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重建胶原纤维对细胞生长的影响
背景:胶原种类很多,而不同细胞只在特定类型的胶原环境中才表现出佳的增殖和表型.目的:观察Ⅰ型胶原和Ⅱ型胶原对小鼠皮肤成纤维细胞、人牙周膜成纤维细胞和兔软骨细胞生长的影响.设计、时间及地点:对比观察,细胞学体外实验,于2007-09/2008-09在四川大学生物材料工程研究中心胶原研究室完成.材料:自制达到中试水平的猪皮Ⅰ型胶原和猪软骨Ⅱ型胶原.方法:分别将3种细胞在猪皮Ⅰ型胶原和猪软骨Ⅱ型胶原环境中进行体外培养,比较不同细胞在材料上的行为差异.主要观察指标:傅里叶变换红外光谱、示差扫描热分析和凝胶动力学分析比较2种胶原的热变性温度及在结构和性质上的差异;MTT法观察细胞在2种胶原环境中的黏附、增殖情况.结果:猪软骨Ⅱ型胶原和猪皮Ⅰ型股原的热变性温度分别为105.8,87.5℃,2种胶原的官能团区相似.凝胶化曲线的对比中猪皮Ⅰ型胶原的成纤维过程较猪软骨Ⅱ型胶原迅速.MTT值显示细胞生长初期,小鼠皮肤成纤维细胞在软骨Ⅱ型胶原环境表现了较好的黏附性,但是更适于在猪皮Ⅰ型胶原上生长;人牙周膜成纤维细胞与小鼠皮肤成纤维细胞对胶原纤维的反应恰好相反.兔软骨细胞第2天在两种胶原上的黏附相似,第4天时在猪软骨Ⅱ型胶原环境中表现出较大的细胞生长密度.结论:不同细胞对Ⅰ,Ⅱ型胶原纤维表现了不同的时间依赖性,但猪软骨Ⅱ型胶原环境更接近于软骨生长的真实环境,更有利于软骨细胞朝特定方向分化,使软骨细胞维持稳定的表型.
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橙油和桉树油溶剂对人牙周膜成纤维细胞增殖抑制作用的实验研究
目的:检测橙油和桉树油对人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)的增殖抑制作用.方法:通过组织块消化法获取并培养h-PDLFs,应用倒置显微镜观察细胞形态;噻唑蓝方法检测不同浓度的橙油、桉树油及氯仿(阳性对照)对细胞增殖能力的影响.结果:浓度为0.1％的橙油、桉树油及氯仿(对照)培养hPDLFs 1、6及12 h后,对其增殖能力无影响;浓度为1％的橙油、桉树油及氯仿对牙周膜成纤维细胞增殖有抑制作用,橙油抑制作用低.结论:3种有机溶剂中橙油对hPDLFs增殖的影响小.
关键词： 根管再治疗 人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs) 橙油 桉树油 -
抑制Akt/PKB信号通路促进缺氧诱导的人牙周膜成纤维细胞凋亡
目的: 研究Akt/PKB 信号通路对缺氧诱导的人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs) 凋亡的影响.方法: 用MTT 法、流式细胞术、qRT-PCR、Western blot、Lipofectamin 2000 转染技术等测定hPDLFs 在常氧和缺氧条件下的细胞增殖率、凋亡率、 Akt/PKB 信号通路和HIF-1α 的表达.结果: 与常氧条件相比,缺氧显著提高HIF-1α 的表达,抑制细胞增殖并促进其凋亡,同时抑制Akt/PKB 信号通路.在缺氧的条件下,抑制Akt/PKB 信号通路的表达能够且显著抑制hPDLFs 的增殖并促进其凋亡.结论: 抑制Akt/PKB 信号通路能促进缺氧诱导的hPDLFs 凋亡.
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三种髓腔穿孔修复材料对人牙周膜成纤维细胞黏附及形态影响的体外研究
目的：：研究3种常用髓腔穿孔修复材料对人牙周膜成纤维细胞附着、形态的影响。方法：在倒置相差显微镜下观察MTA、Z350纳米复合树脂、银汞合金对细胞形态的影响，并在扫描电镜下直接观察3种材料表面人牙周膜成纤维细胞的附着情况。结果：银汞合金对细胞形态的影响大，材料周围的无细胞带面积大(P<0.05)，材料表面黏附细胞少，大多数细胞皱缩，失去正常的细胞形态；Z350纳米复合树脂对细胞影响次之，少量细胞变圆；MTA对细胞形态的影响小(P<0.05)，与前两组相比，材料周围的无细胞带面积小，材料表面黏附细胞多，形态良好。结论：MTA 对人牙周膜成纤维细胞附着、形态影响明显小于Z350纳米复合树脂及银汞合金。
