基础医学与临床杂志
Basic & Clinical Medicine 기초의학여림상
- 主管单位： 北京市科学技术协会
- 主办单位： 北京生理科学会
- 影响因子： 0.66
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 82-358
- 国内刊号： 1001-6325
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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肾上腺囊肿155例临床分析
目的 探讨肾上腺囊肿的诊断和治疗方法及腹腔镜微创治疗肾上腺囊肿的安全性和有效性.方法 回顾性分析1990年1月～2011年7月北京协和医院收治的155例肾上腺囊肿患者的临床资料.分析患者的临床资料、诊断过程、手术过程、相关的并发症、术后病理和随访结果.结果 男性62例,女性93例.中位年龄43岁.位于单侧肾上腺154例,双侧肾上腺1例.囊肿直径2～11 cm,平均2.6 cm.术前诊断肾上腺囊肿准确性CT为92.2％,MRI为86.4％,B超为61.0％.术前内分泌检查除2例支持醛固酮腺瘤,2例支持嗜铬细胞瘤外,其余均提示无功能.腹腔镜手术146例,平均手术时间55 min,术后平均住院日2.2d；开放手术9例,平均手术时间153 min,术后平均住院日8.6d.围术期均无严重并发症出现.术后病理类型包括单纯性囊肿(86/156)、假性囊肿(67/156)、上皮性囊肿(3/156).术后随访1～16年无1例复发.结论 肾上腺囊肿诊断主要依靠影像学检查,增强CT是诊断肾上腺囊肿的有效方法,内分泌检查是必要的.对于功能性囊肿以及直径大于5cm、影像学检查提示存在实性成分的囊肿均建议手术治疗.腹腔镜手术可作为肾上腺囊肿首选的手术治疗方式.
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妊娠期糖尿病及正常糖耐量孕妇血浆护骨素水平的比较
目的 比较妊娠期糖尿病(GDM)和正常糖耐量(NGT)妊娠妇女在怀孕中晚期血浆护骨素(OPG)及相关因子水平.方法 NGT和GDM妊娠妇女各65例,于孕24～28周取静脉血,-20℃低温保存.用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血浆护骨素(OPG)水平,同时测定空腹血糖(FPG),空腹胰岛素(FINS),糖化血红蛋白(HbA1c),血脂水平,超敏C反应蛋白(hs-CRP),血细胞计数,计算胰岛细胞功能(HOMA-B)和胰岛素抵抗(HOMA-IR)的评估指数.结果 GDM组和NGT组血浆骨保护素(OPG)水平分别为2 619[1968,3917] ng/L和3 225[2 146,4 226] ng/L,两组间无明显差异.在NGT组,OPG与FINS(r =0.335；P ＜0.05)、HOMA-IR(r =0.363；P＜0.05)和血小板计数(r =0.333;P＜0.05)呈正相关,与载脂蛋白B(r=-0.254; P＜0.05)呈负相关,在GDM组,未发现上述指标与OPG水平相关.结论 OPG可能参与了糖耐量正常孕妇孕期的胰岛素抵抗和炎性反应.
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小鼠间充质干细胞脂向分化过程中miRNA-143的表达
目的 探讨小鼠间充质干细胞(MSCs)脂向分化过程中miRNA-143 (miR-143)的表达,为阐明MSCs脂向分化的调控机制提供新线索.方法 采用全骨髓体外分离结合差速贴壁法纯化扩增C57BL/6小鼠MSCs,将第5代MSCs采用脂肪细胞分化诱导剂进行成脂诱导.运用miRNA芯片技术比较MSCs组和脂肪细胞组中miR-143的表达,并通过实时定量PCR技术验证.结果 成功分离、纯化和培养MSCs；MSCs经脂肪诱导剂诱导后,胞内大量脂滴形成,油红O染色阳性.MiRNA芯片及实时定量PCR结果均表明miR-143在MSCs脂向分化过程中显著上调(3.73 ±0.42vs1.00 ±0.14,P＜0.01).结论 miR-143可能参与调控MSCs的脂向分化.
