高效液相法测定通栓胶囊中原儿茶醛的含量

　　高效液相法测定通栓胶囊中原儿茶醛的含量

　　张玉玲1 金美花1 崔 炫1 金美玉2 (1.吉林省延边州食品药品检验所延吉133001;2.延边大学药学院2011级药学班延吉133001)

　　摘要：目的：建立通栓胶囊中原儿茶醛的含量测定方法。方法：采用反相高效液相法，ZORBA c.8(4.6mm×200mm，Sym)色谱柱，流动相为甲醇0.1%磷酸溶液(13：87)，流速l.OmL/min，检测波长280nm，柱温40℃。结果：原儿茶醛在0.0510.409 yg范围内有良好的线性关系，r=0.9998，平均回收率为91.980/o，RSD：0.89%(n=6)。结论：该方法分离效果好，简便准确，可用于通栓胶囊中原儿茶醛的含量测定，以控制其质量。

　　关键词：通栓胶囊原儿茶醛高效液相色谱法含量测定

　　中图分类号：R286.0 文献标识码：A 文章编号：1672-8351( 2018 )09-0001-02

　　通栓胶囊是中药复方制剂，为敦化市中医院院内处方，由丹参、赤芍、当归、地龙、山楂等七味药组成，主要功能为活血化瘀、通经活络，用于瘀血阻络所致中风，症见半身不遂，口舌歪斜，言语謇涩或不语，偏身麻木，头晕目眩，痰多而粘，舌质暗淡，舌苔薄白或白腻，脉弦滑等。为有效控制该复方制剂的质量，确保该药的质量安全和制剂的疗效，对本制剂丹参中原儿茶醛含量测定的方法进行论述，结果如下。

　　1仪器、试药

　　KQ-500DE型超声波清洗器(上海必能信超声有限公司);Aglient 1200高效液相色谱仪;Ezchrom Elite检测器;sQP型电子天平(赛多利仪器有限公司)。

　　通栓胶囊(吉林省敦化市中医院制剂室，批号为20141201,20150102，20150303);原儿茶醛对照品(中国食品药品检定研究院，批号为110810-200205，含量测定用);甲醇(色谱纯)，磷酸(优级纯，北京化工厂)，超纯水。

　　2方法、结果

　　2.1色谱条件：色谱柱[ZORBA C，。(4.6mmx250mm，SpLm)]，流动相：甲醇0.1%磷酸溶液(13:87)，流速为l.OmL/min，检测波长280nm，柱温40。C。在此条件下，色谱图见图1，论塔板数应大于或等于4000，阴性溶液在原儿茶醛峰保留时间位置处无吸收峰，阴性溶液对测定无干扰。

　　2.2供试品溶液与对照品溶液的制备：精密称定原儿茶醛对照品适量，用甲醇制成每ImL含原儿茶醛100hcg的溶液，作为对照品溶液;取20粒，混合均匀，精密称定本品内容物约lg，置50mL具塞锥形瓶中，精密加入50010甲醇溶液25mL，密塞，再次称定重量，超声处理th，放至室温，再称定重量，用50%甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液作供试品溶液。

　　2.3方法学考察：阴性试验：按通栓胶囊处方比例及工艺配制，取处方中缺丹参药材的其余各味药材，按照处方中各药材的投药量制成阴性样品，取制备好的阴性样品按照供试品溶液制备方法制备阴性对照溶液，同法测定。结果在与原儿茶醛对照品溶液相同的色谱条件，相同的保留时间供试品溶液出现吸收峰，而阴性对照溶液在此色谱条件下，原儿茶酚对照品出峰的保留时间未出现吸收峰，阴性对照溶液对处方中原儿茶醛的吸收无干扰，此方法测定通栓胶囊中原儿茶醛具有专属性。

　　线性关系考察：精密称取原儿茶醛，置50mL量瓶中，加甲醇制成每ImL中含0.1022mg的对照品溶液，作为贮备液，精密称取一定的体积，用甲醇稀释成系列对照品溶液，精密吸取，注入液相色谱仪，记录HPLC色谱图，以原儿茶醛浓度(斗g/mL)为横坐标、峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程Y=356028.2X+9857.7 ,r=0.9998( n=5).

　　结果表明，原儿茶醛在0.051yg0.409 yg范围内进样量与峰面积呈良好的线性关系。

　　精密度试验：精密称取原儿茶醛对照品溶液SyL，按上述色谱条件，连续进样6次，RSD为0.60'/0，结果，表明仪器精密度良好。

　　稳定性试验：取同一样品，按上述供试品溶液制备的方法制备供试品，分别于0、1、2、3、4、5、6h进样。结果峰面积的RSD为0.8%(n：7)，表明供试品溶液在6h内稳定。

　　重复性试验：取同一批样品6份，依法制备供试品溶液并测定。结果原儿茶醛平均含量为91.lOpLg/g，RSD为0.6%，表明该方法重复性良好。

　　加样回收试验：精密称取已知含量的样品，制备成3个不同浓度的供试品溶液，分别精密加入相同量的原儿茶醛对照品，依法测定。结果见表1。

　　表1原儿茶醛加样回收试验结果(n=6)

　　2.4样品含量测定：取3批样品，依法测定。测定结果见表2。

　　表2样品含量测定结果(vg/g)

　　3讨论.

　　3.1溶剂的选择：参照《中国药典》2010年版一部和文献方法，分别用甲醇、20%甲醇、50%甲醇和80%甲醇提取。根据过滤时的难易程度、所得色谱峰的情况，以及回收率的测定结果，因效果佳考虑，确认用50%甲醇提取。

　　3.2超声时间的选择：取样品lg，对不同超声时间(20、30、60min)的提取效果进行了考察，结果超声提取时间太短效果不好，故选择超声提取60min。

　　3.3高效液相色谱法的选择：丹参为通栓胶囊的主要药材之一。用HPLC法测定通栓胶囊中丹参的主要成分原儿茶醛的含量，出峰时间适宜，样品峰形和分离效果好。HPLC法简便、敏、重现性好、测定结果准确，所以可用于该制剂的含量测定和质量控制。3.4检测波长的选定：取一定量的原儿茶醛对照品，加甲醇溶解，照紫外一可见分光光度法，参照2010年版《中国药典(一部)》在200～350nm波长范围内进行紫外光谱扫描，结果在207nm、230nm、280nm、312nm的波长处有大吸收峰，经过多次实验，在280nm波长处测定，其他杂质的干扰少，满足含量测定的要求。故选择其测定波长为280nm。

　　参考文献

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