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挤出法诱导脂质体膜融合的研究

秦文娟;任颖;张晗;刘睿;陈汉;刘玲蓉

摘要: 目的 研究挤出法在诱导脂质体膜融合或膜组分混合中的应用,并考察不同挤出条件对脂质体膜融合率的影响.方法 将N-(7-硝基苄基-2-氧杂-1,3-重氮-4-基)磷脂酰乙醇胺(N-NBD-PE)和N-(丽丝胺罗丹明B磺酰基)磷脂酰乙醇胺(N-Rh-PE)标记的1,2-二油酰基卵磷脂(DOPC)脂质体以及无荧光标记的DOPC单层脂质体混合后挤出处理,采用激光扫描共聚焦显微镜观察混合脂质体挤出前后的荧光变化,并用荧光共振能量转移法计算混合脂质体的膜融合率.同时,分别考察挤出次数、挤出压力和温度对脂质体膜融合率的影响.结果 激光扫描共聚焦显微镜观察结果显示,荧光标记脂质体和无荧光标记脂质体混合悬液经挤出处理后,N-NBD-PE绿色荧光的分布密度和强度明显增加,证实已发生了膜融合.经过75次挤出处理后,脂质体膜融合率可达26%.挤出次数、挤出压力和温度对脂质体膜融合率具有明显影响,挤出次数越高、挤出压力越小和生理温度下挤出脂质体膜融合率越高.结论 挤出法可诱导不同磷脂组分的脂质体发生膜融合和膜组分混合,且制得的脂质体粒径分布更窄,有望成为一种诱导脂质体或脂质囊泡双层膜融合的新方法.

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