首页 > 文献资料
-
青蒿琥酯纳米脂质体对人肝癌HepG2细胞抗血管生成作用的研究
目的:探讨在青蒿琥纳米脂质体的干预下,血管内皮生长因子(VEGF)及血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)在HepG2中的表达,为肝癌的治疗提供理论依据.方法:取对数生长期HepG2细胞制成3×105/mL单细胞悬液,接种于35 cm2培养皿中培养24 h后给药,分别设生理盐水对照组、青蒿琥酯原料药组、青蒿琥酯纳米脂质体组(浓度均为μmol·L-1),药物作用24 h.采用RT-PCR法检测各处理组HepG2细胞中VEGF mRNA及VEGFR2 mRNA的表达水平；Western blotting法检测各处理组HepG2细胞中VEGF及VEGFR2的蛋白表达水平.结果:青蒿琥酯纳米脂质体组VEGF及VEGFR2 mRNA相对表达量为0.22 ±0.02,0.09 ±0.02;对照组为0.55 ±0.03,0.53 ±0.02；青蒿琥酯纳米脂质体组VEGF,VEGFR2蛋白相对表达量为0.33 ±0.06,0.25 ±0.06,对照组为0.95±0.03,0.78 ±0.03,(P＜0.05).青蒿琥酯纳米脂质体组与原料药组的VEGF及VEGFR2 mRNA表达和蛋白表达均低于对照组,且纳米脂质体组表达量低于原料药组.结论:青蒿琥酯纳米脂质体能够抑制肿瘤血管的生成达到抗肿瘤作用,且作用强于青蒿琥酯原料药,有应用于肝癌治疗的潜在价值.
关键词： 青蒿琥酯 纳米脂质体 肝癌 血管内皮生长因子 血管内皮生长因子受体2 -
齐墩果酸纳米脂质体的制备及其大鼠体内药动学
目的:制备齐墩果酸纳米脂质体,初步考察其在大鼠体内的药动学行为.方法:采用逆相蒸发法制备齐墩果酸纳米脂质体并对其进行表征,采用葡聚糖凝胶柱色谱法测定包封率.大鼠尾静脉注射齐墩果酸纳米脂质体和自制齐墩果酸溶液,以原人参二醇为内标物,采用HPLC测定不同时间血浆中齐墩果酸含量,采用PK-Solver2.0药动学软件进行非房室模型处理,并将药动学参数进行统计学分析.结果:制得的脂质体为圆形或类圆形的小囊泡,平均粒径(98.11 ±0.32) nm,包封率(81.2±1.21)％.与齐墩果酸溶液相比,齐墩果酸纳米脂质体静脉注射后,其t1/2和MRT延长,AUC0-t提高,CL_obs降低.结论:制备的齐墩果酸纳米脂质体具有较小粒径和较高包封率,显著提高了齐墩果酸的生物利用度,延长了其在体内的滞留时间.
-
白藜芦醇纳米脂质体体外释药和大鼠小肠吸收特性的研究
目的:考察白藜芦醇纳米脂质体的体外释药性质,研究小肠佳吸收部位及其吸收机制.方法:以动态透析法测定白藜芦醇纳米脂质体体外释药速率;以大鼠在体肠循环法研究白藜芦醇纳米脂质体在大鼠十二指肠、空肠、回肠及结肠中的吸收动力学特征及考察不同质量浓度(20,40,60,80 μg·mL-1)的白藜芦醇纳米脂质体在大鼠肠道的吸收行为.结果:药物的体外释放以对数正态分布方程拟合好;白藜芦醇纳米脂质体在回肠段的吸收速率常数高于其他肠段,差异具有显著性(P＜0.001).不同质量浓度的白藜芦醇纳米脂质体在小肠的吸收速率常数(ka)不具有显著性差异.结论:白藜芦醇纳米脂质体在体外释放介质中可缓慢持续释药;在小肠回肠部位吸收较好,药物质量浓度对ka无影响,吸收呈一级动力学过程,吸收机制为被动扩散.纳米脂质体作为载体可以促进白藜芦醇在小肠的吸收.
