神经解剖学杂志
Chinese Journal of Neuroanatomy 신경해부학잡지
- 主管单位: 中国科学技术协会
- 主办单位: 中国解剖学会,第四军医大学
- 影响因子: 0.53
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 1000-7547
- 国内刊号: 61-1061/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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腹膜腔给予SAHA通过上调大麻素受体1的表达改善大鼠骨癌痛的研究
目的:观察腹膜腔给予辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对于骨癌痛(cancer-induced bone pain,CIBP)模型大鼠脊髓背角内大麻素受体l(cannabinoid-like receptor 1,CB1R)表达的影响.方法:将健康雌性SD大鼠随机分为4组:Sham+saline组、CIBP 7 d+saline组、CIBP 14 d+saline组、CIBP 14d+ SAHA组.后三组动物胫骨内注射Walker 256乳腺癌肿瘤细胞制作骨癌痛模型.CIBP+ SAHA组术后第1d开始每日连续腹膜腔给予50 mg/kg SAHA至第14 d.利用机械刺激法连续观察各组大鼠的痛行为变化.应用免疫组织化学染色和Western Blot方法观察大鼠腰膨大节段脊髓背角内CB1R的表达情况.结果:自术后第7d开始,与假手术组相比,CIBP组大鼠机械性缩足阈值(paw withdrawal threshold,PWT)明显下降(P<0.01),这种变化一直持续到至少术后第14d.从术后第1~14d连续腹膜腔内给予SAHA能明显缓解大鼠机械性痛敏(P<0.05).免疫荧光组织化学染色显示:CB1R主要表达于脊髓背角浅层,CIBP组大鼠脊髓内CB1R表达上调,而腹膜腔内给予SAHA后可进一步促进脊髓背角内CB1R的上调.Western Blot结果显示:与对照组相比,造模后第7d和14 d脊髓背角内CB1R表达上调(P<0.05).与骨癌痛相比,从术后第1~14d连续腹膜腔给予SAHA能明显促进脊髓背角内CB1R的表达(P<0.05).结论:在骨癌痛状态下,大鼠脊髓背角内CB1R表达增加,可能与体内内源性镇痛系统的激活有关,但此时与对照组相比,上调的CB1R不足以发挥镇痛效果;而腹膜腔内给予SAHA后,脊髓背角内CB1R受体表达进一步上调,从而发挥其镇痛效果.
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紫檀芪激活血红素加氧酶-1减轻小鼠脑缺血再灌注后线粒体氧化损伤
目的:探索紫檀芪(pterostilbene,PTE)对小鼠脑缺血再灌注(IR)后线粒体氧化损伤的作用及可能机制.方法:通过双侧颈总动脉阻断法建立小鼠脑IR模型,腹腔注射PTE或ZnPP(血红素加氧酶-1抑制剂),动物随机均分为IR组、PTE+ IR组、PTE+ ZnPP+ IR组、ZnPP+ IR组,并且PTE有2.5 mg/kg、5 mg/kg、10 mg/kg三个剂量组.然后,进行神经功能评分;通过干湿比重法测定脑水肿;火焰光度法测定Na+含量;NeuN和TUNEL法测定细胞存活和凋亡;通过线粒体膜电位(MMP)、线粒体活性氧(ROS)产物和线粒体复合物Ⅰ和Ⅳ活性测定来检测线粒体的氧化应激损伤;通过Western Blot检测血红素加氧酶-1(HO-1)、NADPH醌氧化还原酶-1(NQO1)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)、线粒体和胞浆细胞色素c蛋白的表达.结果:PTE可以提高小鼠的神经功能评分、减轻脑水肿和降低脑Na+含量.PTE上调HO-1、NQO1和GST的表达,提高MMP、线粒体复合体Ⅰ/Ⅳ活性和线粒体细胞色素c水平,减少线粒体ROS产物和降低胞浆细胞色素c水平,并且有一定的剂量依赖性.但是,PTE的这些作用可以被HO-1的抑制剂ZnPP逆转.结论:在脑IR模型小鼠,PTE通过激活HO-1信号减轻线粒体氧化应激损伤和细胞死亡,从而发挥脑保护作用.
