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  • 多柔比星诱导乳腺癌细胞PARP-1活性上调依赖于Kif4A蛋白低表达

    作者:王辉;鲁常青;田波;李青;陈铜兵

    背景与目的:化疗作为乳腺癌术后治疗的重要手段,由其引发的耐药现象备受关注,而耐药的出现与DNA损伤修复异常增强密切相关。驱动蛋白家族成员4A(kinesin family member 4A,Kif4A)和聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP-1]是重要的DNA损伤修复分子。本研究探讨Kif4A在多柔比星诱导乳腺癌细胞PARP-1活性上调中的作用及意义。方法:蛋白质印迹法检测多柔比星处理后乳腺癌MDA-MB-231和MCF-7细胞Kif4A蛋白表达及PARP-1活性的变化;并检测高表达Kif4A蛋白后,乳腺癌细胞PARP-1蛋白表达及其活性变化;流式细胞技术检测多柔比星联合PARP-1抑制剂3-氨基苯酰胺(3-Aminobenzamide,3-ABA)干预后乳腺癌细胞的凋亡情况。结果:多柔比星能上调PARP-1活性并诱导乳腺癌细胞Kif4A蛋白低表达,两者都呈浓度和时间依赖性;高表达Kif4A后,PARP-1活性被明显抑制,细胞凋亡数增加,而多柔比星能部分逆转由Kif4A高表达而引起的PARP-1活性抑制。多柔比星和3-ABA都诱导乳腺癌细胞凋亡,联合使用能增加细胞凋亡,与单独使用比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结果还显示,多柔比星、PARP-1抑制剂3-ABA及高表达的Kif4A诱导的MDA-MB-231细胞凋亡数高于MCF-7细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:多柔比星诱导乳腺癌细胞PARP-1活性上调依赖于细胞Kif4A蛋白低表达,Kif4A有望成为逆转多柔比星耐药的新靶点。

  • PARP-1、P-gp和 LRP在肺腺癌中的表达和相关性研究

    作者:刘彭坤;郝吉庆

    目的:探讨聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)蛋白与P糖蛋白(P-gp)、肺耐药相关蛋白(LRP)在肺腺癌中的表达和相关性。方法采用免疫组化SP法检测61例肺腺癌组织和20例癌旁正常肺组织中PARP-1、P-gp和LRP的表达结果。结果 PARP-1、P-gp和LRP的阳性表达率分别为77.05%、50.82%、67.21%,与周围癌旁组织差异有显著性(P<0.05)。 LRP的表达与肺腺癌淋巴结转移密切相关(P<0.05),P-gp、PARP-1与临床病理特征无明显相关(P>0.05)。 P-gp与LRP、PARP-1与LRP之间呈正相关(r分别为0.525、0.269,P<0.05),P-gp与PARP-1之间无明显相关性(r=0.223,P=0.084)。结论P-gp、LRP和PARP-1在肺腺癌中的表达有一定的相关性,联合检测三者可作为判断肺腺癌恶性程度的生物学指标。

  • PARP-1对卵巢癌血管生成的影响

    作者:李燕;尉蔚;吕树卿;田永杰

    目的:观察上皮性卵巢癌中聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)表达与血管内皮生长因子-A(VEGF-A)、微血管密度( MVD)的关系,探讨PARP-1对卵巢癌血管生成的影响。方法采用免疫组织化学SP法检测60例上皮性卵巢癌原发灶中PARP-1、VEGF-A、MVD的表达以及30例正常卵巢对照组织中PARP-1的表达,根据组化结果判定标准将卵巢癌组织分为 PARP-1阳性组和PARP-1阴性组。 RNA干扰沉默卵巢癌SKOV3细胞的PARP-1基因,将细胞分为转染阴性对照siRNA组( NC-siRNA组)、转染PARP-1 siRNA组( PARP1-siRNA组),观察对脐静脉内皮细胞( HUVEC)体外成管的影响,ELISA法检测转染后细胞VEGF-A的表达水平。结果卵巢癌组织中PARP-1阳性率为73.3%(44/60),正常卵巢对照组织中 PARP-1阳性率为26.7%(8/30),差异有统计学意义(P<0.05)。 PARP-1表达与肿块大小、病理分级和淋巴结转移具有相关性;PARP-1表达与VEGF-A表达呈正相关( P<0.05);PARP-1阳性组MVD值显著高于PARP-1阴性组(P<0.01);体外成管数目NC-siRNA组(14.67±1.21)高于PARP1-siRNA组(8.83±1.47),差异有统计学意义(P <0.01);PARP1-siRNA组细胞VEGF-A的表达显著低于NC-siRNA组( P<0.01)。结论 PARP-1通过调控VEGF-A的表达影响卵巢癌的血管生成。