-
鬼臼毒素纳米脂质体抗肿瘤作用的研究
目的:比较鬼臼毒素纳米脂质体和鬼臼毒素混悬液抗肿瘤作用.方法:以每只0.2 mL肿瘤细胞悬液,接种于小鼠右前肢腋部皮下,24 h后将小鼠随机分组,各组分别给不同浓度的鬼臼毒素纳米脂质体、鬼臼毒素混悬液、环磷酰胺(CX)、生理盐水.环磷酰胺1次性腹腔注射,其他组每4天腹腔注射1次,共3次,停药后第12天将小鼠拉颈处死,剥取瘤块称重,计算抑瘤率.结果:鬼臼毒素纳米脂质体和鬼臼毒素混悬液在5.0mg·kg-1剂量时对小鼠肝癌H22瘤体生长有抑制作用,抑瘤率分别为52.37%和38.25%.结论:鬼臼毒素纳米脂质体和鬼臼毒素混悬液有抗肝癌作用,且相同剂量下,鬼臼毒素纳米脂质体比鬼臼毒素混悬液抑瘤效果显著.
-
纳米脂质体承载榄香烯诱导C6胶质瘤细胞凋亡的实验研究
目的 探讨纳米脂质体承载榄香烯诱导C6胶质瘤细胞凋亡的作用以及对相关基因caspase-3表达的影响.方法 以同等剂量的榄香烯-纳米脂质体、普通榄香烯和空白培养液作用于C6胶质瘤细胞,分别于0、48、72 h时通过流式细胞仪检测C6胶质瘤细胞的凋亡情况,以免疫组织化学法检测Caspase-3蛋白的表达.结果 榄香烯-纳米脂质体和普通榄香烯组细胞瘤于48 h和72 h时出现了明显的凋亡,而且其凋亡率明显高于空白对照组.榄香烯-纳米脂质体和普通榄香烯组细胞瘤48 h和72 h时出现了明显的Caspase-3蛋白表达,而且其蛋白表达率也明显高于空白对照组.结论 榄香烯具有促进C6胶质瘤细胞凋亡和Caspase-3蛋白表达的作用,经纳米脂质体承载后榄香烯的这种作用有增强的趋势.
-
光敏纳米脂质体制备及其特性研究
目的 制备聚丁二炔光敏纳米脂质体并对其特性进行研究.方法 采用反相蒸发法制备聚丁二炔纳米脂质体,原子力显微镜观察脂质体形态,激光粒度分析仪测定脂质体粒径与表面电位.结果 制备的光敏纳米脂质体形状规则,平均粒径(78.3±1.4)nm.结论 采用反相蒸发法制备的聚丁二炔纳米脂质体,达到设计要求.
-
共载STAT3siRNA与顺铂纳米脂质体逆转卵巢癌细胞株耐药的实验研究
目的 探讨共载信号转导和转录激活子3 (STAT3) siRNA与顺铂(DDP)纳米脂质体(STAT3/DDP-Lip)对耐药性SKOV3/DDP卵巢肿瘤的逆转与治疗作用.方法 采用薄膜法制备共载脂质体并测定其纳米表征,利用Western-blot及RT-PCR法检测STAT3/DDP-Lip体外对STAT3的干扰效果,通过细胞杀伤实验与裸鼠体内抑瘤实验分别评价STAT3/DDP-Lip的体内外抗肿瘤作用.结果 成功构建了共载siRNA和DDP的纳米脂质体,体外条件下STAT3/DDP-Lip处理后耐药细胞的STAT3蛋白相对表达量下降为0.225;STAT3/DDP-Lip对SKOV3耐药细胞的IC50值为3.75μg/ml,耐药逆转倍数为7.51;体内耐药卵巢癌治疗中,STAT3/DDP-Lip能显著抑制肿瘤体积[(215±122) mm3],与空白对照组[(1 316±140) mm3]比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 STAT3/DDP-Lip可以在体内外抑制DDP耐药性卵巢癌SKOV3细胞株生长.
