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丙型病毒性肝炎病毒感染实验诊断技术及方法学概述
丙型病毒性肝炎(丙肝)病毒感染呈世界性传播,严重威胁人类健康.预防和控制丙肝传播的重要手段之一是临床早期明确诊断,及时抗病毒治疗.临床常用的实验诊断血清标志物主要有HCV-Ab、HCV-Ag,以及HCV-RNA定性/定量、HCV-基因型及基因亚型的检测.本文介绍了丙肝病毒感染的实验诊断技术及方法学(包括ELISA、RIBA、CHA、DIFA、real-time PCR和RT-LAMP)研究的现况,希望能够为丙肝的临床诊断、疾病监测及其流行病学调查有所裨益.
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结核性胸膜炎的临床特征及诊断技术分析
目的 了解结核性胸膜炎的临床特征,分析该疾病的诊断和鉴别诊断技术.方法 回顾性分析首都医科大学附属北京胸科医院2015年1月1日至2016年12月31日经临床诊断的486例活动性结核性胸膜炎患者的临床和实验室资料,其中男353例,女133例,年龄14～98岁(中位年龄36岁).结果 486例患者中,结核性渗出性胸膜炎约占93.6％ (455/486),结核性脓胸占6.4％(31/486);结核性渗出性胸膜炎多见于18～44岁青年组,占55.3％(269/486).89.5％(435/486)的患者表现为单侧胸腔积液,64.4％(313/486)并发肺结核;结核性胸膜炎常见的临床症状依次是咳嗽、发热和呼吸困难,分别占65.4％(318/486)、65.0％(316/486)和54.9％(267/486).结核性渗出性胸膜炎患者中,红细胞沉降率增快者占72.9％(310/425);有52.7％(240/455)的患者通过X线胸部摄影检查能够发现肺部病变,CT检查发现肺部病变的比率为64.0％(291/455).临床常用的诊断方法中阳性率高的为胸腔积液和外周血γ干扰素释放试验(IGRA),分别为94.2％(163/173)和89.2％(362/406);其次为胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA),≥40U/L的阳性率为72.6％(321/442);胸腔积液和血清抗结核抗体阳性率分别为32.8％(86/262)和37.8％(138/365);胸腔积液Xpert MTB/RIF阳性率为15.4％(38/246).结论 结核性胸膜炎以青年男性、单侧渗出性淋巴细胞胸腔积液为主,且多并发同侧或双侧肺结核,胸腔积液IGRAs阳性率高,ADA≥40 U/L有一定的诊断提示意义.但仍需结合临床和实验室多种资料进行综合诊断.
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常用实验室技术诊断结核性脑膜炎效能的比较研究
目的 对常用实验室技术诊断结核性脑膜炎(tuberculous meningitis,TBM)的效能进行比较研究,以提高临床早期诊断TBM的水平.方法 采用BACTEC MGIT 960液体培养(简称“MGIT 960法”)、改良抗酸染色(简称“MZN法”)、GeneXpert MTB/RIF(简称“GeneXpert法”)、荧光探针法聚合酶链式反应(简称“PCR-荧光探针法”)和结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)等5种实验室检测技术对西安市胸科医院2017年1月至2018年4月期间收治的244例成年疑似结核性脑膜炎患者脑脊液进行检测.包括71例TBM组患者(确诊组36例,很有可能组23例,可能组12例)及33例非TBM组患者.评价上述5种实验室技术诊断TBM的效能,并探讨细菌学方法组(MGIT 960和MZN法)、分子生物学方法组(GeneXpert和PCR-荧光探针法)、免疫学方法组(T-SPOT.TB),以及上述5种技术联合诊断组(简称“联合诊断组”)在TBM早期诊断中的价值,并比较5种实验室技术之间、4种方法 组之间诊断TBM敏感度的差异.结果 以临床诊断为标准,5种检测技术诊断TBM的特异度和阳性预测值均为100.0％;MGIT 960法、MZN法、GeneXpert法、PCR-荧光探针法和T-SPOT.TB检测技术诊断TBM的敏感度分别为19.7％(14/71)、26.8％(19/71)、42.3％(30/71)、35.2％(25/71)、29.6％(21/71);GeneXpert法和PCR-荧光探针法的敏感度均高于MGIT 960法,差异均有统计学意义(x2=8.43,P=0.004;x2 =4.28,P=0.039).细菌学方法组、分子生物学方法组、免疫学方法组及联合诊断组的敏感度分别为31.0％(22/71)、50.7％(36/71)、29.6％(21/71)、73.2％(52/71);分子生物学方法组和联合诊断组的敏感度高于细菌学方法组,差异均有统计学意义(x2=5.71,P=0.017;x2=73.20,P=0.000).结论 在TBM的早期诊断中,GeneXpert法与PCR-荧光探针法的敏感度高于MGIT 960法;各实验方法联合检测有助于提高诊断TBM的敏感度,并且与细菌学方法组相比,分子生物学方法组以及联合诊断组的敏感度更高.
