胰腺星状细胞在2型糖尿病胰岛纤维化进程中的影响

目的 观察胰腺星状细胞 (pancreatic stellate cell,PSC) 在2 型糖尿病 (Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM) 大鼠胰岛中定植,探讨其在T2DM 胰岛纤维化中的作用机制.材料方法分离、培养4 月龄雄性GK 大鼠 (Goto-Kakizaki,GK) 胰岛,24 小时后继续培养胰岛,免疫荧光检测胰岛外生蛋白表达,如细胞波形蛋白(vimentin),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) 和胶原1(Col 1)的表达;GK 大鼠胰腺5μm 连续冰冻切片,行 Masson 染色和免疫荧光检测 (α-SMA,胰岛素(insulin),α-SMA/insulin).对照组用性别年龄匹配Wistar 大鼠.结果 1.培养7d 后,少许不规则鱼眼状细胞自GK 大鼠胰岛内生长出,并特异性表达vimentin 和α-SMA 和Col 1 ; 2.胰岛外生细胞在体外至少可以传代40 代;3.GK 大鼠胰岛形态大小不一,胰岛内Masson 蓝染色胶原纤维明显增多;纤维化区域胰岛素分泌缺失,α-SMA 染色阳性细胞增多.结论活化PSC 定植于T2DM 模型4 月龄GK 大鼠纤维化胰岛中,并可能在 T2DM 胰岛纤维化和胰岛β细胞功能衰竭中发挥了一定作用.

胰岛素样生长因子结合蛋白7,皮肤纤维瘤和隆突性皮肤纤维肉瘤的新鉴别诊断指标

胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7) 的消失是黑素瘤和结肠癌发生中的关键步骤.但IGFBP7 在皮肤纤维瘤(DF) 和隆突性皮肤纤维肉瘤(DFSP) 的表达尚无报告.我们通过免疫组化对DF 和DFSP 组织中的IGFBP7 表达情况进行研究,并将结果与传统的鉴别指标进行对比.为分析DF 和DFSP 组织中IGFBP7 的表达状况,我们选取了28 例DFSP 和30 例DF 标本进行免疫组化研究,结果与传统指标CD34,factor XIIIa,CD10 andstromelysin 3 (ST3) 进行对比.结果 28 例DFSP 组织中IGFBP7 有6 例(21.4%) 表现为阳性,而30 例DF 组织中IGFBP7 有28 (93.3%) 例表现为阳性.DFSP 组织中IGFBP7 阳性率显著性低于DF 组织(P<0.01).结果 表明IGFBP7 在DFSP 与DF 的鉴别诊断中能作为阴性的标记,IGFBP7 与CD34,factor XIIIa 和 ST3 联合进行免疫组化分析能提高DFSP 与DF 鉴别诊断的准确性.

温热疗法治愈儿童甲下疣一例

近来,中国医科大学附属第一医院皮肤科用局部温热疗法治疗儿童甲下疣取得了一定的疗效.用温热治疗仪(专利号:ZL 2007 2 0185403.3; 中国医科大学)对患儿甲下疣进行加热,设定皮肤表面温度为42℃,持续30 分钟.连续治疗3 天,间隔15 天后,连续治疗2 天.治疗结束一个月时患儿自觉皮损部位疼痛,皮损周围发红;治疗后三个月,皮损完全脱落,指甲及皮肤基本恢复正常,无瘢痕及色素沉着.随访6 个月未复发.

抑制STAT5a、STAT5b 对大肠癌细胞增殖、周期和凋亡的影响

分析和探讨信号转导与激活因子STAT5 的两个亚型STAT5a、STAT5b 对大肠癌细胞增殖、周期及凋亡的影响.方法 培养大肠癌细胞SW1116 和LoVo,分别瞬时转染小干扰RNA 静默 STAT5a、STAT5b.CCK8 试剂盒检测细胞增殖情况;同时以流式细胞仪分析SW1116 和LoVo 细胞周期;Annexin V/PI 染色检测凋亡;提取细胞蛋白,Western blot 检测下游周期相关蛋白(p16INK4A 和p27kip1)和凋亡相关蛋白(BCL-2 和survivin)的表达变化.结果 大肠癌细胞SW1116 和LoVo 静默 STAT5a 和STAT5b 后,细胞增殖能力明显降低,细胞发生G1 期阻滞,并且发生凋亡.周期相关蛋白p16INK4A 和p27kip1 明显增高,凋亡相关蛋白BCL-2、survivin 明显降低.并且,STAT5b 对大肠癌增殖凋亡的影响比STAT5a 明显,STAT5a 与STAT5b 对大肠转移癌LoVo 的影响比大肠原位癌SW1116 明显.结论 抑制STAT5 两亚型可通过调节下游周期及凋亡相关蛋白的表达从而降低结肠癌细胞的增殖能力,且其在大肠转移癌中的作用可能更为重要.