关键词： 卵巢癌 顺铂耐药 纳米脂质体 共载 信号转导和转录激活子3 -
Survivin siRNA纳米脂质体体内抗结肠癌活性研究
目的 观察Survivin siRNA纳米脂质体对裸鼠结肠癌种植瘤Survivin基因表达以及肿瘤生长的影响.方法 利用结肠癌细胞LOVO细胞株构建动物模型,将脂质体包裹的Survivin siRNA经静脉注入裸鼠种植瘤体内,以无关siRNA为对照组,观察动物及瘤体的变化,RT-PCR法检测瘤组织Survivin mRNA水平,Western blot法检测瘤组织survivin蛋白表达情况.结果 Survivin siRNA注射组(SU-Ⅳ组)在注射10剂后肿瘤体积较对照组明显缩小,差异有显著性(P＜0.05).SU-Ⅳ组Survivin mRNA及蛋白表达水平低于对照组(P ＜0.O01).结论 Srvivin siRNA纳米脂质体能抑制裸鼠结肠癌种植瘤的生长,注射Survivin siRNA纳米脂质体后肿瘤组织Survivin mRNA及蛋白表达下调.
-
β-榄香烯纳米脂质体对乳腺癌4T1细胞靶向治疗研究
目的 乳腺癌是女性常见的恶性肿瘤之一,是严重影响妇女身心健康甚至危及生命的恶性肿瘤之一.本研究制备叶酸修饰的p-榄香烯(β-elemene)纳米脂质体,研究其对乳腺癌4T1细胞体内体外的靶向治疗效果.方法 通过薄膜蒸发法制备叶酸修饰的β-榄香烯纳米脂质体,使用透射电镜观察形貌,利用纳米粒度仪表征纳米脂质体的粒径分布.异硫氰酸酯(fluorescein isothiocyanate,FITC)修饰纳米脂质体后,用共聚焦显微镜观察叶酸修饰的β-榄香烯纳米脂质体对乳腺癌4T1细胞的靶向性,并采用细胞活性试剂盒检测β-榄香烯纳米脂质体对细胞活性的影响.构建4T1皮下肿瘤模型,尾静脉注射叶酸修饰的p-榄香烯纳米脂质体,通过监测肿瘤大小来反映叶酸修饰的β-榄香烯纳米脂质体的在体肿瘤治疗效果.结果 叶酸修饰的p-榄香烯纳米脂质体为103.6 nm左右的圆球形颗粒,β-榄香烯纳米脂质体和叶酸修饰的p-榄香烯纳米脂质体的细胞摄取率分别为(21.6±3.6)％和(76.9±3.1)％.叶酸修饰的β-榄香烯纳米脂质体的细胞摄取率与p-榄香烯纳米脂质体相比差异有统计学意义,t=26.023,P＜0.001.80 μg/mL的叶酸修饰的β-榄香烯纳米脂质体引起的4T1细胞活性为(38.5±2.7)％,优于同浓度的β-榄香烯细胞活性(53.9±4.2)％,P=0.003.叶酸修饰的β-榄香烯纳米脂质体组与β-榄香烯纳米脂质体组、β-榄香烯组和对照组相比,差异均有统计学意义,均P＜0.001.结论 叶酸修饰的p-榄香烯纳米脂质体体内体外表现了优异的4T1细胞靶向性,同时具有显著的体内体外肿瘤抑制作用.