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小鼠iPS细胞体外自发性分化及神经定向分化中基因表达谱的研究
目的:研究小鼠诱导多能干细胞(iPS细胞)在体外自发性分化和神经定向分化过程中的基因表达谱的特性.方法:在体外将iPS细胞分别进行形成类胚胎小体后自发性分化及成骨蛋白抑制剂Noggin诱导神经定向分化后,通过实时荧光定量PCR(qPCR)测定在分化过程中iPS细胞分化相关基因表达的变化.结果:iPS细胞形成类胚胎小体后胚胎外胚层标志基因(GFAP,Map2和TuJ1)及内胚层标记基因(Foxa2,GATA4和Sox17)的表达随分化而迅速增加,但中胚层标记基因(Bmp4,BRA,FGF5)表达水平变化不明显.在神经定向分化过程中,iPS细胞的神经标志物基因(Map2,NeuN,TuJ1和Sox1)及线粒体相关基因(12s,ND3,ND5,ND6、Cytb和Cox1)的表达都逐渐增加,且两者具有相同的增长趋势.结论:在自发性分化过程中小鼠iPS细胞具有自发向外胚层和内胚层分化的趋势;在神经定向分化过程中,iPS细胞的线粒体相关基因表达随着分化表达逐渐增加,并与神经细胞标记基因具有正相关性,表明线粒体的功能在iPS细胞神经定向分化中发挥重要作用.
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比较热休克蛋白A5和3-甲基腺嘌呤和介导小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用
目的:比较研究热休克蛋白A5(HSPA5)和3-甲基腺嘌呤(3-MA)介导小鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤性自噬的保护作用.方法:成年雄性BALB/c小鼠30只,分为6组:sham组、缺血再灌注组(I/R组)、vehicle+ I/R组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)+ I/R组、scramble siRNA+ I/R组和HSPA5 siRNA+ I/R组,每组5只.采用大脑中动脉阻塞(MCAO)60 min后再灌注24h制作小鼠I/R模型.Vehicle+ I/R组和3-MA+ I/R将5μl 0.9% NaCl或3-MA (30 mg/ml)在MCAO前30 min侧脑室注射;scramble siRNA+ I/R group组和HSPA5 siRNA+ I/R组将5μlscramble siRNA或HSPA5 siRNA(2μg/μl)在MCAO前24 h侧脑室注射.通过小鼠I/R后神经功能评分确定运动功能障碍程度.小鼠神经细胞内自噬体形成用透射电子显微镜测定,再灌注24h缺血大脑皮层(LC3)-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达用Western Blot方法检测.小鼠I/R后缺血大脑神经细胞损伤用Nissl染色进行观察.结果:HSPA5和3-MA可以影响I/R小鼠行为学改变并使脑缺血性损伤和神经症状加重(P<0.05).透射电子显微镜检测可见,sham组小鼠大脑皮层神经细胞形态正常,I/R组小鼠缺血大脑皮层神经元胞质中细胞器减少,形成自噬体.与sham组小鼠比较,I/R组小鼠缺血大脑皮层LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著增高(P <0.05);3-MA+ I/R或HSPA5 siRNA+I/R小鼠缺血大脑皮层LC3-Ⅱ蛋白表达水平明显低于I/R小鼠(P<0.05).结论:HSPA5和3-MA在介导小鼠脑缺血再灌注损伤导致的自噬可发挥相同的保护作用,并且促进神经细胞凋亡.
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大鼠慢性背根节压迫诱致DRG大神经元兴奋性增强和Ih电流显著上调
目的:探讨大鼠CCD模型模拟的腰背痛诱致的DRG大神经元兴奋性改变及其离子通道机制.方法:建立大鼠慢性压迫腰膨大L4/L5 DRG的CCD模型,模拟临床常见的腰背痛的触诱发痛表现.制备整节L4/L5 DRG标本,应用全细胞膜片钳技术记录去极化电流刺激诱致的DRG大型神经元的兴奋性改变及其离子通道机制.结果:对直径> 50 μm的健康的DRG大神经元进行全细胞膜片钳记录.结果显示:给予去极化方波电流刺激可以诱致CCD模型大鼠DRG大神经元呈现兴奋性增强的表现,具体表现为相同刺激强度的电流注射在CCD模型DRG大神经元上诱致的动作电位的频率显著高于对照组神经元.同样的细胞放电增强也见于给予细胞斜波电流刺激.进一步的机制研究分析显示CCD模型大鼠上DRG大神经元的Ih电流明显高于对照组大鼠.结论:CCD模型可以诱致DRG大神经元呈现超兴奋状态,该兴奋性增强的状态主要由Ih电流增强来介导,为认识神经损伤诱致的病理性痛觉敏化尤其是触诱发痛的神经机制提供了实验证据.
