% (2?135±281 vs 1?980±302)和29.2% (1?375±267 vs 1?064±355, 均P<0.05); SR Ca2+摄取和释放率分别增加23.0% (15.0±1.4 vs 12.2±1.2)和43.5% (6.6±1.0 vs 4.6±0.6, 均P<0.01); SR Ca2+-ATPase活性和～3H-ryanodine受体大结合量(Bmax)分别增加24.2% (P<0.01) 和42.2%(P<0.05).提示Adm对ISO诱导的大鼠心肌损伤具有保护作用, 其机制可能与Adm增加SR Ca2+-ATPase活性、增加～3H-ryanodine所致SR Ca2+ 摄取和释放升高有关.外源性给予Adm对损伤心肌可能具有临床治疗作用.
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大鼠杏仁核5-HT3受体参与免疫调制
实验通过大鼠侧脑室和杏仁核给予5-HT3受体激动剂1-phenylbiguanide (PBG), 用～3H-TdR掺入法测定脾细胞丝裂原(concanavalin A, Con A和lipopolysaccharide, LPS)刺激增殖效应, 用活化脾细胞增殖法测定IL-2生成, MTT法测定自然杀伤(natural killer, NK)细胞活性和用放射免疫测定血浆皮质酮水平, 以探讨大鼠杏仁核5-HT3受体在免疫调控中的作用.结果表明: 5-HT3受体拮抗剂granisetron (GNT, 0.1～0.4 mg/kg ip)剂量依赖地增强Con A和LPS刺激的脾细胞增殖, 作用在连续给药5 d明显; 双侧脑室给予PBG (5 μg/side)可增强Con A和LPS刺激的脾细胞增殖效应, 作用在连续给药3 d明显; 双侧和单侧中央杏仁核给予PBG 0.5 μg均增强Con A刺激的脾细胞增殖和IL-2生成; 底内侧杏仁核给予同剂量PBG仅增强LPS刺激的脾细胞增殖效应, 不影响Con A刺激的脾细胞增殖和IL-2生成; 中央杏仁核给予PBG升高血浆皮质酮的作用较底内侧杏仁核给予等量PBG引起的升高血浆皮质酮作用明显(P<0.01).侧脑室、中央杏仁核和底内杏仁核给予PBG对丝裂原刺激的脾细胞增殖效应影响不同, 但均被同时同部位给予GNT所拮抗, 提示杏仁核中央核和底内侧核的5-HT3受体可能以不同方式参与Con A或LPS刺激的脾细胞增殖效应的调制.
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Bay K8644及 nifedipine对大鼠下丘脑神经元L-型Ca2+通道特性的影响
采用神经元急性分离和膜片箝技术以及细胞贴附式方式记录通道活动, 探讨DHP类Ca2+通道激动剂Bay K8644及拮抗剂nifedipine对下丘脑神经元L-型Ca2+通道的影响. 结果显示, 在Bay K8644作用下, 通道开放形式发生变化, 明显可见多级开放; 通道平均开放时间、平均开放概率显著增加, 但单通道电导无明显变化.nifedipine的作用与Bay K8644相反. 结果提示, Bay K8644对下丘脑神经元L-型Ca2+通道有明显激动作用, nifedipine有显著抑制作用.
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帕金森病模型大鼠脑内多巴胺与铁含量的关系
实验采用原子吸收分光光度法、快速周期伏安法、高效液相电化学检测等方法, 研究以6-羟基多巴(6-OHDA)制备的帕金森病(PD)模型大鼠黑质内铁含量的变化, 铁对多巴胺(DA)能神经元的直接毒性作用以及铁离子螯合剂甲磺酸去铁胺的神经保护作用.结果发现: (1) PD大鼠损毁侧黑质内铁含量为非标准PD大鼠的3倍左右; (2) PD大鼠损毁侧纹状体内铁含量无明显改变; (3)单纯注射6-OHDA的大鼠其损毁侧纹状体(CPu) DA的释放量和含量均明显降低; (4)侧脑室预先注射甲磺酸去铁胺, 再重复上述实验, 损毁侧CPu DA释放量和含量均无明显改变; (5)单侧黑质内注射40 μg FeCl3后, 大鼠损毁侧CPu内DA释放量和含量显著降低.上述结果提示, 6-OHDA可导致CPu DA释放量及含量减少, 此过程有铁的参与.由于铁可导致DA神经元死亡, 因此铁含量的增加可能是DA含量减少的原因之一, 甲磺酸去铁胺具有保护DA神经元的作用.
