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  • 乙酰肝素酶在人类自然流产过程中的作用研究

    作者:穆雅琴;刘润花;朱壮彦;王健;李拴明;王艳红;赵富玺

    目的:研究乙酰肝素酶(HPSE)与人类自然流产的关系以及在妊娠中的作用.方法:采用反转录PCR和Western Blot检测正常妊娠者和早期自然流产者流产绒毛组织中HPSE mRNA和蛋白的表达.结果:反转录PCR实验结果显示,正常妊娠组的HPSE mRNA阳性表达比例(12/15)高于自然流产组(9/20),(r=4.375,P=0.036);West-ern Blot正常妊娠组的HPSE蛋白的阳性表达比例(11/15)高于自然流产组(7/20),(x2=5.042,P=0.025).结论:HPSE参与正常妊娠过程,自然流产的发生可能与HPSE的低表达有关.

  • 胃肠间质瘤组织中Hpa表达与螺旋CT征象的相关性研究

    作者:张建伟

    胃肠道间质瘤(gastrointestinal stromal tumor,GIST)是胃肠道除平滑肌肿瘤、神经鞘瘤及神经纤维瘤以外的间叶源性肿瘤.螺旋CT可以在较多征象上检测胃间质瘤的恶性程度,对临床早期诊断和治疗以及评价预后具有重要的指导价值;乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)在肿瘤细胞侵袭中起着极其重要的作用,与肿瘤转移之间的关系也日益受到关注,有关Hpa与肿瘤关系报道较多,但在GIST中报道尚少见.

  • 口腔鳞状细胞癌组织中细胞角蛋白19、乙酰肝素酶的表达及检测意义

    作者:刘艳华

    目的 研究口腔鳞状细胞癌组织中细胞角蛋白19(cytokerantin-19,ck19)、乙酰肝素酶(heparinase,HPA)的表达及其检测价值,为临床治疗提供数据参考.方法 选取2013年1月至2014年1月期间在我院接受治疗的52例口腔鳞状细胞癌患者为研究对象,详细记录每位患者的各项资料,采集标本、检测ck19以及HPA的表达情况,分析其检测意义.结果 HPA的水平与患者年龄、性别无显著关系,与患者TNM分期、组织学分级、淋巴结是否转移明显相关;ck19的表达与患者的年龄、性别无关,与TNM分期以及组织学的分化存在明显的关联,P<0.05;HPA诊断的灵敏度为94.0% (47/50),特异度为50% (1/2),ck19诊断的灵敏度为91.3%(42/46),特异度为33.3% (2/6),对比两组结果,差异无统计学意义,P>0.05.结论 ck19、HPA的表达与患者口腔鳞状细胞癌的发展有着明显的相关性,能够作为潜在的诊断标志物,具有较高的诊断价值.

  • 低氧通过HIF-1α上调卵巢癌细胞系SKOV3中HPA的表达

    作者:袁彩霞;顾双;张淑红;张向宁

    目的 探讨低氧条件下卵巢癌细胞株SKOV3中低氧诱导因子-1α(HIF-1α),乙酰肝素酶(HPA)的表达变化及相互作用关系.方法 分组孵育细胞株,用免疫细胞化学定性检测HPA蛋白,Western-blot和RT-PCR检测HIF-1α、HPA蛋白和mRNA.结果 HPA蛋白定位于胞质.低氧12~36 h HIF-1α蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),而mRNA变化不明显,HIF-1α抑制剂雷帕霉素可抑制蛋白表达水平.在低氧后各时间点HPA蛋白及mRNA表达均升高(P<0.05),雷帕霉素显著抑制HPA蛋白及mRNA表达.结论 低氧可依赖HIF-1α途径增强HPA的表达,进而促进肿瘤的浸润转移.