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树鼩帕金森病(PD)模型的建立及对其的行为学和形态学研究
目的:建立树鼩的帕金森病(PD)模型,用行为学和形态学相结合的方法对模型进行验证.方法:应用三种方法制备树鼩PD模型,通过行为学和形态学相结合的方法对模型予以验证.结果:MPTP组树鼩的旱迷宫全天总反应时间、错误反应次数分别比6-OHDA组和罗滕酮组显著增高(P <0.05);MPTP组树鼩的爬杆实验所用时间分别较6-OHDA组和罗滕酮组显著增长(P<0.05).与树鼩中脑腹侧的对照侧相比,6-OHDA组注射侧和罗滕酮组注射侧中脑腹侧的酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经细胞数显著减少(P<0.01);而MPTP组双侧中脑腹侧的TH阳性细胞数均显著减少(对照侧为P<0.01,注射侧为P<0.05).结论:腹腔注射MPTP制作的树鼩PD模型为较理想的模型,值得在神经科学研究中推广应用.
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外周伤害性感受神经元在体特异性表达GCaMP6f蛋白方法的构建及细胞内钙活动的监测
目的:建立在外周伤害性感受器特异性表达GCaMP6f蛋白的方法,并在疼痛刺激条件下,应用钙成像技术实时监测小鼠伤害性感受神经元的细胞内钙活动.方法:包装并纯化rAAV2/9-CAG-DIO-GCamp6f病毒,并通过立体定位注射该病毒于SNS-Cre小鼠L4/L5背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)内.动物存活3~4周,然后制备L4/L5整节DRG标本,检测GCaMP6f蛋白表达情况,并观察疼痛刺激条件下诱致的伤害性DRG神经元的钙反应情况.结果:SNS-Cre小鼠L4/L5 DRG内注射rAAV2/9-CAG-DIO-GCamp6f病毒后,荧光显微镜观察显示GCamp6f病毒特异性地表达在中、小型的DRG神经元.给予DRG神经元高钾刺激(KCl 30 mmol/L)可以诱致神经元胞内的钙离子水平显著上升.进一步给予伤害性DRG神经元特异性标志物TRPV1受体的激动剂Capsaicin(1 μmol/L),结果显示其可以诱致GCamp6f蛋白标记的DRG神经元呈现显著的钙反应.结论:本研究建立的SNS-Cre小鼠DRG在体注射rAAV2/9-CAG-DIO-GCamp6f病毒特异性标记伤害性DRG神经元的方法是成功的,该方法的成功建立对于活体特异性监测伤害性DRG神经元的功能活动提供了重要工具.
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急性肝衰竭小鼠线粒体分裂蛋白DRP1在肝脏和大脑皮层的表达变化
目的:观察C57小鼠急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)过程中线粒体分裂蛋白(dynamic-related protein 1,DRP1)在肝脏和大脑皮层中的变化及与肝衰竭的相关性.方法:C57/BL小鼠,随机分为对照组、ALF1d、4d、7d组.腹膜腔内注射硫代乙酰胺(TAA)建立ALF模型,利用高架十字和旷场实验测定行为学,取血清检测谷氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平;之后取肝组织,HE染色观察肝组织的病理变化;用Western Blot和RT-qPCR检测DRP1在肝脏和大脑皮层中蛋白及mRNA水平的表达变化.结果:(1)行为学结果显示:ALF各组小鼠自发活动及探索行为均明显降低(P<0.05);(2)肝功检测ALF组ALT、AST表达水平明显升高(P<0.05);(3)肝组织病理学检查ALF组1d时肝细胞出现大面积坏死,7d时肝细胞坏死较1d、4d缓解;(4)Western Blot检测DRP1在ALF全肝组织和肝线粒体中明显降低(P<0.05);而在大脑皮层全组织蛋白中明显升高(P<0.05),但在提取的线粒体中则无明显改变(P >0.05);(5) RT-qPCR检测DRP1在肝组织中ALF各组中表达明显降低(P<0.05);而在大脑皮层组织中1d时表达增多,持续到4d,在7d时恢复(P<0.05).结论:DRP1在急性肝衰竭小鼠的肝脏和大脑皮层中对线粒体形态学发挥着重要的作用.