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重组腺病毒Ad-hBNP的构建及其在CHF大鼠中的分布与表达
目的 构建重组腺病毒Ad-hBNP,观察其在CHF大鼠体内的分布与表达,为腺病毒介导BNP治疗慢性心力衰竭奠定实验基础.方法RT-PCR法从人心肌组织获得hBNP片段,应用AdEasy腺病毒载体系统,构建Ad-hBNP;CHF成模大鼠24只,随机分为4组,18只单次腹腔注射Ad-hBNP后,均分为1、4和7d组；余不予Ad-hBNP,为0点组.实验动物于相应时间处死,ELISA检测血清hBNP水平,免疫组化检测各脏器hBNP表达,RT-PCR检测各组织hBNP mRNA表达.结果成功构建用于实验性基因治疗的Ad-hBNP,纯化后滴度达到4.4×1012VP/mL.透射电镜观察Ad-hBNP呈多面体结构,颗粒直径在90 nm左右.单次腹腔注射Ad-hBNP,CHF大鼠心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏及小肠均检测到hBNP表达,外源hBNP在CHF大鼠体内的表达至少可持续7天.结论腺病毒介导的外源hBNP基因可在CHF大鼠多脏器中得到有效表达,其生物学效应时间显著长于BNP的生物半衰期.
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PTEN/Akt/mTOR通路增加K562/ADM细胞化疗敏感性
目的 探讨K562/ADM细胞系中PTEN/Akt/mTOR信号通路对不同化疗药物敏感性的影响.方法 K562/ADM细胞分为未转染组、转染野生型PTEN组(Ad-PTEN-GFP)、转染空载体组(Ad-GFP),并与不同浓度雷帕霉素或三氧化二砷( As2 03)联合作用.通过MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光定量PCR检测PTEN、mTOR、BCL-2及BAXmRNA水平,Western blot检测PTEN及Akt、p-Akt蛋白水平.结果 野生型PTEN对K562/ADM细胞大增殖抑制率为32.3％,与未转染组及Ad-GFP组相比,Ad-PTEN-GFP组mTOR mRNA和p-Akt蛋白明显减低；雷帕霉素与As2 03联合应用后细胞增殖明显受抑,凋亡率(28.61％±1.46％)明显高于单药作用组(P＜0.05),BCL-2 mRNA表达降低,BAX mRNA表达增加,以联合干预组为明显.结论 PTEN/Akt/mTOR信号传导通路能够增加K562/ADM细胞对雷帕霉素及As2 03的敏感性.
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胃癌SGC7901/DDP细胞microRNA的表达谱分析及其在耐药逆转中的作用
目的 分析胃癌SGC7901/DDP细胞microRNA表达谱及其耐药特性,研究筛选出的microRNA-200c对SGC7901/DDP细胞耐药的影响.方法 采用MTT法检测细胞的药物敏感性；应用microRNA芯片进行表达谱分析；运用生物信息学对筛选出的microRNA进行靶点预测和生物学进程分析.采用实时荧光定量RT-PCR检测microRNA-200c的表达；采用细胞转染分析microRNA-200c对SGC7901/DDP细胞药物敏感性的影响.结果 SGC7901/DDP细胞对顺铂、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇的IC50均显著高于SGC7901细胞(P＜0.05).与SGC7901细胞相比,SGC7901/DDP细胞中表达上调和下调超过2倍的microRNA分别有5和14个.microRNA高低表达组预测的靶点均广泛参与信号传导、细胞周期、分化、凋亡及增殖等生物学进程.实时荧光定量PCR分析证实microRNA200c在SGC7901/DDP细胞中的表达显著降低(P＜0.05),microRNA-200c能够显著降低SGC7901/DDP细胞对顺铂、阿霉素、5-氟脲嘧啶及紫杉醇的IC5o (P ＜0.05).结论 SGC7901/DDP细胞的多药耐药特性可能与microRNA表达谱的改变有关,其耐药表型的逆转可能与microRNA-200c的表达有关.
