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Efficient and Highly Specific Gene Transfer Using Mutated Lentiviral Vectors Redirected with Bispecific Antibodies.

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Abstract:

:Despite their exceptional potencies, the broad tropism of most commonly used lentivirus (LV) vectors limits their use for targeted gene delivery in vivo We hypothesized that we could improve the specificity of LV targeting by coupling (i) reduction of their binding to off-target cells with (ii) redirection of the vectors with a bispecific antibody (bsAb) that binds both LV and receptors on target cells. As a proof of concept, we pseudotyped nonreplicating LV using a mutated Sindbis envelope (mSindbis) with ablated binding to native receptors, while retaining the capacity to facilitate efficient fusion and endosomal escape. We then evaluated the transduction potencies of the mSindbis LV for HER2-positive (HER2+) (SKBR3) breast and HER2-negative (HER2-) (A2780) cells when redirected with different bsAbs. mSindbis LV alone failed to induce appreciable green fluorescent protein (GFP) expression in either cell. When mixed with HER2-targeting bsAb, mSindbis LV was exceptionally potent, transducing 12% to 16% of the SKBR3 cells at a multiplicity of infection (MOI [ratio of viral genome copies to target cells]) of 3. Transduction was highly specific, resulting in ∼50-fold-greater selectivity toward SKBR3 cells versus A2780 cells. Redirecting mSindbis LV led to a 10-fold improvement in cell-specific targeting compared to redirecting wild-type Sindbis LV with the same bsAb, underscoring the importance of ablating native virus tropism in order to maximize targeting specificity. The redirection of mutated LV using bsAb represents a potent and highly versatile platform for targeted gene therapy.IMPORTANCE The goal of gene therapy is specific delivery and expression of therapeutic genes to target cells and tissues. Common lentivirus (LV) vectors are efficient gene delivery vehicles but offer little specificity. Here, we report an effective and versatile strategy to redirect LV to target cells using bispecific antibodies (bsAbs) that bind both cell receptors and LV envelope domains. Importantly, we ablated the native receptor binding of LV to minimize off-target transduction. Coupling bsAb specificity and ablated native LV tropism synergistically enhanced the selectivity of our targeted gene delivery system. The modular nature of our bsAb-based redirection enables facile targeting of the same LV to diverse tissues/cells. By abrogating the native broad tropism of LV, our bsAb-LV redirection strategy may enable lentivirus-based gene delivery in vivo, expanding the current use of LV beyond ex vivo applications.

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mBio

MBIO
最新影响因子:7.786 期刊ISSN:2150-7511 CiteScore:6.08
出版周期: 是否OA:YES 出版年份:2010

期刊官方网址:http://mbio.asm.org/

期刊投稿地址:http://mbio.msubmit.net/cgi-bin/main.plex

自引率:4.20% 研究方向:MICROBIOLOGY-
出版地区:UNITED STATES

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Virus Research 2.58 第59百分位
#29
HIV/AIDS - Research and Palliative Care 2.52 第58百分位
#30
Papillomavirus Research 2.47 第56百分位
#31
Virology Journal 2.43 第54百分位
#32
Virology: Research and Treatment 2.43 第54百分位
#33
American Journal of Tropical Medicine and Hygiene 2.42 第52百分位
#34
Journal of Interferon and Cytokine Research 2.40 第50百分位
#35
AIDS Research and Therapy 2.26 第49百分位
#36
Archives of Virology 2.25 第47百分位
#37
Vector-Borne and Zoonotic Diseases 2.25 第47百分位
#38
Food and Environmental Virology 2.18 第44百分位
#39
Advances in Virology 1.97 第42百分位
#40
Interdisciplinary Perspectives on Infectious Diseases 1.97 第42百分位
#41
Journal of Medical Virology 1.93 第40百分位
#42
Journal of Virological Methods 1.82 第38百分位
#43
Antiviral Chemistry and Chemotherapy 1.81 第37百分位
#44
AIDS Research and Human Retroviruses 1.67 第36百分位
#45
Virus Genes 1.65 第34百分位
#46
Current HIV Research 1.54 第33百分位
#47
Journal of Infection in Developing Countries 1.53 第30百分位
#48
Open AIDS Journal 1.53 第30百分位
#49
Microbiology and Immunology 1.49 第28百分位
#50
Virologica Sinica 1.38 第27百分位
#51
Intervirology 1.35 第25百分位
#52
Viral Immunology 1.32 第24百分位
#53
VirusDisease 1.21 第22百分位
#54
Current Protocols in Microbiology 1.16 第21百分位
#55
Virology Reports 1.00 第19百分位
#56
Virus Adaptation and Treatment 1.00 第19百分位
#57
African Journal of AIDS Research 0.88 第16百分位
#58
Future Virology 0.81 第15百分位
#59
Acta Virologica 0.68 第13百分位
#60
African Journal of Clinical and Experimental Microbiology 0.29 第12百分位
#61
International Journal of Virology 0.27 第11百分位
#62
Journal of Bacteriology and Virology 0.25 第8百分位
#63
Molecular Genetics, Microbiology and Virology 0.25 第8百分位
#64
Voprosy Virusologii 0.22 第6百分位
#65
Journal of International Peacekeeping 0.10 第5百分位
#66
Chinese Journal of Microbiology and Immunology 0.08 第3百分位
#67
Infektsionnye Bolezni 0.07 第2百分位
#68
Virologie 0.04 第0百分位

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