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低氧预处理脐带间充质干细胞移植促进大鼠脊髓损伤修复
目的:评估低氧预处理脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,UCMSCs)移植修复大鼠急性脊髓损伤的作用并初步探讨其机制.方法:分别于常氧和低氧条件下培养UCMSCs,细胞免疫荧光鉴定细胞,ELISA测定细胞脑源性生长因子(BDNF)、血管源性生长因子(VEGF)、睫状生长因子(CNTF)和肝细胞生长因子(HGF)的浓度.采用改良的Al1 en's法(2.5 g×10 cm)建立60只大鼠T10脊髓损伤模型,随机分为假手术组、模型组、低氧细胞移植组及常氧细胞移植组,每组20只,损伤后即刻移植1×106个细胞至低氧细胞移植组及常氧细胞移植组动物脊髓内.术前及术后每周进行运动功能BBB评分;采用免疫荧光法检测移植细胞的存活、神经细胞凋亡;采用ELISA法检测细胞移植第2、14、28 d脊髓组织肝细胞生长因子的浓度.结果:在低氧组,体外由UCMSCs分泌的BDNF、VEGF、CNTF和HGF浓度显著高于常氧组细胞.与模型组比较,细胞移植组运动功能评分和HGF含量增加,而神经细胞的凋亡率降低,但以低氧细胞移植组改变明显.结论:低氧预处理的UMCSCs具有提高神经营养因子分泌作用,其机制可能与下调神经细胞凋亡,增加受损脊髓组织HGF有关.
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PGRN阳性神经细胞在新生大鼠大脑皮层内的分布
目的:观察颗粒蛋白(progranulin,PGRN)阳性细胞在新生大鼠大脑皮层内的分布和PGRN在新生鼠大脑皮层神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞中的表达情况,探讨PGRN在新生鼠早期神经发育中的作用.方法:制备新生SD大鼠(1、7 d)脑组织切片,采用PGRN多克隆抗体进行免疫荧光组织化学染色法检测PGRN在新生鼠脑内的表达部位,免疫荧光组织化学双标法检测PGRN在新生鼠皮层内不同细胞中的定位.结果:新生鼠大脑皮质、侧脑室周围、胼胝体及海马中均表达PGRN.PGRN主要在新生鼠皮层内神经元中表达,而在星形胶质细胞和少突胶质细胞中几乎不表达.结论:新生鼠脑内表达PGRN,在大脑皮层内不同细胞表达模式有所不同,提示PGRN可能参与大鼠神经发育早期过程.
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血管活性肠肽在MPTP帕金森病模型小鼠的抗氧化应激作用
目的:研究血管活性肠肽(VIP)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)诱导的帕金森病(PD)模型小鼠发挥抗氧化应激和神经保护作用.方法:雄性C57BL/6J小鼠随机分为生理盐水(NS)组、MPTP组和MPTP+ VIP组.Elisa法检测纹状体丙二醛(MDA)以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的变化;免疫组织化学法观察中脑黑质纹状体系统酪氨酸羟化酶(TH)、星形胶质细胞特异性标记物胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)和小胶质细胞标志物离子钙结合蛋白(Iba-1)的表达变化;透射电子显微镜观察中脑黑质多巴胺能神经元的超微结构变化.结果:MPTP组与对照组相比,MDA水平显著增高,SOD和CAT的表达显著降低;给予VIP可显著抑制MDA的水平(P<0.01),增强SOD和CAT的表达(P<0.05).与对照组相比,MPTP组小鼠GFAP和Iba-1的表达明显上升,TH表达明显下降;给予VIP可显著降低GFAP和Iba-1的表达(P<0.05),而TH表达明显增强.透射电镜观察显示:NS组神经细胞和细胞器结构清晰完整;MPTP组神经细胞核膜内陷,线粒体空泡样变;MPTP+ VIP组神经细胞和细胞器结构基本正常.结论:VIP能够抑制MPTP诱导PD小鼠中脑黑质星形胶质细胞和小胶质细胞的活化,对抗氧化应激,发挥神经保护作用.