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PINK1参与调节多巴胺的合成
目的 探讨PINK1基因对多巴胺合成的调节作用.方法 用高压液相色(HPLC)电化学方法检测多巴胺(DA)含量,用Western blots和Real-Time PCR法检测DA合成限速酶酪氨酸羟化酶(TH)和多巴脱羧酶(DDC)的表达量,通过免疫共沉淀(Co-IP)和免疫组织化学染色观察PINK1和TH之间是否存在相互作用.结果 PINK1基因敲减后,细胞内DA水平为5.356±0.536 μg/L,显著低于对照组的11.630±1.559 μg/L (P ＜0.05)；TH mRNA和蛋白的表达分别为0.371±0.140和0.195 ±0.062,显著低于对照组的1.009±0.152和0.386 ±0.044 (P＜0.05)；DDC mRNA和蛋白的表达分别为0.396 ±0.124和0.149±0.029,显著低于对照组的1.100±0.070和0.323±0.037 (P ＜0.05)；免疫荧光化学检测PINK1和TH存在共定位,Co-IP显示PINK1和TH存在相互作用.结论 PINK1可以通过调控DA的合成酶TH和DDC的表达影响DA的合成.
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引入易错PCR和DNA-shuffling技术构建单链抗体库
目的 引入易错PCR和DNA-shuffling技术构建高库容量的单链抗体库.方法 收集不同年龄、性别、健康状态的人的静脉血各5 mL,提取单个核细胞总RNA,反转录为cDNA,PCR扩增VH和VL基因,应用易错PCR对VH和VL基因进行突变,同时用DNA-shuffling技术对全长单链抗体基因进行体外改组,获得的分子与T载体连接,转化E.coli DH5α,选取阳性克隆,经菌落PCR后酶切鉴定抗体库多样性,计算分析单链抗体库容量.结果 成功构建了库容量为4.37×1013的单链抗体库,经酶切鉴定,初步判定抗体库多样性良好.结论 引入易错PCR和DNA-shuffling技术,成功构建了单链抗体库,为后续筛选高亲和力抗体奠定了实验基础.
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吡咯烷二硫代氨基甲酸酯减轻2型糖尿病大鼠胰岛β细胞氧化损伤
目的 探讨吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞氧化损伤的影响及其机制.方法 用长期高脂饮食加小剂量链脲佐菌素(STZ,27 mg/kg)建立2型糖尿病大鼠模型.PDTC治疗组大鼠每天腹腔注射PDTC(50mg/kg)1次,1周后取血浆检测血糖.取胰腺组织匀浆测定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的含量；应用免疫组化和Western blot等检测胰腺组织中诱生型一氧化氮合酶(iNOS)的表达及硝基化酪氨酸(NT)的水平；流式细胞术检测胰岛β细胞凋亡百分率.结果糖尿病大鼠血糖、MDA水平均显著高于对照组(P ＜0.01)；SOD和GSH-PX水平明显低于对照组(P＜0.01)；胰岛组织中iNOS表达水平(0.37 ±0.06)和NT生成量(0.24±0.01)均较对照组(0.11±0.01)和(0.12±0.01)明显增多(P＜0.01).PDTC治疗后血糖明显降低,MDA明显减少(P＜0.01)；而SOD、GSH-PX水平明显升高(P ＜0.05,P＜0.01)；胰岛组织中iNOS表达及NT生成均明显减少(P＜0.01)；胰岛β细胞凋亡率明显降低(P＜0.05).结论 PDTC可以减轻大鼠体内氧化应激反应,减少糖尿病大鼠胰岛β细胞的凋亡.
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抗TNF-α抗体治疗大鼠肝肺综合征
目的 探讨抗TNF-α单克隆抗体(TNF-αMcAb)对肝肺综合征(HpS)大鼠NF-κB表达的影响及NF-κB在抗TNF-α单克隆抗体治疗大鼠肝肺综合征中的作用.方法 用胆总管结扎术(CBDL)建立大鼠HPS模型,经腹腔注射抗TNF-αMcAb(0.1 mg/kg·2 d)治疗HPS,HE染色观察肺组织病理变化；放射免疫法检测血浆TNF-α的水平；鲎试剂盒检测血浆内毒素水平；进行血气分析,计算肺泡-动脉氧分压梯度差的变化；Western blot方法进行肺组织NF-κB蛋白表达定量分析.结果 抗TNF-αMcAb干预后肺组织的炎性反应和毛细血管扩张明显减轻；肺泡-动脉氧分压梯度差明显减少(P＜0.05)；血浆内毒素和TNF-α的水平较胆总管结扎组明显减低(P＜0.05)；肺组织NF-κB蛋白表达水平显著下降(治疗前:0.93 ±0.23;治疗后:0.75 ±0.18)(P＜0.05).结论 抗TNF-α单克隆抗体可能通过抑制NF-κB的表达治疗肝肺综合征.
