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咖啡酸苯乙酯通过TGF-β/Smad通路抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的作用

迟乐;黄波;迟源;金艳花

摘要: 目的 探讨咖啡酸苯乙酯对3 T3-L1小鼠成纤维细胞(前脂肪细胞)向脂肪细胞分化的抑制作用,并阐明其作用机制.方法 3T3-L1前脂肪细胞用含10%小牛血清的DMEM培养基培养,用0.5μM的异丁基甲基黄嘌呤,1μM的地塞米松及10μg/mL胰岛素诱导脂肪细胞的分化.脂肪细胞分化后用油红O染色,检测2.5~10μM咖啡酸苯乙酯对脂肪细胞的诱导作用、 脂质含量以及脂肪细胞分化和脂肪发生相关的基因和蛋白表达的变化.此外,裂解和测量甘油三酯的含量.采用组织学、 蛋白质印迹和逆转录-聚合酶链式反应等方法研究了咖啡酸苯乙酯对3 T3-L1脂肪细胞脂肪生成的抑制作用.结果 咖啡酸苯乙酯浓度依赖型抑制油滴的积累和减少液滴的大小;咖啡酸苯乙酯显著降低过氧化体増殖物活化型受体-γ(PPAR-γ)、CCAAT/增强子结合蛋白 α(C/EBPα)、 脂肪酸合成酶(FAS)、 脂肪细胞特异性脂肪酸结合蛋白2(aP2)、 硬脂酰辅酶A脱氢酶1(SCD-1)和脂蛋白(LPL)的表达.此外,咖啡酸苯乙酯显著上调转化生长因子-β(TGF-β)和Smad2和Smad3的磷酸化,但是处理Alk抑制剂时这些作用会减弱.结论 咖啡酸苯乙酯通过调节PPAR-γ,C/EBPα和TGF-β信号通路对3T3-L1脂肪细胞脂肪生成具有抑制作用.

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