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MiR-139-3p通过靶向下调TRPV1缓解大鼠神经病理性疼痛
目的:研究miR-139-3p在大鼠神经病理性疼痛发生发展中的作用及其作用机制.方法:将大鼠随机分为假手术组(sham)、坐骨神经慢性压迫损伤模型组(chronic constriction injury group,CCI)、2 mg/kg miR-139-3p模拟物(mimic)鞘内注射组、4 mg/kg miR-139-3p mimic鞘内注射组.术后的第14d,Real-time PCR法检测大鼠背根神经节(DRG)中miR-139-3p及TRPV1的表达.于注射前及注射后的第1、3、7、14 d,利用von Frey检测大鼠机械性痛阈及热辐射法检测大鼠热痛阈值.Western Blot法检测DRG中TRPV1的表达;ELISA法检测脊髓L4-L5组织中TNF-α及IL-1β的含量;双荧光素酶报告基因法检测miR-139-3p与TRPV1的靶向关系.结果:(1)与sham组相比较,miR-139-3p在CCI大鼠DRG中的表达显著下降,而TRPV1的表达显著上升(P<0.05).(2)与sham组相比较,CCI组中大鼠机械刺激缩足反射阈值及热刺激缩足反射潜伏期显著下降(P<0.05);而与CCI组相比较,鞘内注射miR-139-3p mimic可显著促进大鼠机械刺激缩足反射阈值及热刺激缩足反射潜伏期的上升,抑制TRPV1的表达(P<0.05).(3)与sham组相比较,CCI组大鼠TNF-α及IL-1β含量显著上升(P<0.05);而与CCI组相比较,鞘内注射miR-139-3p mimic可显著抑制TNF-α及IL-1β的产生(P<0.05).(4) miR-139-3p mimic转染可显著降低荧光素酶报告基因的荧光强度.结论:miR-139-3p通过靶向下调TRPV1的表达缓解大鼠神经病理性疼痛.
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SAMP8小鼠海马内CD147与NCT的表达及其相互关系
目的:运用免疫荧光组织化学和免疫共沉淀技术(CoIP),探讨快速老化小鼠(SAMP8)海马组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)和单过性跨膜蛋白(NCT)间的表达情况,为寻找阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)相关的治疗策略和方向提供理论依据.方法:3月龄雄性SAMP8小鼠6只.3只小鼠用于免疫荧光组织化学实验,经4%多聚甲醛灌注、取脑、石蜡包埋后,冠状面切片进行组织化学染色,观察CD147与NCT在海马区是否存在共定位的关系.3只用于CoIP实验,提取海马组织蛋白,与CD147抗体孵育后加入琼脂糖微珠A/G孵育过夜,离心后上清用于Western Blot实验检测CD147与NCT间的相互作用关系.结果:SAMP8海马区,CD147和NCT的阳性表达部位主要分布于CA1、CA3、CA4区的锥体细胞层和齿状回颗粒细胞层,二者在CA1、CA3区表达较强;标记部位为胞膜、胞浆,部分神经元在胞浆进核周处存在不连续的点、线状共标记部位.CoIP实验显示CD147与成熟型NCT相互作用,不与非成熟型NCT相互作用.结论:CD147和NCT在SAMP8小鼠海马区锥体细胞层表达较高,推测二者可能与海马的学习记忆功能密切相关;CD147与NCT存在相互作用的关系,推测CD147可能参与调节γ-分泌酶活性.
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shRNA干扰蓝斑核去甲肾上腺素转运体(NET)表达对大鼠抑郁样行为的改善作用
目的:探讨利用慢病毒在蓝斑核(locus coeruleus,LC)敲除去甲肾上腺素转运体(norepinephrine transporter,NET)对大鼠抑郁样行为的影响.方法:构建NET-shRNA慢病毒载体及阴性对照序列,感染PC12细胞后通过Q-PCR和Western Blot方法测定NET mRNA和蛋白水平;建立慢性不可预见性温和应激大鼠抑郁症模型,双侧蓝斑核注射NET-shRNA;3周后采用强迫游泳实验、糖水偏好实验、旷场实验检测大鼠抑郁样行为;Western Blot检测大鼠NET水平;高效液相色谱法(HPLC)检测大鼠去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)水平.结果:Q-PCR和Western Blot检测结果显示:shRNA-1146沉默效率高(P<0.01);与抑郁症模型组相比,蓝斑核注射NET-shRNA组大鼠强迫游泳不动时间减少、糖水偏好率增加、旷场实验得分增加(P<0.01),蓝斑核NET表达下降(P<0.01)、NE水平升高(P<0.05).结论:NET-shRNA慢病毒注射蓝斑核能下调NET的表达,改善大鼠抑郁样行为,为抑郁症的基因治疗提供了实验依据.
