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睾丸性生殖障碍——曲细精管界膜病变
自Deviretser和Baker提出了新的称为男性不育症的逻辑性分类法.该分类法已为我国学者采纳与接受[2].其主要是将男性不育症原因分睾丸前、睾丸后和睾丸等因素.笔者前文[3]已就睾丸生精障碍,生殖细胞的生成,功能以及有害因素对睾丸生殖细胞的影响等方面进行了叙述,本文拟就曲细精管界膜的病理学改变介绍如下:
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关键词:
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影响睾丸生殖细胞凋亡的理化因素
环境污染日趋严重,不孕不育症发病率呈上升态势。睾丸生殖细胞凋亡是无精少精的机制之一。睾丸生殖细胞凋亡受许多内外因素的多重影响,本文就影响睾丸生殖细胞凋亡的一些外在理化因素作一简要概述。
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镉对小鼠睾丸生殖细胞的遗传毒性
目的 探讨镉的雄性小鼠生殖遗传毒性.方法 应用单细胞凝胶电泳试验(SCGE)研究镉对离体小鼠睾丸生殖细胞DNA的损伤作用.结果 氯化镉各染毒组尾部DNA百分率及尾矩均明显高于对照组(P<0.01).随着染毒剂量的增加,小鼠睾丸细胞DNA损伤程度也逐渐增加,存在着明显的剂量-效应关系.结论 氯化镉可引起离体小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤,对雄性小鼠生殖细胞具有生殖毒性.
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小鼠睾丸精母细胞染色体畸变测定方法比较
电磁辐射和化学因子可诱导生殖细胞突变造成不育、先天畸形、流产、死胎和肿瘤,而睾丸生殖细胞染色体畸变检测是检测生殖细胞遗传损伤的一种简便常规方法,该方法已纳入农药登记毒理学方法[1]、食品安全性毒理学评价程序和方法[2]等国家标准执法检测程序.随着工业的发展和卫生监督工作的加强,将有越来越多的健康相关产品进行此项测试.在上述国家标准程序中规定的睾丸精母细胞染色体检测方法均为醋酸软化法,在实际操作中,因该方法存在软化程度不易掌握、细胞密度大、获取中期相细胞数量难以保证的欠缺,给镜下分析工作带来困难.本试验用改良Evans法与醋酸软化法做一对比试验.
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142.组织干细胞
1.定义组织按相应的分化阶段分为①干细胞(stem cells);②前体细胞(progenitor cells/transit amplifying cells);③成熟细胞(mature cells)三类.组织干细胞或称躯体性干细胞,既有多分化能力,也保持未分化性的胚胎性干细胞特征.干细胞具有多分化能力的同时,也具有干细胞产生干细胞的自我复制能力.这样的由干细胞系统产生的细胞群有血细胞、皮肤表皮细胞、消化道黏膜细胞、睾丸生殖细胞等.干细胞占构成组织的全体细胞的比例很低,例如造血干细胞仅以有核细胞的1/100000的低比率存在.但是,利用多种单克隆抗体和干细胞特有的药剂排泄活性、荧光细胞分离技术(FACS),使分离干细胞成为可能.干细胞的细胞转化周期非常慢,该集团中一部分细胞进入细胞周期后,区别于前体细胞可显示出高的增殖能力.明确什么刺激使干细胞开始增殖、分化、子细胞的不均等分裂,或自我复制(birth)和细胞分化(death)两个不同的方向是由怎样的机制产生的是今后的课题.
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Wnt/β-catenin信号通路在双酚A暴露对子鼠雄性生殖细胞表达
目的 探讨Wnt/β-catenin信号通路蛋白在出生前后双酚A(BPA)暴露对子鼠雄性生殖表达.方法 ICR孕鼠饮水染毒,自受孕0天随机分为:溶剂对照组、100 nmol/LBPA组、300nmol/LBPA组;雄性仔鼠出生后6周处死,取睾丸组织,免疫组化检测β-catenin、DKK1蛋白的表达.结果 免疫组化结果显示,与溶剂对照组比较,BPA暴露组β-catenin、DKK1蛋白表达明显增加,多分布在精原细胞和睾丸间质细胞中,且间质细胞强阳性.结论 Wnt/β-catenin信号通路蛋白可能参与了BPA暴露对子鼠雄性生殖细胞表达影响.