-
131I-RGD-BSA-PCL用于非小细胞肺癌荷瘤裸鼠SPECT/CT显像及抑瘤作用
目的 探讨131I-RGD-BSA-PCL核素纳米载体对非小细胞肺癌荷瘤裸鼠模型SPECT/CT显像效果及其对肿瘤的抑制作用.方法 构建纳米脂质体131Iq-RGD-BSA-PCL及131I-BSA-PCL,通过荧光共聚焦显微镜观察该载体在非小细胞肺癌细胞系H460的靶向性结合及细胞摄取情况;采用氯氨T法标记核素纳米载体;流式细胞术观察核素纳米载体对肿瘤细胞的杀伤作用.构建荷瘤裸鼠模型,研究核素纳米载体在荷瘤裸鼠体内的组织分布、肿瘤体积变化及各组荷瘤裸鼠SPECT/CT断层显像.结果 给药后1和8h,H460细胞质和细胞核对RGD-BSA-PCL、BSA-PCL两种纳米载体均有明显摄取.Na131I、131I-BSA-PCL及131I-RGD-BSA-PCL对H460细胞的早期凋亡率分别为(33.3±12.5)％、(68.4±8.0)％和(70.5±12.2)％.荷瘤裸鼠体内实验中,给药后24和72 h,肿瘤131I-RGD-BSA-PCL摄取率均高于131I-BSA-PCL(=9.53、5.03,P＜0.01).给药后23 d,131I-RGD-BSA-PCL肿瘤体积抑制明显(t=126.44,P＜0.01).SPECT/CT显示,给药后21 d,131I-RGD-BSA-PCL在肿瘤内信号强度明显强于131I-BSA-PCL.结论 131I标记的纳米脂质体131I-RGD-BSA-PCL对H460细胞裸鼠移植瘤具有明显的抑瘤作用,且131I-RGD-BSA-PCL能较长时间停留在肿瘤中.
关键词： 放射性碘 精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD) 纳米脂质体 非小细胞肺癌 -
131I标记纳米脂质体靶向治疗结肠癌的实验研究
目的 研究131I-antiEGFR-BSA-PCL对LS180细胞结肠癌裸鼠移植瘤内照射的治疗效果.方法 构建抗表皮生长因子受体(EGFR)标记的纳米脂质体及EGFR靶向性.通过荧光共聚焦显微镜、细胞摄碘实验观察纳米载体的靶向性及LS180细胞对其摄取情况.将裸鼠40只按随机数字表法分为4组,通过瘤体内注射的方式向移植瘤内分别注射74 MBq (740 MBq/ml)1 31I-antiEGFR-BSA-PCL、131I-BSA-PCL 、131I及相同体积的生理盐水.通过研究裸鼠体重、肿瘤体积、SPECT显像及组织病理学方法,观察纳米脂质体的抑瘤效果.结果 共聚焦实验显示,与BSA-PCL组相比,antiEGFR-BSA-PCL组细胞内绿色荧光较明显,其介导的胞吞效应显著.摄碘率实验中,LS180细胞对131I-antiEGFR-BSA-PCL的摄取率明显高于1 31I-BSA-PCL(t=2.77 ～ 5.40,P＜0.01).1 31I-antiEGFR-BSA-PCL组与131I-BSA-PCL组裸鼠肿瘤增殖均较慢,二者差异无统计学意义(P＞0.05).给药后72 h,131I-antiEGFR-BSA-PCL与131I-BSA-PCL的肿瘤摄取率分别为(21.61±1.01)和(20.58±0.65)％ID/g,均明显高于131I组(t=9.36、8.69,P＜0.01). SPECT显像显示纳米脂质体主要特异性积聚在肿瘤区.结论 131I-antiEGFR-BSA-PCL对LS180结肠癌裸鼠移植瘤有明显的抑制作用.
-
灯盏花素纳米脂质体包封率测定方法研究
灯盏花素(breviscapine)是菊科植物短葶飞蓬(Erigeron breviscapus(vant.)Hand-Mazz)中提取的黄酮类有效成分.临床多用于治疗脑梗死、脑血栓、脑出血等.将药物制成脂质体,能帮助药物进入脑部,提高治疗指数[1].灯盏花素水溶性较差,直接溶于注射用水有一定困难,将其制成脂质体可以解决其难溶问题,提高药物稳定性及载药量,同时提高药物的靶向性及疗效.包封率是脂质体质量评定的重要指标,本实验建立了灯盏花素纳米脂质体包封率的测定方法,该法操作简单、可行、准确性较好.