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TGFβ1,CTGF信号传导通路在小鼠肝纤维发生中的作用
目的 探讨实验性肝纤维化小鼠肝组织中TGFβ1,CTGF信号传导通路的变化及意义.方法 将小鼠随机分为对照组、肝纤维化模型组(腹腔注射10％的CCl4橄榄油),8周后应用酶法和放射免疫法检测血清ALT、HA水平,HE染色、Masson染色观察肝组织炎性反应及纤维化程度,免疫组化法和RT-PCR法检测肝组织α-SMA、TGFβ1、TGFβRⅡ、Smad3、Smad7、CTGF蛋白和mRNA水平.结果 模型组血清ALT及HA水平明显高于对照组；肝组织α-SMA、TGFβ1、TGFβRII、Smad3及CTGF(8.21±1.48、5.52±0.89、0.52±0.04、5.86±1.49、5.49±0.29)蛋白表达明显高于对照组(1.51±0.95、1.31±0.81、0.37±0.04、1.41±0.95、0.31±0.19)(P＜0.01)；而模型组肝组织Smad7( 1.83±0.62)蛋白和mRNA表达较对照组(6.32±1.18)显著降低(P＜0.01).各指标mRNA表达与蛋白表达一致.结论 TGFβ1和CTGF信号传导通路过度活化,Smad表达和负调节TGFβ、CTGF信号传导通路的功能被抑制可能与肝纤维化的发生和发展密切相关.
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cPKCγ参与低氧预适应对小鼠脑缺血皮质内CRMP2水解和磷酸化的调节
目的 探讨经典型蛋白激酶Cγ( cPKCγ)在低氧预适应(HPC)调节小鼠脑缺血皮质内脑衰反应蛋白-2(CRMP2)水解和磷酸化中作用.方法 利用雄性BALB/c小鼠(18 ～22 g)HPC和大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,借助蛋白印迹、免疫共沉淀和免疫组化等生物化学技术,观察cPKCγ激活对小鼠缺血脑皮质内CRMP2蛋白水解程度(BDP)和磷酸化水平(p-CRMP2)、cPKCγ-CRMP2相互作用和皮质缺血半影区内p-CRMP2阳性细胞数的影响.结果 HPC显著提高缺血脑皮质半影区内p-CRMP2水平,降低BDP产物形成(P＜0.05),而侧脑室注射cPKCγ抑制剂Go6983(6nmol/L)可明显解除HPC对半影区内CRMP2蛋白水解和磷酸化的调节作用(P＜0.05)；免疫共沉淀结果提示,cPKCγ激活程度参与HPC对缺血脑皮质半影区内cPKCγ-CRMP2相互作用的调节；同时,cPKCγ激活与HPC提高脑缺血半影区内p-CRMP2阳性细胞数有关(P＜0.05).结论 cPKCγ参与HPC对小鼠缺血脑皮质内CRMP2水解与磷酸化的调节.