关键词: 双酚A 睾丸生殖细胞 β-catenin蛋白 DKK1蛋白 -
TUNEL法检测大鼠睾丸生殖细胞凋亡的方法探究
目的 用缺口末端标记技术(Td-mediated dudpo-x nick end Labeling,Tunel)对大鼠睾丸生殖细胞的凋亡做形态学观察,以期提高此方法的特异性和敏感性.方法 采用大黄素灌胃后天数不同大鼠睾丸生殖细胞,用HE、Tunel经典法和Tunel改良法观察不同时期细胞凋亡水平并进行比较.结果 采用Tunel改良法后,凋亡阳性细胞数量明显增加且背景浅,细胞着色深,轮廓清晰完整,凋亡指数明显提高(P<0.05).结论 改进的Tunel法适合于大鼠睾丸生殖细胞凋亡的检测.
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镉对小鼠睾丸生殖细胞DNA损伤作用研究
目的 研究氯化镉对小鼠睾丸生殖细胞DNA的损伤作用.方法 用不同浓度氯化镉分别对小鼠睾丸细胞进行处理,分为阴性对照组(生理盐水)、微剂量组(0.04mmol\LCdCI2)、低剂量组(0.2mmol\L CdCI2)、中剂量组(1mmol\LCdCI2)、高剂量组(5mmol\L CdCI2),用单细胞凝胶电泳法分别计数各组400个细胞,按照不同的损伤程度进行分类;并分别测量各组50个彗星细胞尾长并计算均方值.结果 各组小鼠睾丸生殖细胞损伤率和尾长均方分别为:阴性对照组:8.0%、8.543±2.131,微剂量组:48.5%、24.761±3.595,低剂量组:65.0%、39.246±5.894,中剂量组:71.5%、42.745±5.231,高剂量组:87.5%、49.374±4.543;4个剂量组小鼠睾丸细胞DNA损伤率显著高于阴性对照组(P<0.001),四个剂量组小鼠睾丸细胞DNA损伤的彗星细胞尾长均方值显著高于阴性对照组(P<0.001),并且DNA损伤率和彗星细胞尾长均方值随着剂量增加而增加.结论 微量氯化镉对小鼠睾丸生殖细胞DNA即已存在明确损伤作用,且损伤程度与氯化镉剂量成正比.
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β-catenin、DKK-1蛋白在出生前后双酚A暴露的子鼠雄性生殖细胞中的表达
目的:探讨 Wnt/β-catenin 信号通路主要蛋白(β-catenin、DKK-1)在出生前后双酚A(BPA)暴露的成年子鼠雄性生殖细胞中的表达及意义。方法自受孕第0天(PGD0),ICR孕鼠饮水BPA染毒,随机将孕鼠分为溶剂对照组、BPA低剂量(10 nmol/L )组、BPA中剂量(50 nmol/L)组、BPA高剂量(300 nmol/L)组,每组6只。雄性仔鼠出生后继续饮水染毒,剂量同上,6周(PGD42)处死,取睾丸组织,计算睾丸系数;免疫组化和Western blot法检测β-cate-nin、DKK-1蛋白的表达。结果 BPA暴露组较溶剂对照组仔鼠睾丸脏器系数降低,β-catenin、DKK-1蛋白表达明显增加;免疫组化显示,β-catenin、DKK-1蛋白多位于睾丸间质细胞和精原细胞中。结论β-catenin、DKK-1可能参与了出生前后BPA暴露对子鼠雄性生殖细胞发育的影响。
关键词: 双酚A β-catenin蛋白 DKK-1蛋白 睾丸生殖细胞 -
自制膜鞘突在隐睾丸固定术中的应用观察
隐睾是一种常见病,治疗应在2岁前后,因为隐睾受体温影响,在1岁以后就出现超微结构变化,2岁出现光镜变化,主要是睾丸生殖细胞出现空泡,曲细精管萎缩,影响精子的生长,青春期后绝大多数隐睾发生萎缩,如系双侧会影响生育能力,目前治疗隐睾的常用方法有两种:①内分泌治疗,通常选择绒毛膜促性腺激素(HCG)或促性腺激素释放激素(GNRH);②手术治疗,包括内分泌治疗无效者均应及早手术,隐睾手术方法多年来一直采用的内膜囊睾丸固定术.