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全自动智能染色机对临床微生物标本染色性能的评估
目的 评估全自动智能染色机在临床微生物标本革兰染色、萋-尼抗酸染色和荧光抗酸染色方面的染色性能.方法 收集不同类型临床微生物标本103份,依据不同的染色需求予以革兰染色、萋-尼抗酸染色和荧光抗酸染色,同时进行手工法和全自动智能染色机染色操作,以手工法染色结果为参照,从染色结果一致率、染色效率、易操作性及安全性等方面评估全自动智能染色机的染色性能.结果 全自动智能染色机在不同类型临床微生物标本染色方面总体效果好,其对临床微生物标本的革兰染色[100％ (58/58)]、萋-尼抗酸染色[100％ (45/45)]和荧光抗酸染色[100％ (45/45)]效果与手工法染色结果一致,且全自动智能染色机较手工染色法具有高通量、省时省力、易操作、稳定性好、无污染等优点.结论 全自动智能染色机对临床微生物标本具有良好的染色性能.
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单纯结核性胸膜炎与合并尘肺时多项检测指标的差异性分析
目 的观察单纯性结核性胸膜炎与合并尘肺时多项检测指标的差异,为临床诊断治疗提供一定帮助.方法 回顾性分析北京京煤集团总医院尘肺与结核病科2010 2013年65例“煤工尘肺合并结核性胸膜炎”患者(简称“尘肺结核组”)及44例单纯性结核性胸膜炎患者(简称“单纯结核组”),以胸腔积液腺苷脱氨酶(ADA)、胸腔积液ADA/血ADA比值、胸腔积液乳酸脱氢酶(LDH)、胸腔积液LDH/血LDH比值、胸腔积液C反应蛋白(CRP);胸腔积液结核抗体(TBAb)、病程长短来测定各指标的阳性率及检测结果.采用SPSS 13.0统计软件进行统计分析.计量芃料两组之间比较,在方差齐性时采用两独立样本t检验,方差不齐时采用t '检验分析;计数资料采取x2检验.以P＜0.05为差异有统计学意义.结果 (1)尘肺-结核组和单纯结核组ADA、LDH、TBAb检测阳性率及胸腔积液ADA/血ADA、胸腔积液LDH/血LDH比值阳性率分别为:35.4％ (23/65)、59.1％(26/44);46.2％(30/65)、70.5％(31/44);16.9％(11/65)、40.9％(18/44);72.3％(47/65)、93.2％(41/44);76.9％(50/65)、95.5％(42/44).差异均有统计学意义(x2值分别为4.99,5.34,6.55,6.07,5.51,P值均＜0.05).CRP阳性率两组分别为18.5％(12/65)、34.1％(15/44),两组比较差异无统计学意义(x2=2.52,P＞0.05).(2)尘肺-结核组和单纯结核组ADA、LDH、病程检测结果,以及胸腔积液ADA/血ADA、胸腔积液LDH/血LDH比值检测结果分别为:(33.52±20.34)、(42.5±18.39)U/L;(132±77.66)、(199±80.99)U/L;(6.58±4.53)、(4.0±2.31)个月;0.94±0.38、1.41±0.42;0.86±0.55、1.25±0.16.差异均有统计学意义(t值分别为2.36,4.34,3.48,5.17,4.56,P值均＜0.05).CRP两组检测结果分别为(23.9±15.84) mg/L、(25.8±16.85) mg/L,差异无统计学意义(t=0.60,P＞0.05).结论 尘肺-结核组患者中胸腔积液ADA、LDH、TBAb、胸腔积液ADA/血ADA、胸腔积液LDH/血LDH多种指标检测结果低于单纯结核组患者,而病程高于后者,各指标的联合观察结果可能能起到临床辅助诊断作用.