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84例慢性淋巴细胞白血病遗传学异常及预后分析
目的 探讨荧光原位杂交(FISH)技术检测慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者的遗传学异常,并分析与其他预后指标的相关性及预后价值.方法 回顾性分析采用FISH技术进行着丝粒探针CSP12(12p11.1～12q11.1)和序列特异性探针D13s25( 13q14.3)、ATM (11q22.3)、RB1 (13q14)、P53 (17p13.1)检测过的84例CLL患者的临床及实验室资料.分析FISH技术检测CLL患者中遗传学异常的发生率,并分析遗传学异常与CLL患者年龄、性别、Bi-net分期、血清乳酸脱氢酶(LDH)、CD38表达、生存期之间的相关性.结果 1)84例CLL患者中,62例有至少有1种遗传学异常,检出率为73.8％.2)共发现5种遗传学异常,依次为13q14缺失(56％)、P53缺失(28.6％)、- 12(16.7％)、ATM缺失(13.1％)、+12(13.1％).其中- 12为CLL患者中新发现遗传学异常.3)分析上述5种遗传学异常与年龄、性别、Binet分期、LDH水平及CD38表达的关系,在＞60岁年龄患者里,+12阳性率显著高于＜60岁患者(24％vs3％,P＜0.05),与性别、Bient分期、LDH水平、CD38表达无关.4)在LDH增高组中,CD38高表达的病例比例增高(67％vs20％,P＜0.05).5)伴有del(17p13)或del(11q22)或复杂异常中位生存时间为75个月,单纯具有del(13q14)异常组的中位生存时间为150个月,其他中位生存时间为120月,但两两比较没有达到统计学差异.结论 1)FISH技术是一种在分析CLL患者遗传学异常方面较为快速、准确和敏感的方法；2)CLL患者中除了常见13q14缺失、P53缺失、ATM缺失及+12之外,还可以出现-12异常.
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低氧与心率变异性研究进展
高原或运动等生理性低氧或/和临床心血管、呼吸及代谢等疾病病理性缺氧均可改变机体自主神经调节功能,从而导致心率变异性(HRY)变化.HRV对机体功能状态评定、多种疾病的诊断、预后及疗效评价具有重要价值.本综述简要介绍近年来有关低氧与HRV的研究进展.
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Ghrelin对心衰恶液质的治疗作用
生长素( Ghrelin)能促进生长激素的释放,舒张血管和降低血压以改善心脏功能,刺激食欲、增加体质量并参与糖和脂肪代谢的调节.Ghrelin通过改善血管内皮功能、抑制炎性细胞因子、抑制心肌肥厚以防止心脏构型重建.作为一种内源性的心脏保护物质,Ghrelin能通过多种机制改善心衰心脏功能、引起正向能量平衡,以延缓心脏恶液质的发生发展.其逆转和拮抗代谢重构的有益作用,是心衰恶液质治疗的一条新途经.作为一种监测指标,Ghrelin可对其病情严重程度和预后进行评估.
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树突状细胞在银屑病致病机制中作用的研究进展
银屑病是多种因素造成的T细胞异常活化的慢性炎性反应皮肤病,新研究表明,在T细胞被激活前,树突状细胞(DCs)的活化才是银屑病发生的起始和关键.正是因为DC数量增多、刺激T细胞能力增强、分泌多种细胞因子及化学增活素,形成“细胞因子风暴”,从而导致银屑病的红斑.
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地高辛抑制豚鼠心室肌细胞Na+,K+-ATP酶和人胚肾上皮细胞系HERG钾通道电流
强心苷类药对Na+,K+-ATP酶的作用在低浓度时为兴奋、在高浓度时呈抑制作用[1].应用膜片钳技术观察地高辛(Digoxin)对豚鼠心室肌细胞Na+,K+-ATP酶电流(Ip)的作用还未见报道.此外,由于很多药物的心脏不良反应是通过抑制人ether-a-go-go-related基因(HERG)编码的快速激活的延迟整流钾通道(Ikr)而引起QT间期延长和尖端扭转性室速(TdP)[2].本研究初步探讨地高辛对豚鼠心室肌细胞Ip电流和对人胚肾上皮细胞系(human embryonic kidney cell line,HEK-293)上HERG/Iκr钾通道的影响及地高辛治疗心功能不全和引起心脏毒性反应的机制.1材料与方法1.1动物、细胞系、质粒来源及地高辛配制:普通级豚鼠,8～12周龄,体质量250 ～ 300 g,雌雄不拘,由华中科技大学同济医学院实验动物学部提供[合格证号SCXK(鄂)2004-007].HEK-293细胞,中国科学院上海生科院细胞资源中心.编码Ikr的HERG基因的真核细胞表达载体pcgi-EGFPHERG(南京师范大学生命科学院张朝教授馈赠).地高辛(郑州大学药学院药物化学研究所提供)溶于二甲基亚砜中配制成10 mmol/L的母液.