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精原干细胞移植的研究进展
睾丸生殖细胞中精原干细胞(SSC)是雄性动物睾丸内惟一向子代传递遗传信息的干细胞,具有高度自我更新和分化潜能,也是雄性动物精子发生的基础.目前SSC移植法是研究精子发生过程的主要手段,也是制作转基因动物,研究基因功能,治疗雄(男)性不孕和保护濒危动物等的关键环节.常用的移植法有睾丸生殖细胞移植法和睾丸组织块移植法,现将用这2种移植法的研究进展作如下综述.
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糖皮质激素对睾丸生殖细胞的影响
糖皮质激素(GC)是肾上腺皮质束状带细胞分泌的激素,分为皮质醇和皮质酮,在人体血浆中的主要是皮质醇,其平均水平为135μg/L,而皮质酮为8μg/L,仅为皮质醇的5%~10%.GC对物质代谢、全身功能状况及应激反应均有调节作用.
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环磷酰胺染毒小鼠精子形态及精细胞微核变化
目的 探讨环磷酰胺对小鼠生殖毒性的影响.方法 小鼠腹腔注射环磷酰胺溶液,连续5 d染毒,染毒后28 d取双侧睾丸和附睾,计数小鼠精子畸形率和生殖细胞微核发生情况,评价环磷酰胺对小鼠的生殖毒性作用.结果 腹腔注射环磷酰胺实验组精子畸形率与对照组相比差异有显著性(P<0.01);实验组生殖细胞微核率与对照组相比差异有显著性(P<0.05).结论 小鼠腹腔注射环磷酰胺对雄性小鼠生殖细胞和精子有损害作用.
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出生前后双酚A暴露对子鼠雄性生殖细胞凋亡的影响
目的 研究出生前后双酚A(BPA)暴露对子鼠雄性生殖细胞凋亡的影响,探讨BPA对雄性生殖系统的影响及可能机制. 方法 受孕0天(PGD0)的ICR孕鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、10nmol/LBPA组、100 nmol/L BPA组、1000 nmol/L BPA组;孕鼠饮水染毒,出生后6周(PND42)分别处死雄性仔鼠,取睾丸称湿重,计算睾丸脏器系数;取睾丸组织,电镜观察超微结构的改变,Hoechst染色观察细胞凋亡,免疫组化检测Caspase-3的表达.结果 与空白组和溶剂对照组比较,BPA暴露组睾丸脏器系数降低;电镜显示,高、中剂量组的间质细胞、精原细胞、支持细胞线粒体呈空泡样变化,粗面内质网呈不同程度的扩张.Hoechst染色显示中、高剂量组较对照组和低剂量组细胞凋亡明显.免疫组化结果显示高、中剂量组Caspase-3表达明显,多分布在精原细胞和间质细胞中,且间质细胞强阳性.结论 BPA可以通过诱导生精细胞和间质细胞的凋亡影响睾丸组织学结构.