流体细胞培养系统对三维培养的成骨细胞的影响

设计制作流体细胞培养系统并研究流体剪切力对三维培养成骨细胞黏附增殖的影响.方法:取SD 乳鼠颅盖骨,采用组织块法获取成骨细胞,接种于部分脱蛋白天然牛骨支架,将实验组支架置于自制的细胞培养系统中,流速设置为0.3ml/min 作用1d 后增加流速至1ml/min,对照组支架静置培养.4d 和8d 后收集实验组和对照组样本,SEM 观察细胞在支架表面和内部的黏附、生长情况.SEM 观察显示:流体剪切力作用下的细胞增殖分化较快,较早地向支架内部爬行生长而且细胞长轴明显沿加力方向延长.本实验成功制作了流体剪切力细胞培养系统并在体外证实流体剪切力有利于细胞在支架上黏附和增殖.

CCR1趋化因子受体是肝癌肝移植患者预后判断指标

目的:分析CCR1 趋化因子受体表达水平与肝癌肝移植术后复发转移及患者预后相关性.方法:收集206例肝癌肝移植手术标本构建组织芯片,采用EnVision 免疫组化技术检测CCR1 表达强度,并分析CCR1 表达强度与肝癌肝移植患者临床病理特征及预后的关系.结果:CCR1 表达水平与肿瘤大小(P=0.03)、是否有癌栓(P=0.03)、是否符合UCSF 标准相关(P=0.01),而与年龄、性别、肝炎史、AFP 水平、肝硬化、Child 分级、包膜、数目、分化程度、TNM 分期、是否符合Melian 标准无关(P>0.05);CCR1 表达水平与无瘤生存时间显著相关(P=0.012).结论:CCR1 趋化因子受体可以作为肝癌肝移植患者预后判断的指标.

周期性压应力作用下MLO-Y4细胞基因差异表达的初步研究

目的:本研究对骨细胞实施应力刺激,进行基因表达谱检测,从基因转录组水平阐明MLO-Y4 细胞的力学敏感基因,考察加载应力的力值、频率、作用时间对力学敏感基因表达的影响以及三者之间的相互作用.方法:本实验运用小鼠全基因组寡核苷酸芯片、qRT-PCR 等方法,筛选出CCS(周期性压应力)作用下MLO-Y4 细胞的差异表达基因,并进行验证,考察IL-6 的mRNA 表达变化与应力力值、频率、作用时间的关系.结果:1.芯片和qRTPCR检测出的基因表达率具有良好的相关性,其皮尔森线性相关值R=0.903.2.具统计学意义的GO Terms 是"趋化因子活性";出现频率高及具统计学意义的KEGG 通路是"MAPK"和"细胞因子- 细胞因子受体相互作用".3.在CCS 作用下MLO-Y4 细胞IL-6 mRNA 的表达受压应力力值、频率和作用时间的影响:当三个变量中的两个一定时,IL-6 mRNA 的表达随着第三个变量的增加而增加.结论:1.CCS 作用下MLO-Y4 细胞差异表达基因(以IL-6 为代表)以表达上调为主,且与破骨细胞和骨吸收密切相关.2.在CCS 作用下,MLO-Y4 细胞IL-6 mRNA 表达受压应力力值、频率和作用时间的共同影响.

改良型TAT-凋亡素融合蛋白的制备及活性检测

目的:制备并检测改良型TAT-Apoptin 融合蛋白的抗肿瘤活性.方法:将前期诱导表达的改良型TAT- 凋亡素融合蛋白,用GST 亲和层析柱纯化并经Lowry 法测定其蛋白浓度.用CCK-8 法检测EJ 细胞的抑制率.结果:纯化后的改良型TAT-Apoptin 融合蛋白能有效抑制膀胱癌EJ 细胞生长.结论:改良型TAT-Apoptin 融合蛋白在体外能有效抑制膀胱癌EJ 细胞的生长.