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交叉引物恒温扩增检测技术在疑似肺结核患者临床诊断中的价值
目的 评估交叉引物恒温扩增(cross priming amplification,CPA)检测技术在肺结核早期临床诊断中的应用价值.方法 以2016年1-10月广东省佛山市和江门市及所辖7个县(区)级结核病防治机构(简称“结防机构”)就诊的初诊疑似肺结核患者为研究对象,共纳入患者6507例;所有患者均进行了胸部影像学检查并送检痰标本进行涂片镜检、固体培养和CPA检测,培养阳性菌株进行菌种鉴定,项目点临床医生结合实验室和临床检查结果对纳入患者进行初诊诊断,国家级临床专家对初诊临床诊断结果进行现场复核.分析项目地区确诊活动性肺结核患者中病原学阳性患者所占比例,并与专家复核后的临床诊断结果进行比较,分析涂片镜检、固体培养和CPA诊断肺结核的敏感度及特异度.结果 6507例疑似肺结核患者中,涂片镜检、固体培养和CPA检测阳性率分别为18.2％(1187/6507)、25.0％(1629/6507)和23.9％(1555/6507).3199例临床确诊为活动性肺结核患者中,涂片联合培养阳性检出率为48.5％(1550/3199),涂片联合CPA阳性检出率为47.9％(1531/3199),涂片、培养和CPA三种方法联合检测阳性率为54.4％(1740/3199).以临床诊断结果为标准,涂片镜检、固体培养和CPA检测诊断活动性肺结核的敏感度分别为35.0％(1120/3199)、46.4％(1485/3199)和44.6％(1428/3199),特异度分别为98.0％(3241/3308)、95.7％(3164/3308)和96.2％(3181/3308).结论 县(区)级结防机构可应用CPA检测技术用于疑似肺结核患者的快速诊断,多种诊断技术联合应用可显著提高活动性肺结核患者的病原学诊断阳性率.
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抗结核药物超敏反应实验室诊断方法研究进展及期望
抗结核药物超敏反应(过敏反应)的诊断仍然是结核病临床和实验室工作者的难题.药物超敏反应属于特异性免疫范畴,公认超敏反应类型分为4型.包括Ⅰ型超敏反应或通常所说的过敏反应(anaphylaxis),Ⅱ型超敏反应又称细胞溶解型(cytolytic type)或细胞毒型(cytotoxic type)超敏反应(hypersensitivity),Ⅲ型超敏反应(immune complex hypersensitivity)亦称免疫复合物病,Ⅳ型超敏反应也称延缓型超敏反应(delayed hypersensitivity).超敏反应的实验室检测方法包括:非特异性抗体检测、相关细胞因子检测、特异性抗药抗体检测、药物刺激淋巴细胞转化试验、特异性浆细胞检测、特异性T淋巴细胞检测、过敏相关基因检测等.期待我们充分运用现代科学技术研究成果,在抗结核药物超敏反应研究领域着手系统的、基础的及临床应用的多中心的研究,不久的将来形成新的诊断药物过敏反应实验室检查金标准.