-
紫杉醇纳米脂质体的制备与大鼠体内药动学
目的:制备紫杉醇新型纳米脂质体并研究其在大鼠体内的药动学.方法:采用薄膜分散超声结合冷冻干燥制备紫杉醇纳米脂质体.大鼠尾静脉注射紫杉醇脂质体及市售紫杉醇注射液Anzatax,血浆样品经乙醚提取后用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)检测血浆紫杉醇浓度,并用3P87软件包估算药动学参数.色谱条件如下:色谱柱为Gemini ODS(150mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.035 mol·L-1乙酸铵缓冲液(pH 5.0)-乙腈(45∶50),流速1.0 mL·min,检测波长230 nm,地西泮为内标.结果:制备的紫杉醇纳米脂质体的体积权重粒径为(54.1±26.0)nm,包封率大于80%,符合药典规定,且24 h内与葡萄糖注射液配伍稳定.紫杉醇脂质体及市售紫杉醇注射液Anzatax经大鼠尾静脉注射后均符合二室模型,脂质体组的消除半衰期(t1/2β)显著长于Anzatax组[(3.38±0.39)Vs.(2.49±0.63)h,P＜0.05];其他药动学参数经方差分析均无显著性差异.紫杉醇脂质体与Anzatax的AUC0-8h比值为88.13%.结论:制备的紫杉醇纳米脂质体在大鼠体内的药动物参数与市售紫杉醇注射液Anzatax比较,t1/2β稍有延长,AUC0-8h值相近.
-
利用叔丁醇-水共溶剂体系跨膜梯度法制备盐酸阿霉素纳米脂质体
目的:利用叔丁醇-水共溶剂体系跨膜梯度法制备盐酸阿霉素纳米脂质体,并考察其理化性质和体外释药特性.方法:采用叔丁醇-水共溶剂体系冻干法制备空白纳米脂质体,采用跨膜梯度法制备盐酸阿霉素脂质体.紫外分光光度法测定药物含量,单因素考察法优选处方,动态膜透析法测定脂质体体外释药特性.结果:佳处方工艺如下:叔丁醇-水比例为50∶50,pH 4的柠檬酸缓冲液为水化介质,磷脂、胆固醇比例8∶1,孵化时间1h,孵化温度50℃,药脂比为1∶10.佳处方制备的脂质体平均包封率为(91.37±0.55)％(n=3),平均粒径为269 nm.结论:使用本方法制备盐酸阿霉素脂质体粒径小而均匀,包封率高,工艺简单可行.
-
槐定碱纳米脂质体在大鼠体内药代动力学及组织分布研究
目的:研究槐定碱纳米脂质体静脉给药后在大鼠体内药代动力学及组织分布.方法:大鼠尾静脉注射给药后,采用HPLC法测定血浆药物浓度,比较盐酸槐定碱注射液、槐定碱纳米脂质体的药代动力学；另HPLC法测定各组大鼠心脏、肝、脾、肺、肾中4h内的槐定碱浓度,分析药物组织分布情况.结果:槐定碱纳米脂质体的大鼠药时曲线AUC是普通注射液的2.42倍,体内滞留时间延长；各组织中槐定碱浓度均在0.5h达高后开始降低；与槐定碱注射液比较,静脉注射槐定碱纳米脂质体后4h内的平均浓度在肝、脾中均升高,在其他组织中的浓度均降低.结论:槐定碱纳米脂质体能提高药物在肝、脾中的分布,具有肝、脾靶向性,尤其是肝靶向性.
-
羟基喜树碱pH敏感阳离子纳米脂质体的制备
目的 以羟基喜树碱作为模型药物研究pH敏感阳离子纳米脂质体用于包载抗癌药物的制备工艺.方法 采用薄膜分散法制备羟基喜树碱阳离子脂质体;用羧甲基壳聚糖物理修饰阳离子脂质体;用葡聚糖凝胶柱色谱法分离游离药物;用紫外分光光度法测定包封率;用单一因素考察法优选处方;经高压乳匀得到纳米脂质体(粒径小于100 nm);用激光粒度分析仪测定Zeta电位、粒径大小.结果 佳处方制备的药物平均包封率为(78.5±0.9)%(n=3);包衣纳米脂质体的Zeta电位为-31.3 mV,平均粒径为96 nm.结论 使用本方法制备pH敏感阳离子纳米脂质体工艺简单,有望获得高靶向性的抗癌药物传递系统.