  • TNF-α及IL-1β促进肝癌细胞系SMMC-7721乙酰肝素酶表达

    作者:王顺祥;高峰;吴晓慧;宋西进;李建坤

    目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)对人肝癌细胞系乙酰肝素酶(HPA)表达的影响.方法 将肝癌细胞系SMMC-7721分为对照组和试验组.对照组细胞常规培养,试验组细胞分别施加TNF-α、IL-1β干预,设浓度梯度和时间梯度.RT-PCR半定量法测定细胞HPA mRNA含量,Western blot法测定细胞胞质HPA蛋白含量.结果 不同浓度的TNF-α和IL-1β作用不同时间后,SMMC-7721细胞 HPA mRNA表达较对照组逐渐增高,且在TNF-α浓度为104~106U/L、IL-1β浓度为0.5~5.0μg/L范围内存在浓度依赖性(P<0.05),无时间依赖性.不同浓度的TNF-α、IL-1β作用不同时间对SMMC-7721细胞胞质HPA蛋白表达亦有促进作用,其随药物浓度变化的趋势与HPA mRNA的表达结果一致,且该促进作用存在时间性差异(P<0.05).结论 TNF-α及IL-1β能够在核酸和蛋白水平上促进肝癌细胞HPA的表达.

  • 乙酰肝素酶反义硫代寡脱氧核苷酸对人肝癌细胞系侵袭力的抑制作用

    作者:王顺祥;吴晓慧;周少英;彭利

    目的探讨乙酰肝素酶反义硫代寡脱氧核苷酸对人肝癌细胞系侵袭力的抑制作用.方法设计合成互补于HPA mRNA起始密码区的硫代反义寡脱氧核苷酸AS-ODN及相应的无义对照寡脱氧核苷酸NS-ODN,以阳离子脂质体OligofectamineTM Reagent包埋后转染SMMC-7721、BEL-7402细胞.采用RT-PCR和Western-blot检测转染前后细胞HPA mRNA及蛋白表达的变化,以基底膜重建实验检测SMMC-7721、BEL-7402细胞侵袭力的变化.结果与正常对照组相比,AS-ODN转染组SMMC-7721、BEL-7402细胞HPA mRNA和蛋白的表达均显著下降(P<0.01,P<0.05),转染后两细胞系的侵袭力抑制率分别为55.8%和61.8%.结论HPA硫代反义寡脱氧核苷酸可通过下调HPA mRNA和蛋白的表达抑制肝癌的侵袭力.

  • 基底膜和肿瘤转移

    作者:周晋;陈奕;丁健

    基底膜是一种特化的细胞外基质,是肿瘤转移过程中必须穿越的物理屏障.基底膜的组成成分通过和细胞表面受体整合素相互作用,在调节肿瘤转移的过程中发挥了重要作用.另一方面,肿瘤细胞通过分泌基质降解酶类破坏基底膜的组织结构,同时调节细胞外基质受体整合素的表达,为穿过基底膜和在靶器官粘附、增殖创造有利条件.了解细胞和基底膜的相互作用可以为抗转移药物的研发提供新的策略.

  • 乙酰肝素酶对血管内皮细胞增殖、迁移及血管活性因子表达的影响

    作者:王静;吴婵;周睿;岑山;徐斌

    目的 检测乙酰肝素酶(HPA)过表达对血管内皮细胞增殖、迁移及血管活性因子表达的影响,进一步揭示HPA参与调节动脉粥样硬化斑块内血管新生过程的作用机制.方法 构建HPA基因的过表达载体,转染HUVEC细胞.利用Western blot检测HPA蛋白的过表达情况.利用CCK8法检测细胞增殖情况,细胞迁移实验检测HPA对细胞迁移能力的影响.利用Western blot检测HPA对Ang2和Tie2蛋白表达的影响.结果 构建的HPA表达载体转染HUVEC细胞后可使HPA蛋白水平明显上调.随着转染时间的增加,HPA转染组的相对增殖率可达对照组的2~3倍.HPA转染组的穿膜细胞数明显多于对照组.HPA转染组的Ang2和Tie2的蛋白表达水平高于对照组.结论 HPA过表达可提高HUVEC细胞的增殖和迁移能力,促进血管活性分子Ang2和Tie2的表达,提示HPA可能通过调控Ang2/Tie2的表达来影响易损斑块内病理性血管新生.