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妊娠与滋养细胞肿瘤
滋养细胞肿瘤是我国较常见的妇科恶性肿瘤之一,绝大多数滋养细胞肿瘤继发于妊娠,称为妊娠滋养细胞肿瘤(gestational trophoblastic neoplasia,GTN),仅有极少数滋养细胞肿瘤来源于卵巢或睾丸生殖细胞,称为非妊娠性绒癌.妊娠滋养细胞肿瘤主要包括侵蚀性葡萄胎、绒毛膜癌(简称绒癌)、胎盘部位滋养细胞肿瘤及上皮样滋养细胞肿瘤,由于侵蚀性葡萄胎和绒癌在临床表现、诊断和处理原则等方面基本相同,且该组疾病又好发于需要保留生育功能的年轻妇女,常缺乏组织学证据,因此目前临床上将侵蚀性葡萄胎和绒癌合称为妊娠滋养细胞肿瘤,若病变局限于子宫,称为无转移性妊娠滋养细胞肿瘤;若病变出现在子宫以外部位,称为转移性妊娠滋养细胞肿瘤.
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睾丸精原细胞瘤的CT、MRI诊断价值
精原细胞瘤是睾丸生殖细胞类肿瘤中常见的一种,但其缺乏特异性的临床表现.本文搜集了14例经手术病理证实的睾丸精原细胞瘤影像资料,对其CT与MRI表现进行分析,探讨CT与NRI对其的诊断及鉴别诊断价值.1 资料与方法1.1 一般资料搜集本院经手术及病理证实的睾丸精原细胞瘤14例,其中位于左侧5例,右侧9例,年龄17~54岁,平均年龄36.8岁.17~35岁8例,35~54岁6例.临床上11例有阴囊疼痛伴沉重感,扪及睾丸肿块,触之压痛;3例无痛性睾丸肿大或坠胀感.
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Fas/FasL系统与睾丸
哺乳动物睾丸中的生殖细胞通过多次有丝分裂进行克隆性扩增,从干精原细胞到后产生精子是一个连续的分化与成熟的动态过程.生精上皮内的支持细胞和生殖细胞紧密联接,支持细胞跨越生精上皮的整个厚层,通过提供结构、激素和营养来供养生殖细胞,与精子生成和谐地结合起来.生殖细胞不间断地克隆性扩增,需要一种机制来平衡生殖细胞数目,以及接受支持细胞的支持与供养能力.凋亡是一个依赖能量的细胞主动死亡过程,与核酸内切酶活化有关,并且有特殊的生化及形态学改变.近年的研究表明:凋亡在人体发育过程及在许多疾病,如恶性肿瘤、自身免疫及感染性疾病中起重要作用[1],睾丸中也有同样的过程[2,3].发育早期生殖细胞不断增殖,在发育过程中由于选择性凋亡而使生殖细胞有所限制.睾丸生殖细胞的凋亡作用作为一个重要的生理机制限制着生精上皮内生殖细胞的数量[2].
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硝酸羟胺对雄性小鼠生殖细胞和精子影响的初步研究
背景与目的:探讨不同剂量的硝酸羟胺对小鼠睾丸生殖细胞微核、精子畸形以及睾丸生殖细胞DNA的影响.材料与方法:小鼠腹腔注射不同浓度的硝酸羟胺溶液,小鼠生殖细胞微核试验连续4 d染毒,第5 d取双侧睾丸;小鼠精子畸形试验、睾丸生殖细胞DNA流式细胞仪分析连续5 d染毒,染毒后28 d取双侧附睾、睾丸,计数小鼠精子畸形率及生殖细胞DNA分布情况,评价硝酸羟胺对小鼠的生殖毒性作用.结果:腹腔注射硝酸羟胺实验组生殖细胞微核率、精子畸形率与对照组相比差异均有显著性;睾丸生殖细胞流式仪分析中,在高剂量组圆形、长形精子细胞DNA百分率与对照组相比差异有显著性.结论:小鼠腹腔注射硝酸羟胺对雄性小鼠生殖细胞和精子有损害作用.