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8-O-乙酰山栀子苷甲酸通过抑制脊髓背角JNK的磷酸化水平改善大鼠炎性痛的研究
目的:探究8-O-乙酰山栀子苷甲酸(8-O-acetyl-SM,8-OaS)对于慢性炎性痛模型大鼠痛行为及脊髓背角星形胶质细胞内c-Jun氨基酸末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)磷酸化水平的影响.方法:运用大鼠足底注射完全弗式佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)的方法建立慢性炎性痛模型;通过腹膜腔注射8-OaS进行干预;采用yon Frey丝测定大鼠足底50%机械性缩足反射阈值;应用免疫荧光组织化学染色法观察大鼠腰膨大节段脊髓背角胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)及磷酸化的JNK(phosphorylatedc-Jun N-terminal kinase,pJNK)表达;应用Western Blot方法对大鼠脊髓背角内GFAP、JNK以及p-JNK的表达水平进行定量分析.结果:(1)行为学结果显示:与对照组相比,CFA模型大鼠机械性痛阈明显降低(P<0.01),腹膜腔注射8-OaS可有效提高CFA诱导的机械性痛阈值(P<0.05);(2)免疫荧光染色结果显示:CFA模型脊髓背角内GFAP的表达量明显高于正常组,且pJNK基本表达予星形胶质细胞内;(3)Western Blot结果显示:与对照组相比,CFA造模后7d脊髓背角内GFAP和pJNK表达明显上调,腹膜腔给予8-OaS可以显著下调CFA诱导的脊髓背角内GFAP和pJNK的水平(P<0.01).结论:腹膜腔内给予8-OaS可有效提高炎性痛大鼠的机械性痛阈,其机制是通过下调脊髓背角星形胶质细胞内JNK信号通路的磷酸化水平进而抑制星形胶质细胞的激活.
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一种改进的大鼠大脑皮质星形胶质细胞的培养方法
目的:改进大鼠大脑皮质星形胶质细胞的培养方法,从而获取高纯度星形胶质细胞用于神经科学研究.方法:新生大鼠(2~3日龄),75%酒精消毒后断头,于冰上取大脑皮质置于冰冷的D-Hanks液中,去除脑膜和血管,剪碎后用0.25%胰酶消化并分离细胞,以1×105/ml的密度接种于预铺0.015%多聚赖氨酸的细胞瓶中培养.细胞纯化采用“差速贴壁法”、“梯度血清法”和“十字手摇法”,以获取高纯度星形胶质细胞.通过星形胶质细胞特异性表达蛋白即胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)行免疫细胞荧光染色来鉴定细胞纯度.结果:星形胶质细胞纯度大于98%,可多次传代,细胞增殖快,且生长良好.结论:改进的原代星形胶质细胞培养方法,操作简单,细胞纯度高,能满足各种神经科学研究中对高纯度星形胶质细胞培养的实验要求,适宜推广.