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乳腺癌中MTDH的表达及意义
乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤之一,其侵袭转移是导致肿瘤患者死亡的主要原因[1].近来,美国新泽西癌症研究所和普林斯顿大学的研究人员发现身患严重乳腺癌的患者体内,8号人类染色体的一小部分被重复了多次,肿瘤内一种名为Metadherin (MTDH)基因发生变异,表现异常活跃[2].本研究探讨MTDH在乳腺癌发病中的作用.1材料与方法1.1材料1.1.1病例标本:收集潍坊医学院附属医院手术切除乳腺癌标本52例,分别取肿瘤组织和癌旁正常组织(＞5 cm),置于- 150℃冰箱保存备用.所有病例均经病理证实,术前均未采取放疗、化疗和免疫治疗.患者平均年龄55.8岁(41～80岁)且均为女性.乳腺癌标本分为高分化10例,中分化26例,低分化16例.20例有淋巴结转移,依据国际抗癌联盟1978年修订的乳腺癌TNM分期标准:Ⅰ期10例,Ⅱ期18例,Ⅲ期14例,Ⅳ期10例.患者均知情同意.
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AngⅡ促进大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移
血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)的增殖、迁移和细胞外基质的合成是高血压、动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄等血管重塑性疾病发生、发展的重要细胞病理学基础[1].血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)的促生长作用参与了高血压、动脉粥样硬化、血管再狭窄等血管增殖性疾病的发生和发展.本实验观察AngⅡ对VSMCs细胞增殖及迁移的影响,进一步阐明血管增殖性疾病的发病机理,为临床防治提供理论依据.1材料与方法1.1细胞培养与试剂:80～100 g健康雄性SD大鼠,取胸腹主动脉血管中膜用贴块法分离、培养VSMCs[2].取3～6代细胞进行实验.待细胞生长至70％～80％汇合后换用无血清培养液饥饿培养16 h,使细胞处于静止期,然后换用含2％FBS的培养液,分别加入不同浓度(10-8、10-7和10-6 mol/L)的AngⅡ(Sigma公司)孵育24h,或10-7 mol/L的AngⅡ孵育不同时间(3、6、12、24和48 h),收集细胞用于实验.
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偏硅酸钠抑制家兔外周血白细胞活性氧的生成
高血脂时外周血白细胞引爆和激活,产生过多活性氧(reactive oxygen species,ROS),抑制过量的ROS产生对于控制动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)发生发展具有重要意义[1].以往研究发现偏硅酸钠( Na2 SiO3)有抗炎效应[2].本实验观察Na2 Si03对家兔外周血白细胞ROS的抑制作用,为NaSi03抗AS机制提供进一步资料.1材料与方法1.1动物:清洁级新西兰家兔(河北医科大学动物中心,合格证号:1004218),雄性,体质量1500 ～2000 g.1.2制备ox-LDL:从健康家兔耳中动脉取血,沉淀法提取低密度脂蛋白,置硫酸铜( CuSO4)溶液中37℃氧化24h得氧化低密度脂蛋白(ox-LDL).
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食管癌耐药皮下移植瘤裸鼠模型的建立
目的 建立食管癌耐药裸鼠模型及探讨食管癌耐药机制.方法 4周龄的BALB/c nu/nu裸小鼠36只,随机分为6组,左前肢肩胛下皮下分别接种食管癌细胞Eca109及食管癌耐药细胞Eca109/ABCG2,建立裸鼠皮下移植瘤模型.成瘤后腹腔注射阿霉素(ADM)1、4 mg/kg.RT-PCR方法检测移植瘤细胞中三磷酸腺苷结合转运蛋白G2(ABCG2)mRNA表达,流式细胞术检测移植瘤细胞中ABCG2蛋白、凋亡及细胞中ADM含量.结果 成功建立裸鼠食管癌耐药细胞移植瘤模型,皮下接种细胞1周后成瘤,成瘤率100％.注射ADM,接种Eca109/ABCG2细胞的裸鼠皮下移植瘤体积、质量和ABCG2表达量显著高于接种Eca109细胞移植瘤(P＜0.05),但细胞凋亡率及细胞内ADM含量显著降低(P＜0.05).结论 接种Eca109/ABCG2细胞的裸鼠皮下移植瘤模型是具有ABCG2耐药表型的食管癌耐药动物模型.
