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Abstract:
:Human granulocytic anaplasmosis (HGA) is a tick-borne disease caused by the obligate intracellular Gram-negative bacterium, Anaplasma phagocytophilum The disease often presents with nonspecific symptoms with negative serology during the acute phase. Direct pathogen detection is the best approach for early confirmatory diagnosis. Over the years, PCR-based molecular detection methods have been developed, but optimal sensitivity is not achieved by conventional PCR while real-time PCR requires expensive and sophisticated instruments. To improve the sensitivity and also develop an assay that can be used in resource-limited areas, an isothermal DNA amplification assay based on recombinase polymerase amplification (RPA) was developed. To do this, we identified a 171-bp DNA sequence within multiple paralogous copies of msp2 within the genome of A. phagocytophilum Our novel RPA assay targeting this sequence has an analytical limit of detection of one genome equivalent copy of A. phagocytophilum and can reliably detect 125 bacteria/mL in human blood. A high level of specificity was demonstrated by the absence of nonspecific amplification using genomic DNA from human or DNA from other closely-related pathogenic bacteria, such as Anaplasma platys, Ehrlichia chaffeensis, Orientia tsutsugamushi and Rickettsia rickettsii, etc. When applied to patient DNA extracted from whole blood, this new RPA assay was able to detect 100% of previously-diagnosed Aphagocytophilum cases. The sensitivity and rapidness of this assay represent a major improvement for early diagnosis of A. phagocytophilum in human patients and suggest a role for better surveillance in its reservoirs or vectors, especially in remote regions where resources are limited.
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最新影响因子:5.897 | 期刊ISSN:0095-1137 | CiteScore:3.55 |
出版周期:Monthly | 是否OA:YES | 出版年份:1975 |
期刊官方网址:http://jcm.asm.org/
自引率:8.40% | 研究方向:医学-微生物学 |
出版地区:UNITED STATES |
SCI期刊coverage:Science Citation Index Expanded(科学引文索引扩展)
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Journal of Clinical Microbiology® (JCM) publishes the most current research related to the laboratory diagnosis of human and animal infections and the role of the laboratory in both the management of infectious diseases and the elucidation of the epidemiology of infections.
《临床微生物学杂志》(JCM)发表了与实验室诊断人类和动物感染以及实验室在传染病管理和阐明感染流行病学方面的作用有关的最新研究。
大类(学科) | 小类(学科) | 学科排名 |
生物 |
MICROBIOLOGY(微生物学) 2区 |
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340 | 313 | 27 |
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大类(学科):Medicine
小类(学科):Microbiology (medical)
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liting7111
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