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临床实验室仪器间比对实验探讨
目的 按照ISO15189要求对两台强生VITROS 3600化学发光分析仪上的相同项目进行比对试验,以评估检测结果的一致性.方法 分别使用两台仪器对anti-HCV的精密度,准确度进行验证试验,并对临床收集的Anti-HCV阴性10份、阳性10份和弱阳性20份血清样本共40份进行比对试验,检测结果行统计学分析.结果 两台仪器阴性和阳性质控品批内精密度变异系数分别为5％、4％、7.14％和7.23％,批间精密度分别为9.47％、7.7％和8.04％、7.6％,均小于ISO15189要求的CV(15％),两仪器准确度为100％,质控品检测结果差异无统计学意义(P＜0.05).临床样本检测结果相关性分析R2 =0.9984,具有良好的一致性.结论 两台强生VITROS 3600化学发光分析仪检测结果,一致性良好,具有可比性.
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宫颈刷涂片在宫颈阴道病变筛查中的使用评价
目的 评价使用宫颈刷取样涂片和宫颈普通刮板涂片的有效性.方法 对门诊及住院病人采用普通刮板、扫帚形宫颈刷取样,进行宫颈阴道病变对比分析.结果 宫颈普通刮板涂片满意率仅达75.5%,扫帚形宫颈刷取样涂片满意率可达90.3%.结论 采用扫帚形宫颈刷取样涂出的片,可获得丰富的宫颈管细胞,使宫颈鳞状上皮细胞病变的检出率提高,是临床宫颈病变筛查的取样好方法.
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2003～2005年临床分离细菌分布及耐药状况分析
目的 监测2003～2005年我院临床分离菌的耐药情况,以指导临床用药.方法 采用Kirby-Bauer纸片琼脂扩散法监测3年我院2 824株临床分离菌对各种抗菌药的敏感性.结果 我院耐甲氧西林金葡菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)分别占金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌的58.1%(183/315)和86.2%(607/704),无万古霉素耐药株.220株粪肠球菌和106株屎肠球菌对万古霉素耐药率分别为0.5%和0%.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)株分别占40.8%(233/571)和39.1%(99/253).铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对亚胺培南的耐药率分别为29.1%和16.0%.嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明和环丙沙星耐药率低,分别为14.1%和23.2%.结论 细菌耐药性仍是临床面临的严重问题,应加强对细菌耐药性的监测.
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早发型与晚发型重度子痫前期实验室检查结果及一般情况分析
目的 分析早发型与晚发型重度子痫前期(S-PE)实验室检查结果的差异,探讨其临床应用价值.方法 收集山东大学附属省立医院2016年3至11月收治的S-PE患者108例,参照人民卫生出版社《妇产科学》(第7版)诊断标准,以妊娠34周为界分为早发型S-PE 64例(早发组)和晚发型S-PE 44例(晚发组);选取正常妊娠妇女42名作为对照组,收集一般信息资料,并对Hb、PLT、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体、AST、ALT、尿素、肌酐、尿酸、CRP、尿蛋白等指标进行分组统计学分析,同时采用流式细胞术检测各组样本中辅助性T细胞1(Th1)、辅助性T细胞2(Th2)的比例并分析Th1 /Th2的比值,采用SPSS19.0 统计软件对各指标进行F检验及统计学分析.结果 早发组、晚发组和对照组之间孕前体重指数(29.55±4.49、30.66±5.13、26.62±3.17,F=9.829,P<0.05)、舒张压[(105.17±14.46)mmHg(1 mmHg=0.133kPa)、(99.80±12.56)mmHg、(74.36±8.42)mmHg,F=82.088,P<0.05]、Hb[(123.22±14.38)g/L、(117.03±16.48)g/L、(112.62±11.24)g/L,F=7.133,P<0.05]、尿素[(6.56±2.36)mmol/L、(4.51±1.35)mmol/L、(3.04±0.87)mmol/L,F=51.733,P<0.05]、肌酐[(68.47±18.05)μmol/L、(61.37±14.37)μmol/L、(48.54±8.73)μmol/L,F=23.737,P<0.05] 、CRP[(7.68±8.76)mg/L、(5.88±6.03)mg/L、(3.56±2.41)mg/L,F=4.735,P<0.05]、尿蛋白[(3.66±0.76)g/L、(2.20±1.05)g/L、(0.19±0.40)g/L,F=249.714,P<0.05]差异有统计学意义.流式结果显示,早发组患者Th1比例(19.83±3.04)显著高于晚发组(14.49±2.79)和对照组(11.78±1.17),而Th2比例(1.02±0.12)明显低于晚发组(1.11±0.12)和对照组(1.56±0.11),差异有统计学意义(Th1:F=135.110,P<0.05;Th2:F=293.687,P<0.05).结论实时监测S-PE患者肝肾功能、尤其是免疫功能等实验室检查指标,对评估早发型和晚发型S-PE病情及个性化治疗有指导意义,对保证母婴健康、改善母婴预后有很重要的临床价值.