-
羟基喜树碱包衣纳米脂质体在小鼠体内的抗肿瘤活性研究
目的 比较羟基喜树碱(HCPT)氯化壳聚糖包衣纳米脂质体与HCPT注射液、HCPT脂质体、HCPT纳米脂质体在小鼠体内的抗肿瘤活性.方法 采用动物移植性肿瘤的瘤重实验法,用小鼠艾氏腹水瘤癌细胞接种于小鼠右侧背部皮下形成实体瘤.以5 mg·kg-1HCPT的剂量给药,考察不同制剂对实体瘤的瘤重抑制率及肿瘤坏死范围.结果 HCPT包衣纳米脂质体给药组的瘤重抑制率及肿瘤坏死范围均显著高于其他几种制剂给药组(P＜0.05).结论 同HCPT注射液、HCPT脂质体及HCPT纳米脂质体相比,HCPT包衣纳米脂质体的抗肿瘤活性有显著提高.
-
羟基喜树碱包衣纳米脂质体的制备及在小鼠体内组织分布的研究
目的研究羟基喜树碱(HCPT)氯化壳聚糖(CS-HCl)包衣纳米脂质体(nanoliposomes)的制备方法,并考察其在小鼠体内的组织分布.方法采用薄膜分散法制备HCPT脂质体,用CS-HCl包衣后乳匀,得到CS-HCl包衣的HCPT纳米脂质体(平均粒径＜100nm).除去游离HCPT后,测定其包封率(EE%)、平均粒径、粒径分布及Zeta电位.以5 mg·kg-1羟基喜树碱的剂量小鼠尾静脉注射HCPT注射液、普通HCPT脂质体、HCPT纳米脂质体、包衣HCPT纳米脂质体,测定血浆及肝、脾组织中的血药浓度.结果包衣HCPT纳米脂质体的EE%为(61.2±1.20)%,平均粒径为(91.9±8.78)nm,Zeta电位为(55.1±1.04)mV(n=3).包衣HCPT纳米脂质体在血液中AUC0～48为HCPT纳米脂质体的1.3倍,为普通HCPT脂质体的4.7倍,为注射液的25.4倍.AUCplasma/AUCRES表明,包衣HCPT纳米脂质体为HCPT纳米脂质体的1.4倍,为普通脂质体的8.7倍,为注射液的3.4倍.结论该包衣HCPT纳米脂质体具有大小均匀,带有较大正电荷,能显著延长药物在血液循环中的时间,减少RES对脂质体的吞噬作用等特点.
-
产朊假丝酵母尿酸酶纳米脂质体的研制及其理化性质
目的 研制产朊假丝酵母尿酸酶纳米脂质体(nanoliposomes containing uricase from candida utilis,UCCNLs)并对其理化性质和体外活性进行评价.方法 采用逆向蒸发法制备UCCNLs,以包封率、小多分散指数、粒径等为评价指标优化制备工艺.考察体外降尿酸活性.考察4,25℃纳米粒的稳定性.结果 醚水比为3:1,脂醇比为1:1,投药量为2mg时,UCCNLs的平均包封率为64.24％,平均粒径为206.73nm,多分散系数为0.247,Zeta电位为- 37.33 mV.将尿酸从0.595 mmol·L-1降至正常水平UCCNLs所需时间约为游离酶的一半.UCCNLs在4℃时具有良好的稳定性.结论 采用逆向蒸发法可制备UCCNLs,工艺简便,包封率高,稳定性较好,体外降尿酸效果好.
-
尼莫地平纳米脂质体冻干粉的质量评价方法
目的研究尼莫地平纳米脂质体冻干粉的性质,建立其质量评价方法.方法考察处方的粒径分布、Zeta电位、溶血性、沉降稳定性,用反透析法测其包封率、脂质体的血浆稳定性,观察其基本形态.结果尼莫地平纳米脂质体的平均粒径为24.8nm,多分散系数为0.326,包封率为86.1%,体外稳定性好,人血浆稳定期约为1 h.结论上述方法适用于尼莫地平纳米脂质体冻干粉的质量评价,可有效地反映其各方面的性质.