  • 苦参碱对人结肠癌细胞株HT-29肝转移潜能的抑制作用

    作者:朱玉森;刘敏;周国威;岳宗柱;敬长春

    目的 研究苦参碱对人结肠癌细胞株HT-29肝转移能力的影响,并探讨其机制.方法 HT-29细胞体外培养,以0、0.125、0.25、0.5 mg/ml不同浓度苦参碱进行预处理48 h后,采用半定量RTPCR检测各组培养细胞乙酰肝素酶(Heparanase,HPSE)mRNA表达的变化,应用细胞黏附实验检测细胞黏附能力的改变,Transwell小室检测体外侵袭能力的变化;建立结肠癌肝转移模型,腹腔内注射不同浓度的苦参碱,6周后,处死裸鼠,计数肝转移率和肝转移结节数.结果 与对照组比较,随着苦参碱浓度的增加,各浓度苦参碱处理组HT-29细胞HPSE mRNA的表达和细胞黏附侵袭能力均受到明显的抑制(P<O.01),各组转移率及转移鼠肝转移结节数目依次下降,差异有统计学意义(P<0.05).结论 苦参碱可以抑制结肠癌肝转移,且抑制作用呈剂量依赖性.机制可能与通过下调HT-29细胞HPSE mRNA的表达进而使结肠癌细胞黏附侵袭力降低有关.

  • 血清基质金属蛋白酶9和乙酰肝素酶及组织蛋白酶诊断卵巢癌浸润转移程度

    作者:张玮;杨幸子;王琪;阳志军;陈泓;王素梅;潘忠勉;李力

    目的 探讨检测血清组织蛋白酶L(CL)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、乙酰肝素酶(Hpa)对卵巢癌浸润转移判断的临床应用价值.方法 用酶联免疫吸附测定法(ELISA)和电化学发光免疫分析法(ECLIA)分别检测广西医科大学附属肿瘤医院2003年9月至2009年10月217例术前未治疗卵巢癌[国际妇产科联盟( FIGO)分期Ⅰ~Ⅱ期83例、Ⅲ~Ⅳ期134例]、100例良性卵巢肿瘤患者(良性卵巢肿瘤组)和101名健康妇女(健康对照组)外周血MMP-9、Hpa、CL含量;同时,对卵巢癌患者进行临床病理关联因素分析,并以卵巢上皮癌临床病理诊断为金标准,绘制受试者工作特征( ROC)曲线,以评价3项指标诊断术前卵巢癌患者浸润转移的敏感度和特异度.结果 血清中CL、MMP-9和Hpa含量在卵巢癌组分别为(21.23±8.17)、(193.95±42.49)、(7.68±2.32) μg/L,良性卵巢肿瘤组分别为(10.97±3.84)、( 143.66±28.47)、(4.86±1.37) μg/L,健康对照组分别为(5.59±1.75)、(57.99±11.42)、(2.77±0.80)μg/L,卵巢癌组与良性卵巢肿瘤组和健康对照组比较,差异有统计学意义(t值CL分别为- 13.242和- 13.498,MMP-9分别为- 14.521和-21.290,Hpa分别为-10.896和- 18.280,P均<0.001);卵巢上皮癌组血清CL含量[(21.59±8.24) μg/L]高于非卵巢上皮癌组[( 19.57±7.69) μg/L,F=11.209,P=0.048];Ⅰ~Ⅱ期组血清中CL、MMP-9和Hpa含量分别为(19.66±7.83)、(182.63±42.30)、(7.21±2.05) μg,/L,低于Ⅲ~Ⅳ期组[分别为(22.64±8.31)、(202.81±39.74)、(8.51±1.92) μg/L,F值分别为12.452、70.565、195.122,P值分别为0.030、0.002和0.000];卵巢上皮癌低分化组血清CL、MMP-9和Hpa含量分别为(23.04±7.67)、(200.12±40.82)、(8.22±1.92) μg/L,也高于高-中分化组[分别为(18.54±7.30)、(173.43±39.37)、(7.20±2.51)μg/L,F值分别为24.545、60.286、9.077,P值分别为0.004、0.035和0.001];腹腔有肿瘤浸润转移组血清CL及MMP-9含量分别为(22.96±8.41)、(200.44±43.82) μg/L,高于无腹腔浸润转移组[分别为(19.07±7.36)、(181.04±36.10) μg/L,F值分别为12.210、18.084,P值分别为0.030、0.010];有肿瘤远处转移组血清Hpa含量[(8.63±1.69) μg/L]高于无远处转移组[(7.93±2.11) μg/L,F=9.430,P =0.042].经ROC曲线分析,术前血清CL、Hpa、MMP-9含量测定诊断卵巢癌转移的敏感度分别为60.9% (70/115)、69.6% (80/115)和72.2%(83/115),特异度分别为57.4%(26/62)、67.2% (20/62)和68.9%( 19/62).结论 卵巢癌患者血清CL、MMP-9和Hpa含量增高可能与肿瘤发生进展相关,血清3项指标检测对术前判断卵巢癌浸润转移程度有一定的临床参考价值.