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全血七种微量元素质控品的配制及评价方案探讨
目的 探讨全血七种微量元素(镁、锰、铁、铜、锌、铅、钙)质控品的实验室自配方案和性能评估.方法 以肝素钠抗凝小牛全血为基质,根据各元素目标浓度添加金属盐或标准液,经防腐、混匀分装处理后制成全血质控品,观察抗菌效果,依据CNAS-GL03评估均匀性、稳定性,依据CLSIEP14文件判断基质效应,应用效果的评估包括检测变异(CV)的比较和标准差指数(SDI)的计算.结果 自配全血元素质控品终浓度达到目标浓度,无菌实验通过,均匀性和稳定性结果表明该质控品基质均匀并至少稳定一年.另外,除铅外其他元素的基质效应可忽略,自身历史比对和室间比对的结果表明该质控品表现与商业质控品无明显差异.结论 本次全血七种元素质控品(镁、锰、铁、铜、锌、铅、钙)的配制和评估方案可行,按照该自配方案配置和评估通过的全血元素质控品可同商业质控品一样进行医学实验室元素检测的室内质控.
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艾滋病病毒感染者/艾滋病病人临床实验室检测方法研究
目的研究艾滋病病毒感染者/艾滋病病人(HIV/AIDS)临床实验室检测指标的意义.方法应用临床实验室检测方法对病毒载量、T淋巴细胞、免疫球蛋白、β2微球蛋白、淀粉酶等指标进行检测.结果 HIV/AIDS患者CD4+ T细胞数量、CD4/CD8比值与HIV抗体阴性对照相比明显减低(P<0.001;P<0.001)HIV慢性感染者CD8+ T细胞与HIV抗体阴性对照及AIDS病人相比明显升高(P<0.001;P<0.001;)HIV/AIDS患者的CD4+T淋巴细胞绝对数量与CD4百分比(r=0.789,P<0.001)及CD4/CD8比值(r=0.777,P<0.001)呈明显正相关;HIV/AIDS患者β2微球蛋白高于HIV抗体阴性对照(P<0.001).HIV/AIDS患者肝功能、肾功能、血糖、血脂、血淀粉酶与HIV抗体阴性对照相比差异无明显意义(P>0.05).结论 T淋巴细胞、病毒载量、β2微球蛋白等指标的检测对判定HIV/AIDS患者疾病程度、预后及治疗效果具有重要意义.