  • HGF/PARP-1信号通路调控卵巢癌细胞侵袭转移的作用

    作者:吕树卿;尉蔚;张灿灿;田永杰

    目的:观察聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)在肝细胞生长因子(HGF)诱导的卵巢癌细胞侵袭转移中的作用及相关信号转导通路。方法Transwell 实验检测不同浓度 HGF 对卵巢癌 SKOV-3细胞体外侵袭力的影响;实时荧光定量 PCR、Western blotting 检测不同浓度及作用时间 HGF 对 SKOV-3细胞 PARP-1mRNA 及蛋白表达的影响;RNA 干扰沉默 SKOV-3细胞的 PARP-1基因,按不同处理因素将 SKOV-3细胞分为空白对照组、HGF组、PARP-siRNA 组、HGF +PARP-siRNA 组;NC-siRNA 组、HGF +NC-siRNA 组。Western blotting 检测不同处理组细胞内 PARP-1蛋白表达。Transwell 实验检测各组细胞侵袭力。ELISA 法检测各组细胞上清中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的含量。结果HGF 可明显促进 SKOV-3细胞的体外侵袭能力,并呈浓度时间依赖性。40 ng/mL HGF 作用24 h 后,HGF 可明显上调 SKOV-3细胞中 PARP-1的表达水平;PARP-siRNA 组细胞 PARP-1的表达低于NC-siRNA组(P <0.05),干扰 PARP-1的表达降低了 HGF 对 SKOV-3细胞侵袭力及 MMP-2含量的影响。结论HGF 可促进卵巢癌 SKOV-3细胞的侵袭转移,其作用机制可能与 PARP-1介导的 MMP-2表达增加有关。

  • 血清PARP-1和Caspase-3蛋白在肝癌患者中的表达及意义

    作者:胡顺明;王笑秋;邰少丽;李晓霞

    目的 检测肝癌患者血清聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平,并探讨其在肝癌发生发展中的临床意义.方法 收集2016年8月至2017年8月在盐城市大丰人民医院的65例肝癌患者以及25例健康体检者血清样本,应用酶联免疫吸附试验法检测血清中PARP-1、Caspase-3蛋白水平,并分析肝癌患者血清PARP-1、Caspase-3蛋白水平与临床特征的相关性及对患者生存期的影响.结果 与健康人相比,肝癌患者血清PARP-1蛋白水平明显升高[(407±139)pg/mL vs(246±123)pg/mL],血清Caspase-3蛋白水平明显降低[(7.31±2.49)pg/mL vs(10.28±2.37)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05);在有转移、饮酒史和乙肝表面抗原(HBsAg)阳性的肝癌患者中,血清PARP-1蛋白水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);在有转移和HBsAg阳性的肝癌患者中,血清Caspase-3蛋白水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与血清PARP-1蛋白阴性的患者相比,PARP-1蛋白阳性的肝癌患者的总体生存期明显缩短[(18.5±6.3)个月vs(9.6±5.7)个月],差异有统计学意义(P<0.05);与血清Caspase-3蛋白阳性的患者相比,Caspase-3蛋白阴性的肝癌患者的总体生存期明显缩短[(17.9±6.5)个月vs(10.8±4.2)个月],差异有统计学意义(P<0.05);肝癌患者血清PARP-1与Caspase-3蛋白水平表达呈负相关(r=-0.369,P<0.05).结论 PARP-1和Caspase-3在肝癌的发生、发展过程中起着重要作用,两者联合检测对肝癌的早期诊断具有一定价值.

  • PARP-1与NF-κB在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及意义

    作者:王哲;李燕;吕树卿;田永杰

    目的:研究卵巢上皮性肿瘤组织中聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)、核转录因子κB(NF-κB)的表达及意义.方法:采用免疫组织化学SP法检测10例正常卵巢组织、30例卵巢良性肿瘤、30例卵巢交界性肿瘤和50例卵巢癌原发灶中的PARP-1和NF-κBp65蛋白表达.结果:①PARP-1蛋白和NF-κBp65蛋白在卵巢癌组织中阳性表达率均高于卵巢交界性肿瘤、卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织,差异均有统计学意义(P<0.05);而两者的阳性表达率在卵巢交界性肿瘤、卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织间比较,差异均无统计学意义(P>0.05).②PARP-1和NF-κBp65蛋白与卵巢癌的病理分级、临床分期和有无淋巴结转移有关(P<0.05).③卵巢癌组织中PARP-1与NF-κBp65表达呈正相关(r=0.596,P<0.05).结论:PARP-1和NF-κB在卵巢癌组织中过表达,与卵巢癌的发生、发展有关.PARP-1可能通过作用于NF-κB促进卵巢上皮性肿瘤细胞的恶性转化.

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