  • 原发性肝癌组织芯片中乙酰肝素酶的表达及意义

    作者:陈罡;党裔武;罗殿中;冯震博;唐小玲

    目的:探讨乙酰肝素酶(heparanase,HPA)蛋白在原发性肝细胞癌(HCC)组织芯片中的过度表达及临床意义.方法:125例HCC患者肝组织、48例肝癌患者癌旁组织、62例肝硬化患者肝组织及23例肝血管瘤患者相应正常肝组织构建组织微阵列.应用免疫组织化学检测HPA蛋白的表达水平,并分析其与HCC临床病理特征的关系.结果:HCC组织中的HPA蛋白的阳性率45.83%明显高于癌旁组织27.08%(χ2=2.23,P<0.05),肝硬化6.45%(χ2=5.262,P<0.05)和正常肝组织4.35%(χ2=3.895,P<0.05).癌旁组织中的HPA蛋白阳性率明显高于肝硬化(χ2=2.882,P<0.05)及正常肝组织(χ2=2.361,P<0.05);HCC中临床TNM分期ⅠⅡ期HPA阳性率明显低于ⅢⅣ期(29.41% vs 67.31%,χ2=4.111,P<0.05);HCC中无转移组HPA阳性率明显低于转移组(14.71% vs 63.33%,χ2=3.978,P<0.05);HPA表达率在AFP≥400 μg/L和AFP<400 μg/L组(52.05% vs 36.17%,χ2=2.071,P<0.05)、有无门脉癌栓组(71.74% vs 29.73%,x2=4.472,P<0.05)、多个和单个肿瘤结节组(73.91% vs 28.38%,χ2=4.847,P<0.05)以及肿瘤直径≥5 cm和<5 cm组(57.89% vs 25%,χ2=3.471,P<0.01)分别具有显著性意义.HPA表达与年龄、性别、分化程度、有无肝硬化及肿瘤包膜浸润无关.结论:HPA高表达在HCC的发生、发展及转移中起重要作用.检测HPA蛋白指标有助于HCC诊断和判断患者预后.

  • 原发性肝癌乙酰肝素酶mRNA的表达及其意义

    作者:陈晓鹏;刘颖斌;时开网;彭淑牖;彭承宏;史留斌;沈宏伟

    目的:探讨乙酰肝素酶(HPA)mRNA在肝细胞性肝癌(HCC)中的表达及其意义.方法:收集33例HCC标本,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测HCC癌及癌旁肝组织中HPA mRNA的表达,并与HCC临床病理学指标进行统计学分析.结果:33例HCC中有16例癌组织HPAmRNA表达阳性,阳性率为48.5%,显著高于癌周肝组织和对照肝组织(P<0.01).HCC癌组织HPAmRNA表达与肿瘤大小、包膜形成、AFP水平、HBsAg状态及肝硬化无关,而与肿瘤转移复发有关.高转移复发倾向组癌组织HPA表达阳性率(71.4%,10/14)显著高于低转移复发倾向组(31.6%,6/19)(P<0.05).术后随访转移复发者HPA表达阳性率(78.6%,11/14)显著高于无转移复发者(21.4%,3/14)(P<0.01).此外,HPA mRNA表达多见于分化较差(P<0.05)、TNM分期较晚(P<0.05)的患者.结论:HCC有较高的HPA mRNA表达率,HPA阳性者术后转移复发的可能性较大,可作为HCC转移活性的可靠标志之一.