关键词： 人类免疫缺陷病毒 获得性免疫缺陷综合征 临床实验室技术 -
一种基于正己烷萃取系统的乳糜实验方法的建立
目的 建立一种基于正己烷萃取系统的乳糜(正己烷)实验方法.方法 取乳糜(乙醚)实验阳性的胸腔积液样本,用正己烷替代乙醚,评估方法的可行性,并寻找正己烷萃取系统的试剂与样本适体积比;对苏丹Ⅲ染色环节进行改良,建立新的乳糜(正己烷)实验和标准操作流程.选取120份人血清为模拟乳糜标本,根据甘油三酯含量不同将其分为3组:A组(TG≤1.7 mmol/L),B组(5.6
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严重急性呼吸综合征患者外周血实验室检查结果分析
目的分析严重急性呼吸综合征(SARS)患者血液学指标特点及其与组织学改变关系,为临床诊治提供依据.方法对明确诊断为SARS的67例患者外周血血细胞、血清生化等指标进行检测,对其中23例痊愈出院患者进行了各项指标的发病早期、中期和恢复期的动态观察.结果发病早期,67例患者外周血白细胞计数(WBC)在正常范围内[(4.0～10.0)×109/L]的为93%(62/67),低于4.0×109/L的为7%(5/67);淋巴细胞绝对值(LYM)多降低,低于1.5×109/L的占88%(59/67),正常计数的为12%(8/67);粒细胞分类、血红蛋白、血小板均正常;血清常规27项指标中,发病1周内血清总蛋白、胆红素、丙氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶、胆汁酸总量、胆碱酯酶、淀粉酶、肌酐、尿酸、钙、磷、镁、钾、钠、氯、二氧化碳结合力、葡萄糖、胆固醇总量、甘油三酯等20项指标均正常;白蛋白异常降低占35%(23/67);2例死亡病例尿素(urea)全部降低至2.0 mmol/L以下;心肌酶[乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBD)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)]增高,异常率分别为63%、42%、38%和22%;铁(Fe)降低,异常率为72%.与正常人群及疑似病人(后排除SARS)血清学指标相比,患者Fe的降低差异有显著性(P<0.005).结论SARS患者外周血实验室检查指标产生有意义的改变,其中在发病1周内即有变化、对临床诊治具有一定作用的指标为:LYM、Fe、urea的特异降低以及LDH、CK、α-HBD、AST的特异升高.
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个性化质量控制计划的理解与临床实践
临床实验室检测结果的准确性对患者的安全至关重要,质量控制是控制检测过程质量,保证患者安全的有效途径.随着检测系统技术的发展,质量控制的概念已经发生了变化.美国临床和实验室标准化研究院(CLSI)成立了委员会以制订实验室内基于风险管理的质量控制计划指南,采用风险管理技术制订实验室个性化质量控制计划.本文将介绍个性化质量控制计划的理解及临床实践.
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迎接质谱技术进入检验医学领域
质谱技术因具有高灵敏度、高分辨率、高准确性、检测范围宽等特性在临床诊疗中得到日益广泛地使用.质谱检测技术进入临床医学检验仍面临较多问题.借鉴国外对质谱技术的发展和管理模式,我们应该建立一套适应我国临床医学检验实验室质谱发展与管理的模式.
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儿科临床检验浅谈
成人生理生化状态相对稳定,儿童则处在快速生长发育的过程中,使得各种理化指标也在不断发生变化,这给儿科临床检验带来了巨大的挑战.此外,不同时期的儿童有着不同的疾病谱,很多疾病是儿科所特有的,这给儿科检验打开了一片新的天地.本文将就儿科检验医学的问题、特色及未来的发展做一简要的概述.
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微流控技术在临床检验中的应用
目前,临床检验正在向两种不同方向发展,一种是高度流水线化的中心实验室,一种是高度集成的便携式检测系统.后者从早期的单个项目检测,逐渐演化为基于微流控技术的集成平台,可以同时执行多个实验步骤和测试,进而形成包括生化、免疫、微生物、细胞学检测的全套微型实验体系,这些基于微流控技术的快速诊断系统将伴随我国的医改进程,下沉到基层的医疗机构甚至家庭.本文综述了目前微流控技术在临床检验领域的应用现状以及未来发展趋势.
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精准医疗、精准检验、检验精准
随着人类基因测序、生物医学分析技术的进步及大数据分析工具的出现,提出了新的精准医疗的概念.精准医疗在个体化用药、遗传病分析和疾病预测等方面的应用越来越广,并将成为今后疾病诊疗的发展趋势.然而,要实现精准医疗,首先必须做到精准检验,这一需求的不断强化才能推动检验新技术的持续发展.临床实验室是实现精准检验的载体,加强临床实验室的建设,提高实验室的管理水平,做到检验精准,才能为精准医疗提供更加可靠的依据.
