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华蟾酥毒基抑制人前列腺癌PC3细胞体外增殖研究

牛天力;秦国政

摘要: 目的 探讨华蟾酥毒基对人前列腺癌PC3细胞体外增殖和凋亡的影响及其可能存在的作用机制.方法 细胞分为不加药对照组,5、50、100、500 nmol/L华蟾酥毒基组,共5组.各组作用于PC3细胞24、48 h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测华蟾酥毒基对人前列腺癌PC3细胞增殖的影响.不同浓度华蟾酥毒基作用于PC3细胞48 h后,光学显微镜观察PC3细胞形态变化;克隆形成实验检测华蟾酥毒基对前列腺癌PC3细胞克隆形成能力的影响;流式细胞术检测华蟾酥毒基作用48 h后各组PC3细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测华蟾酥毒基对髓样细胞白血病-1(MCL-1)蛋白表达的影响.结果 24 h后华蟾酥毒基可在体外抑制PC3细胞增殖(P<0.01),48 h后华蟾酥毒基对PC3细胞增殖抑制作用更为明显(P<0.05),华蟾酥毒基对PC3细胞增殖能力有较好的抑制作用,且呈剂量和时间依赖性.细胞克隆形成实验发现,0.5 nmol/L华蟾酥毒基即可抑制细胞克隆形成(P<0.05),并且此种抑制作用与药物浓度呈正相关(P<0.05).流式细胞术结果显示,0.5 nmol/L以上华蟾酥毒基均可诱导PC3细胞凋亡,随浓度增加凋亡率显著增加(P<0.01),50 nmol/L华蟾酥毒基干预48 h后,PC3细胞凋亡率为39.667%;同时光学显微镜下细胞增殖抑制明显,并呈凋亡形态改变.蛋白质印迹法结果显示,不同浓度华蟾酥毒基均可下调抗凋亡蛋白MCL-1蛋白表达(P<0.01),以50 nmol/L华蟾酥毒基作用于PC3细胞48 h下调MCL-1蛋白表达更为显著(P<0.01).结论 华蟾酥毒基可抑制前列腺癌PC3细胞的体外增殖,并可诱导肿瘤细胞凋亡,其机制可能与抗凋亡蛋白MCL-1表达下调有关.

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