  • 乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人胃腺癌SGC7901细胞Fas和FasL表达的影响

    作者:周世庆;真岩波;汪素文;张淑红;王德荣

    目的:探讨乙酰肝素酶反义寡核苷酸对人胃癌细胞株SGC7901凋亡的相关基因Fas和FasL影响.方法:胃癌细胞株SGC7901细胞由山东医科院提供.采用脂质体介导乙酰肝素酶反义寡核苷酸转染人胃癌细胞株SGC7901细胞,以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测转染后乙酰肝素酶mRNA、Fas mRNA和FasL mRNA表达的变化,采用流式细胞仪检测细胞凋亡的变化.结果:脂质体介导转染乙酰肝素酶反义寡核苷酸后,SGC7901胃癌细胞内乙酰肝素酶mRNA和FasL mRNA表达下降(分别为1.13±0.05vs0.36±0.22,t=8.37,P=0.0 001<0 01;1.11±0.24vs0.35±0.23,t=5.48,P=0.0 003<0.01),Fas mRNA表达上升(0.45±0.23vs1.02±0.02,t=6.05,P=0.0001<0 01),转染前后各组细胞凋亡率分别为4.04%,3.85%,3.38%,9.13%,16.00%,15.63%及13.32%.结论转染乙酰肝素酶反义寡核苷酸可以有效诱导胃癌细胞发生凋亡

  • 乙酰肝素酶与糖尿病肾病

    作者:赵越;安晓飞;余江毅

    乙酰肝素酶(HPSE)是一种能降解硫酸乙酰肝素(HS)的内-β-D-葡糖醛酸苷酶.因其可促进肿瘤转移和血管生成而受到肿瘤研究领域广泛关注.近研究提示HPSE与糖尿病肾病(DN)蛋白尿的发生关系密切[1].现将HPSE与DN之间的研究进展作一综述.

  • 急性冠脉综合征患者乙酰肝素酶表达及其与冠状动脉病变严重程度的相关研究

    作者:包海梅;王蒙琴;蔺雪峰;韩轩茂

    目的 检测急性冠脉综合征患者单核细胞中乙酰肝素酶表达水平,进一步研究乙酰肝素酶在ACS中对病情严重程度的判断、预后评估中的临床意义.方法 选取2016年12月~2017年5月包头医学院第一附属医院心内科收治的住院患者86例为研究对象,均行冠状动脉造影.将患者分为对照组,实验组ACS组共86例,其中不稳定型心绞痛(UA)患者30例;急性心肌梗死(AMI)患者26例;对照组30例;应用实时定量PCR(real-Time PCR)法检测患者外周血单核细胞中乙酰肝素酶的表达水平.结果 ACS患者外周血单核细胞HPSE表达水平与冠状动脉粥样硬化病变程度呈正相关趋势.SYNTAXⅠ评分在与冠状动脉粥样硬化病变程度呈正相关趋势.结论 (1)ACS患者外周血单核细胞乙酰肝素酶表达水平与冠状动脉粥样硬化病变程度呈正相关趋势;乙酰肝素酶可能参与ACS发病.