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延髓头端腹外侧区血管紧张素Ⅱ对脊髓投射神经元氨基酸递质释放的调节
用脊髓(T8)中间外侧柱(IML)微透析方法结合高效液相色谱(HPLC)技术, 研究延髓头端腹外侧区(RVLM)微量注射血管紧张素Ⅱ(ANGⅡ, 100 pmol, n=11)后脊髓IML氨基酸递质释放的变化.在RVLM 区微量注射ANGⅡ(100 pmol, n=11), 能显著增加(P<0.01)脊髓(T8) 内天门冬氨酸(ASP, 从4.75±1.01升至8.90±2.28 pmol/20 μl)和谷氨酸(GLU, 从18.99±8.64 升至 73.88±29.26 pmol/20 μl)的释放.在同一RVLM部位注射losartan (10 nmol, n=8)可以显著抑制注射ANGⅡ引起的GLU释放升高反应(P<0.05).免疫荧光双标记结合共聚焦显微镜观察到RVLM 内62%～91%的谷氨酸能神经元呈AT1 受体免疫阳性.此结果提示ANGⅡ诱发的脊髓内谷氨酸释放可能来源于RVLM 内AT1 受体免疫阳性的谷氨酸能脊髓投射神经元.
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血管紧张素-(1-7)对大鼠血管平滑肌细胞
采用Western blot、氚-胸腺嘧啶(～3H-TdR)和氚-亮氨酸( ～3H-Leu )掺入等技术和方法, 用血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)和血管紧张素-(1-7)[Ang-(1-7)]刺激大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs), 观察和分析Ang-(1-7)对VSMCs增殖及蛋白激酶C (PKC)和胞外调节蛋白激酶(ERK)表达的影响.Ang-(1-7)能明显抑制基础和Ang Ⅱ刺激下的VSMCs PKC-ζ和ERK1/2蛋白表达(P<0.01或P<0.05), 减少～3H-TdR 和～3H-Leu掺入量(P<0.01或P<0.05).结果提示, Ang-(1-7) 对VSMCs增殖有抑制作用, 这可能与影响PKC-ζ和ERK1/2蛋白表达有关.
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肾缺血增强大鼠延髓腹外侧头端区神经元电活动和Fos蛋白表达
在67只切断两侧缓冲神经的麻醉Sprague-Dawley大鼠, 应用细胞外记录的电生理方法和免疫组织化学技术, 分别观察肾缺血对延髓腹外侧头端区巨细胞旁外侧核神经元自发放电活动和Fos蛋白表达的影响.所得结果如下: (1) 左肾动脉阻断后, 28个单位的放电频率由11.40±1.08 增至 21.1±1.74 spikes/s (P<0.001), 血压和心率无明显变化 (P>0.05); (2) 在17个放电单位中, 应用腺苷受体拮抗剂8-苯茶碱(8-phenyltheophylline, 10 mg/kg)可明显抑制肾缺血的兴奋效应 (P<0.05); (3) 肾缺血后, 延髓腹外侧头端区的Fos蛋白样免疫反应神经元显著增加 (P<0.01); (4) 预先应用8-苯茶碱可明显减弱肾缺血所激活的Fos蛋白表达反应 (P<0.05). 以上结果提示: 肾缺血增强延髓腹外侧头端区神经元的放电活动和Fos蛋白表达, 而此作用可能与肾脏缺血所产生的腺苷激活肾内感受器有关.
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胍丁胺对Dahl盐敏感型高血压大鼠和Dahl盐抵抗型大鼠血流动力学的影响
在麻醉Dahl盐敏感型(DS)高血压大鼠和Dahl盐抵抗型(DR)正常血压大鼠, 研究了静注胍丁胺(agmatine, AGM)对血流动力学的影响.结果显示: (1) 静注AGM (1, 10, 20 mg/kg)可剂量依赖性地降低DS和DR大鼠的HR, MAP, LVP, ±LVdp/dtmax, CI和TPRI. 在DS高血压大鼠, MAP, LVP, ±LVdp/dtmax和TPRI较DR正常血压大鼠下降幅度要大; 而HR和CI在两种大鼠下降幅度无差异.需特别提出的是, DS高血压大鼠在静注高剂量AGM (20 mg/kg)后, 各项血流动力学指标出现先降低而后升高的现象, 这一结果在DR正常血压大鼠并未出现. (2) 预先静注咪唑啉受体(IR)和α2-肾上腺素能受体阻断剂(α2-AR) idazoxan (2.5 mg/kg)可部分阻抑AGM的血流动力学效应. (3) 预先静注α2-肾上腺素能受体阻断剂yohimbine (4 mg/kg)同样可部分阻抑AGM的效应. (4) 预先静注咪唑啉受体(I1)和α2-肾上腺素能受体阻断剂efaroxan (2.5 mg/kg)则完全阻断AGM的血流动力学效应.以上结果表明, AGM可显著降低麻醉DR 和DS大鼠的HR, MAP, LVP, ±LVdp/dtmax, CI和TPRI; 此效应似主要由I1-IR所介导, 并有I2-IR和α2-AR参与.
