在卫生细菌学检测中,大肠菌群快速检测纸片法(简称纸片法),因其操作简便、快速、敏感、省料、结果易判断等特点,早已被西方发达国家所采用。1980年Lukgantseve就有成功报道,随后Barlt( 1984)、Ratto(1989)、Castillo(1994)也有报道,尽管它们所用检测纸片各不相同,但均有满意的结果。我国从80年代开始研制,90年代已被广泛应用,并作为国家认可的方法,已列入国标GB14934 -940(1)原理。快检纸片法是以大肠菌群细菌生长发育时 分解乳糖产酸,同时产生脱氢酶脱氢,氢与无色氯化三苯四氮唑(TTC)作用形成红色三苯甲臜( Fonnazane)使菌落(菌苔)变红的原理,将一定量的乳糖、指示剂(TTC)、溴甲酚紫,蛋白质等吸附在特定面积的无离滤纸上,大肠菌群细菌通过上述两种指示剂显示出发酵乳糖产酸,纸片变黄和形成红色斑点(红晕)的固有特性。现行国家标准(GB14934 -94)也以此特性作为阳性结果的唯一判定标 准。(2)影响检测结果的因素酶的影响;大肠菌群菌量的影响;培养时间的影响。(3)纸片法的评价。大肠菌群纸片法具有操作简便,报告时间短(15 -18h),特异性强,敏感性高,费用较低等优点,适合各地实验室推广使用。

  Petrifilm纸片法检测大肠菌群

  (1)原理。PF试纸是一种制备完成的培养基系统,以一层亲水性的吸附物质作为培养基质,含有测试菌生长所需的营养物,还加入了染色剂、显色剂,增强了菌落的目视效果。(2)优点。PF试纸法与国标法比较,省却了繁重的准备、收尾工作;体积轻巧、便于携带;操作简单、快速省时。另外避免了热琼脂法不适宜受损细菌恢复的缺陷。在大肠菌群的检测方面,国标方法报告的是MPN值而不是每克食品中的大肠菌群数,而PF法则可以得出精确数据,但是否准确尚需进一步研究。同时PF试纸法还可区分大肠菌群中的大肠杆菌(蓝色产气)和非大肠杆菌(红色产气)。(3)PF试纸法还存在一些有待改进的问题:①PF试纸上覆 盖一层薄膜,当细菌产气、产毅液过多时会出现菌落扩散、融合的现象,影响计数。②PF试纸面积较小,当菌量大于250时,准确计数已较困难。③某些奶制品中包含的有机 物可能使显色减缓,使目视效果下降,导致计数偏低。故48h计数高于24h计数结果,实际检验应培养48h。