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高压氧对模型大鼠颅脑损伤CAT、SOD、GSH-Px和Nrf2影响的研究
目的:研究高压氧对模型大鼠颅脑损伤过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和核因子E2相关因子2(Nrf2)的影响.方法:健康SD大鼠30只,体重250~ 300 g,4~5月龄,随机分为3组:假手术组、模型组和高压氧组,每组10只,参照Feeney自由落体冲击造模法建立颅脑损伤大鼠模型.假手术组只给予手术,不造成颅脑损伤;模型组和高压氧组给予颅脑损伤处理;高压氧组用高压氧治疗,1次/d,10 d.用ELISA法检测脑组织CAT、SOD、GSH-Px和Nrf2含量,采用实时荧光定量PCR检测脑组织CAT、SOD、GSH-Px和Nrf2 mRNA相对表达量,用Western Blot测定脑组织Nrf2胞质蛋白和Nrf2核蛋白.结果:假手术组、模型组、高压氧组之间的CAT、SOD、GSH-Px、Nrf2 mRNA水平均有差异(P<0.05).模型组脑组织CAT、SOD、GSH-Px、Nrf2 mRNA水平低于假手术组(P<0.05),而高压氧组则高于模型组(P<0.05).假手术组、模型组、高压氧组之间的脑组织CAT、SOD、GSH-Px和Nrf2核蛋白水平存在差异(P<0.05),模型组低于假手术组(P<0.05),高压氧组高于模型组(P<0.05).Western Blot检测显示:与假手术组比较,模型组和高压氧组脑组织细胞质(核)中Nrf2蛋白表达量有明显升高(P<0.05),高压氧组升高更明显(P<0.05).结论:高压氧对模型大鼠颅脑损伤CAT、SOD、GSH-Px和Nrf2表达具有调节作用,通过这些调节改善机体氧化性损伤.
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星形胶质细胞转分化为神经元在神经再生中的研究进展
星形胶质细胞是广泛存在于中枢神经系统内的一类胶质细胞,在建立和维持正常脑功能以及脑损伤后修复中具有重要作用.近几年发现,特定区域脑损伤后星形胶质细胞发生活化,甚至转分化为神经元谱系,表现出类似于神经前体细胞的特性,这一重要的潜能使得星形胶质细胞成为神经再生领域研究的焦点.本文就星形胶质细胞的基本特性、其转分化为神经元的模型以及介导转分化发生的细胞与分子学机制等综述如下.
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2型糖尿病海马胰岛素抵抗与认知功能障碍的研究进展
全球糖尿病患者人数高达4.15亿,其中2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者占90%以上[1].不仅是中老年人,越来越多的青年和儿童也面临T2DM威胁[1].T2DM主要是由于胰岛素抵抗和胰岛素分泌不足引起.目前导致胰岛素抵抗的原因尚未完全阐明,但认为与肥胖、不良饮食习惯、缺乏运动、年龄和遗传等危险因素有关.T2DM造成患者认知功能障碍,严重者终进展为痴呆.面对T2DM发病率的快速增长,其对认知功能的损害越来越受到重视,如何有效预防已成为社会关注的问题.海马富含胰岛素受体,主要介导学习、记忆等认知功能[2].海马胰岛素抵抗是否介导T2DM患者认知功能障碍及其能否作为提高认知功能的靶点尚不完全清楚.因此,我们针对海马胰岛素抵抗与患者认知功能障碍的可能机制进行综述.
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遗传学技术在神经科学中的使用策略
近年来,在神经科学领域,遗传学技术的兴起实现了选择性靶向操控细胞活性的革命性改变,其中,使用普遍的技术是化学遗传学和光遗传学.两者的用途均是激活或抑制某一特殊类型神经元.通过观察该神经元生物学特性的改变,所在神经通路的可塑性改变以及动物行为学变化,综合分析明确某一类型神经元的生物学功能.二者的差异在于受体被激活的途径.本文对以上两种技术做以概要介绍,考虑到二者相似性很大,因此,本文首先对化学遗传学进行详细介绍,然后采用对比的方式介绍光遗传学及其使用策略.
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活化星形胶质细胞参与多巴胺神经元氧化应激损伤的研究进展
以往研究表明,帕金森病(Parkinson's disease,PD)的发生是由于黑质多巴胺神经元变性死亡而引起的神经退行性疾病,PD患者以震颤、肌肉僵直、运动迟缓和姿势异常等运动症状为主要临床表现[1].PD发病与老龄因素密切相关,流行病学调研显示60岁以上人群发病率可达到1 ~2%.虽然国内、外学者对于PD进行了大量的基础研究,目前对于导致神经元变性发生的确切机制仍不清楚.近年的研究资料表明,脑内活性氧大量产生、氧化应激反应是启动多巴胺神经元变性的重要因素,而星形胶质细胞的功能活化参与活性氧的产生和氧化应激发生、并且与神经炎症和线粒体功能异常密切相关,共同导致神经元的损伤和死亡过程[2-5].因此,本文对于活化星形胶质细胞参与神经元的氧化应激损伤和机制研究进展进行了回顾和分析.
关键词:
年 | 期数 |
2019 | 01 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 |
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