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新生大鼠海马神经元原代无血清培养与鉴定
目的 建立一种简单、易行的海马神经元无血清体外培养方法以获得高纯度、高活力的海马神经元.方法 取新生24 h内SD大鼠,分离海马,经消化后种植于包被有Matrigel基膜的玻片上,24h后换含有N2、1B27的Neurobasal无血清培养基,于不同时间在倒置相差显微镜下观察细胞的生长状态；采用β-tublinⅢ免疫荧光细胞化学技术鉴定海马神经元纯度.结果大部分海马神经元于3～24h贴壁且可长出细长突起,3d细胞具有典型神经元的形态特征,5d后神经元突起进一步增多并形成稠密的网络连接,7d后神经元胞体丰满,趋于成熟.经 β-tublinⅢ免疫荧光技术鉴定纯度为94.2％±3.6％.结论此方法简单有效,可获得高纯度的海马神经元.
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用组织贴壁法从整根脐带分离培养间充质干细胞及其生物学特性的检测
目的 建立从整根脐带分离培养间充质干细胞(UC-MSCs)的技术,并对其生物学特性进行检测.方法 用组织贴壁法分离UC-MSCs,并通过传代进行纯化和扩增培养,绘制生长曲线,用流式细胞仪检测UC-MSCs表面抗原及细胞周期；在特定诱导体系中,检测UC-MSCs向脂肪、成骨及软骨分化的潜能；用RT-PCR检测多能干细胞标志多能干细胞标志Oct-4,Sox-2,NanogmRNA水平.结果 成功建立了UC-MSCs分离培养的方法；贴壁细胞均表达CD73、CD90及CDi05,不表达造血细胞表型CD34、CD45和HLA-DR;细胞倍增时间为(24.04 ±0.49)h,Go ～G1期和S+G2+M期所占比例分别为81.56％和18.44％；UC-MSCs能够向脂肪、成骨和软骨分化；表达Oa-4,Sox-2,Nanog基因.结论 组织贴壁法是一种较好的分离培养UC-MSCs的方法,培养的细胞为更原始的间充质干细胞,增殖能力强.
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浮肿、发热、截瘫
患者女,34岁,因"浮肿1年余,发热3个月,双下肢瘫痪6天"入院.1病例摘要(第1部分)1.1病史患者于1年余前无明显诱因出现颜面及双下肢浮肿,伴脱发.查血常规WBC 3.2×109/L,Hb1O1 g/L,PLT 89 ×109/L,尿常规:蛋白5.0 g/L,24h尿蛋白定量4.03g,血A1b 25g/L,Cr正常,ANA、抗dsDNA(+),肾穿病理:狼疮性肾炎Ⅳ-S(A) +V型.诊断系统性红斑狼疮(SLE)给予泼尼松龙55 mg qd→每月减5mg,25 mg qd之后每月减2.5mg,来氟米特50 mg/d×3 d→20 mg qd维持.尿蛋白逐渐减少,浮肿、脱发逐渐减轻.1年前泼尼松龙减至40 mgqd时出现发热,多于上午出现,Tmax 39℃,下午自行降至正常,伴盗汗,中药治疗数日后体温正常.8个月前再次发热,性状同前,中药治疗约20d后体温正常.3个月前泼尼松龙减至15 mg qd时第3次发热,Tmax40℃,上午及夜间达峰值,可自行降至正常,伴盗汗、畏寒,偶有寒战,无咳嗽、咳痰.胸部CT提示"双肺结节,肺间质改变".考虑SLE病情活动合并肺间质病变,泼尼松龙加至30 mg qd,并加用左氧氟沙星,3d后体温正常.停抗生素后再次发热,将泼尼松龙改为早20 mg,晚10 nmg,至今未再发热.1个月前感乏力,行走无力,8d前双下肢无力明显加重,无法行走,伴感觉减退,大小便失禁,6d前双下肢完全瘫痪.否认结核接触史.既往史、个人史、月经婚育史、家族史:无殊.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 03 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 z1 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
| 1999 | 03 04 05 06 Z1 |