聚酰胺-胺型树状高聚物介导CTGF-shRNA转染自发性高血压大鼠心肌组织的实验研究

目的 研究聚酰胺- 胺型树状高聚物(PAMAM)载体介导结缔组织生长因子(CTGF)短发夹RNA(pCTGFshRNA)质粒对自发性高血压大鼠心肌纤维化因子表达的影响.方法 设计并构建质粒pCTGF-shRNA 和阴性对照pHK-shRNA,利用酶切和测序验证序列.将24 只自发性高血压大鼠分为pCTGF-shRNA 转染组、pHK-shRNA转染组和对照组,分别应用G9 PAMAM 将质粒转染至大鼠心肌组织.定期测量血压变化,4 周后处死大鼠留取心肌和血液标本.通过称量计算左室质量/ 体质量(LVM/BM)反应左室肥厚程度,RT-PCR 和 Western blot 检测心肌组织 CTGF 和TGF-β的 mRNA 和蛋白表达,免疫组化技术分析 CTGF、TGF-β和层连蛋白(LN)的表达.结果 干预4 周后,pCTGF-shRNA 转染组、pHK-shRNA 转染组和对照组的血压分别为196±5.7mmHg、199±2.6mmHg 和196±6.8 mmHg,无显著性差异 ( P > 0.05),三组的左室肥厚程度也无统计学差异(P>0.05).自发性高血压大鼠有基础水平的CTGF 表达,pCTGF-shRNA 转染组的CTGF 的mRNA 和蛋白表达均明显低于对照组和pHK-shRNA 转染组(P<0.05),而pHK-shRNA 与对照组无显著性差异(P>0.05).三组的TGF-β1 的mRNA 和蛋白表达无显著性差异(P>0.05).免疫组化结果显示,pCTGF-shRNA 转染组的CTGF、LN 表达均明显低于其他2 组,但TGF-β1 表达无统计学差异.结论 PAMAM 载体成功介导pCTGF-shRNA 转染自发性高血压大鼠,能降低心肌组织CTGF 及LN 的表达,提示PAMAM 介导的pCTGF-shRNA 可有效地用于心肌纤维化的基因治疗.

侧脑室引流术治疗脑室出血56例疗效观察

目的:观察脑室钻孔侧脑室引流术加腰大池冲洗治疗脑室出血的疗效.方法:对56 例脑室出血采用单侧或双侧脑室引流,凝血块多或形成铸型用尿激酶溶解,腰穿生理盐水注入打通三、四脑室,恢复脑积液循环,3 个月评价疗效.结果:恢复良好38 例,生活需要帮助8 例,完全不能生活自理4 例(植物人2 例),死亡6 例.与3 年前22 例非手术病例全脑室出血铸型形成对比疗效差异有统计学意义(P<0.05).结论:脑室钻孔侧脑室引流术加腰穿逆行脑脊液置换冲洗是治疗全脑室或3、4 脑室铸型形成的有效方法,能在短时间内清除积血,使死亡率,伤残率明显下降.

Experimental Research on the Prevention and Treatment of Shufeng Xuanfei Prescriptions on the Rat Chronic Serous Glomerulonephritis

对30例青年人肺癌的临床分析和思考

目的 分析青年人肺癌的临床特点及早期诊断.方法 对30 例经外科手术切除的青年人肺癌的病理类型及临床资料进行回顾性分析,并结合结果和相关文献加以讨论.结果 青年人肺癌腺癌居多(53.3 % ),临床表现多无特异性,容易误诊.结论 要提高对青年人肺癌的认识,提高诊断正确率.

重症急性胰腺炎116例临床分析

目的 探讨重症急性胰腺炎的临床特点及有效治疗方法,以提高对重症急性胰腺炎的诊治水平.方法 回顾分析116 例重症急性胰腺炎患者的临床资料,并分析其诊治的临床效果.结果 总并发症发生率44.8%(52/116),总病死率29.3%(34/116),总治愈率70.7%(82/116),并发症发生率:保守治疗组为46.8%(30 / 64),外科手术治疗组为42.3%(22 /52),P > 0.05;病死率:保守治疗组31.3%(20/64),外科手术治疗组为26.9%(14/52),P> 0.05;治愈率:保守治疗组为71.9%(46 /64).外科手术组为69.2%(36/52),P > 0.05.结论 正确地把握重症急性胰腺炎的治疗时机与指征,合理选择治疗方式,对于决定重症急性胰腺炎的预后至关重要.