  • 乙酰肝素酶介导心肌细胞凋亡的研究

    作者:曹洪帅;韩轩茂

    目的 研究硫酸乙酰肝素酶(HPSE)对心肌细胞缺氧/复氧损伤后细胞凋亡的影响作用.方法 体外培养H9C2心肌细胞,复制心肌细胞缺氧/复氧模型,模拟心肌缺血/再灌注损伤(MIRI).实验分为正常对照组(C组)、缺氧/复氧组(H/R组)、HPSE抑制剂处理组(OGT2115组)等三组.形态学观察细胞状态,MTT法检测H9C2心肌细胞存活率.结果 与对照组相比,H/R处理后心肌细胞存活率显著降低(P<0.05);与H/R组比较,OGT2115处理后可提高缺氧/复氧后H9C2心肌细胞存活率(P<0.05).结论 HPSE抑制剂对缺氧/复氧后H9C2心肌细胞凋亡有抑制作用,拓宽HPSE阻滞剂临床应用范围,具有重要的基础及临床意义.

  • 乙酰肝素酶与肿瘤转移

    作者:吴文澜;时开网

    乙酰肝素酶是一种糖苷内切酶,能特异性的水解位于细胞表面,细胞外基质及基底膜的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖为小分子片段.乙酰肝素酶普遍存在于恶性转移性肿瘤细胞中.乙酰肝素酶参与肿瘤血管生成,与肿瘤的侵袭、转移密切相关.本文对此进行了综述.

  • 乙酰肝素酶与蛋白尿性肾脏疾病的关系

    作者:王玉华;唐琳;刘章锁

    蛋白尿是众多肾脏疾病的主要临床表现,肾小球滤过屏障的完整性决定着对蛋白质的选择通透特性.肾小球基底膜中硫酸乙酰肝素在电荷屏障的维持中起重要作用.乙酰肝素酶作为新近克隆出来的一种内切糖苷酶,与肿瘤的转移浸润密切相关.近年来研究发现其通过选择性降解肾小球基底膜硫酸乙酰肝素侧链,也参与蛋白尿的发生.本文就其分子学特点、调控以及与蛋白尿性肾脏疾病的关系作一综述.

  • 硫酸昆布多糖在仓鼠胰腺癌肝转移模型中抑制作用的研究

    作者:刘德纯;党诚学;白纪纲;陈武科;王作仁

    目的观察硫酸昆布多糖(laminarin sulfate, LS)对仓鼠胰腺癌肝转移模型的抑制效果,阐明其抑制肿瘤机制.方法建立仓鼠胰腺癌肝转移模型,利用三种不同剂量LS对实验各组进行干预,应用昆布多糖、生理盐水作为对照组;对各组转移肿瘤重量、转移部位数、微血管密度(microvessel density,MVD)、抑瘤率进行比较.结果实验组:三组肝转移癌平均称重(g)为:3.164±0.577、3.15±0.911、2.905±1.043;肿瘤转移部位数(个)为:1.43±0.76、1.438±0.727、1.368±0.684;微血管密度(/hpf)分别为:26.143±4.47、21.186±6.327、18.474±4.903.对照组:肝转移癌平均称重为:昆布多糖组4.867±0.868,生理盐水组5.147±0.94 ;肿瘤转移部位数:昆布多糖组2.167±1.030;生理盐水组为1.89±0.99;微血管密度分别为:昆布多糖组37.583±7.077,生理盐水组34.29±7.087 .实验组抑瘤率分别为:35%、35.3%、40.3%.经统计学分析表明实验组和对照组在肿瘤重量、肿瘤转移部位数、微血管密度等指标方面均存在显著差异(P<0.01).抑瘤效果也随硫酸昆布多糖剂量增大渐增加.结论硫酸昆布多糖对肿瘤生长、转移、血管生成有明显抑制作用.

  • 乙酰肝素酶、MMP-9在胰腺癌中的联合表达及临床意义

    作者:赵江海;李丽;宋慧琴

    胰腺癌恶性度高、病情隐匿及预后差,是危害人类健康为严重的恶性肿瘤[1].基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase9,MMP-9)是一类与肿瘤发生、侵袭和转移密切相关的蛋白水解酶.研究表明MMP-9在多种肿瘤组织中的表达增加[2].笔者采用免疫组织化学方法检测胰腺癌、慢性胰腺炎和正常胰腺组织中的HPA和MMP-9的联合表达,以探讨二者在胰腺癌中的表达特点、相互关系及其临床意义.

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