Abstract:

研究问题: 在卵巢刺激期间收获的早期增生期子宫内膜活检是否存在预测同一周期新鲜胚胎移植 (ET) 后结局的信息？ 总结答案: 全组织子宫内膜的转录组分析没有揭示与结局相关的显著差异基因表达 (DGE); 然而，分离的分泌组谱, 培养和体外蜕膜化子宫内膜基质细胞 (EnSCs)在与活检相同的周期中，与新鲜 ET 后植入失败的患者相比，活产患者之间存在显著差异。 已知: 在大多数子宫内膜容受性研究方案中，活检是在植入窗期 (WOI) 收获的。然而，这将 ET 排除在同一周期中，这是优选的，因为子宫内膜已被证明随着时间的推移而适应。据报道，在卵巢刺激期间进行的子宫内膜活检不损害着床机会，在这种活检中，观察到妊娠妇女与未妊娠妇女之间的 DGE。子宫内膜增殖期对人类胚胎着床的影响仍不清楚，但值得进一步关注，特别是在黄体期子宫内膜活检中, 预测反复植入失败的转录信号与细胞增殖减少相关，可能表明增殖期参与。EnSCs 隔离、培养和体外蜕膜化 (IVD) 是评估子宫内膜功能的一种常用基础研究技术，一种紊乱的 EnSC 分泌组以前与植入失败有关。 研究设计、大小、持续时间: 本研究嵌套在一项随机对照试验 (RCT) 中探讨卵巢刺激早期卵泡期子宫内膜搔抓对 IVF/ICSI 术后临床妊娠率的影响。在 96 个可用的子宫内膜活检中，在消除那些没有新鲜 ET 的子宫内膜活检后，为了最大限度地减少潜在混杂的风险，广泛匹配后，保留了 18 个样本来研究两个临床组: 9 例活产患者的活检与 9 例植入失败患者的活检,两组在与活检相同的周期内进行新鲜 ET。我们通过分析其转录组和体外分离、培养和蜕膜化 EnSCs 来研究增生性子宫内膜。我们首次将后一种技术应用于卵巢刺激期间获得的增殖性子宫内膜活检，用于周期内结局预测，试图克服周期间变异性。 参与者/材料，设置，方法: 在 Illumina HiSeq1500 机器上对 18 个个体全组织子宫内膜活检进行 RNA 测序。使用不同方法分析 DGE 三次 (DESeq2 、 EdgeR 和 Wilcoxon 秩和检验，均在 R 中)。对 9 个样本的子集进行 EnSC 分离和 IVD (2 天和 4 天)，之后收获来自未分化和蜕膜化培养物的培养基, 储存在-80 ℃，以后使用多重悬浮珠免疫分析法测定 45 种细胞因子。通过偏最小二乘回归模型进行分析。 主要结果和机会的作用: 经过多重假设检验的修正, DGE 分析显示活产患者的子宫内膜样本与新鲜 ET 后植入失败患者的子宫内膜样本之间无显著差异。然而，EnSC 隔离和培养后的分泌组分析显示，两个不同的簇明显对应于两个临床组。IVD 后，分泌组特征从未分化细胞转移，但两个临床组之间的差异仍然存在，提示蜕膜化后细胞因子特征的趋同。 局限性，谨慎的原因: 由于研究样本量有限和 EnSC 实验的体外性质，谨慎是必要的。更大规模的验证是必要的，然而，鉴于 RCT 以外的周期内增殖性子宫内膜活检的可用性非常有限，很难实现。 研究结果的更广泛含义: 这些数据支持这样的假设，即不仅在 WOI 期间应该评估子宫内膜，而且通过利用增殖期，某些子宫内膜功能障碍可能在一个周期的早期被检测到。这一见解为子宫内膜检查的发展开辟了新的视野，无论是诊断还是预测 IVF/ICSI 治疗结果。 研究经费/竞争利益: 本研究由 Fonds Wetenschappelijk Onderzoek (FWO，Belgium Flanders，11M9415N，1   524 417417n) 支持, wetenschappelijk Fonds Willy Gepts (WFWG G160，Universitair Ziekenhuis Brussel，比利时) 和国家医学研究理事会 (NMRC/CG/M003/2017，新加坡)。没有利益冲突。 试用注册号: NCT02061228.