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5-HT能纤维向猫脊髓膈神经核及延髓膈肌前运动神经元的投射
实验在6只成年猫上进行.将WGA-HRP微量注入C5膈神经核内, 通过逆行追踪及5-HT免疫组织化学FITC荧光双重标记方法, 研究了中缝核5-HT能神经元向脊髓膈神经核的投射, 同时观察了延髓膈肌前运动神经元接受5-HT能纤维投射的情况.结果在中缝苍白核观察到较多的HRP-5-HT双标记神经元, 在中缝大核、中缝隐核观察到少数散在的双标记神经元.在延髓疑核、孤束核腹外侧区域的HRP单标记神经元(即膈肌前运动神经元)周围观察到5-HT能轴突末梢.结果表明: 发自中缝苍白核5-HT能神经元的传出纤维可投射到脊髓膈神经核; 延髓膈肌前运动神经元接受5-HT能纤维的传入投射.
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肾上腺髓质素和降钙素基因相关肽受体在血管平滑肌细胞的脱敏受体活性修饰蛋白的作用
新近研究发现, 肾上腺髓质素(adrenomedullin, ADM)和降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)均能与降钙素受体样受体(calcitonin receptor-like receptor, CRLR)结合, 其配体特异性由受体活性修饰蛋白(receptor activity-modifying protein, RAMP)调控.本工作在离体培养的大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells, VSMCs)上观察ADM和CGRP受体脱敏现象, 以探讨CRLR/RAMP假说在心血管组织方面的意义.用无血清培养基(serum-free medium, SFM)和含有10-8 mol/L ADM、 CGRP和肾上腺髓质素前体原N-末端20肽(proadrenomedullin N-terminal 20 peptide, PAMP)的SFM培养, 再用10-8 mol/L ADM或CGRP和磷酸二脂酶的抑制剂异丙基次黄苷(isobutyryl methyxanthine,IBMX)与VSMCs进行第二次孵育, 然后收集细胞, 测定VSMCs cAMP含量.10-8 mol/L ADM、 CGRP和PAMP单独与VSMCs孵育, VSMCs cAMP含量分别较SFM组高191% (P<0.01)、 385% (P<0.01) 和 67%(P<0.05); 预先用10-8 mol/L ADM或CGRP与 VSMCs 孵育可降低随后的CGRP刺激VSMCs 产生cAMP, 分别较单次CGRP 孵育少 44% (P<0.05) 和48% (P<0.01); 预先用100 nmol/L蛋白激酶A (PKA)抑制剂 H-89处理VSMCs, 可完全阻断ADM和CGRP预处理诱导的第二次CGRP刺激的VSMCs cAMP含量减少.表明VSMCs对CGRP的脱敏过程是通过PKA途径实现的.预先用ADM、 CGRP处理VSMCs后, 用ADM第二次孵育, 细胞内 cAMP含量与单次ADM孵育无明显改变; PKA抑制剂H-89与VSMCs孵育, 无论对单次ADM刺激或对ADM和CGRP处理的第二次刺激的 cAMP生成均无影响.用PAMP处理VSMCs后, ADM和CGRP的第二次刺激的VSMCs cAMP水平无明显改变(P>0.05). 结果提示, 在离体培养的大鼠VSMCs, ADM受体不脱敏而CGRP受体对预先用ADM和CGRP处理后的激动剂的第二次刺激都脱敏, 表明ADM和CGRP的脱敏现象不一致.
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家兔脑干呼吸相关结构向斜方体后核的轴突投射CB-HRP逆行示踪研究
实验在10只成年家兔上进行.斜方体后核(RTN)内微量注入霍乱毒素β亚单位耦合辣根过氧化酶(CB-HRP)后, 在脑桥Klliker-Fuse核、臂旁内侧核及臂旁外侧核观察到大量HRP标记神经元.在延髓孤束核腹外侧区、疑核和后疑核、面神经后核的腹侧及内侧区观察到少数HRP标记神经元.在面神经后核、疑核及后疑核区域观察到大量HRP顺行标记末梢纤维.实验结果表明: RTN和脑桥及延髓的呼吸相关结构之间存在纤维联系.
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海马脑片盲法膜片钳全细胞记录技术
本文较为详细地介绍了海马脑片盲法膜片钳全细胞记录技术, 对其关键步骤和需要注意的问题进行了重点说明, 同时对CA1区锥体神经元突触活动的特点、电压门控性Ca2+通道以及谷氨酸(glutamate, Glu)、γ-氨基丁酸(GABA)受体通道电流性质等进行了观察和分析.实验结果为采用海马脑片盲法膜片钳全细胞记录技术研究海马神经元离子通道动力学性质和中枢神经系统药物对突触活动的影响提供了可靠的依据.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 02 03 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1997 | 01 02 03 04 05 06 |
