大局菌群主要存在于水及动物的肠道，是食品及水受粪便污染的主要细菌卫生学指标，因此大肠菌群检测是评价食品卫生质量的重要指标。大肠菌群是一群能在37'C环境下24h发酵、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽抱杆菌，主要包括四属:大肠埃希民菌属、拘橡酸杆菌属、克雷伯民菌属、肠杆菌属。食品卫生法规定:食品中不允许含有伤寒、副伤寒、沙门氏、躏疾、霍乱等消化系统病源菌，但这些致病菌却实际上不可能在各个场合中检测出来。从同源角度看，把容易检出的大肠菌群从食品中检出便意味着该食品受人畜粪便污染。因该菌主要来源于人畜粪便，所以，对大肠菌群的测定常常被作为受粪便污染程度的唯→指标，具有广泛的卫生学意义。有些血清型大肠菌经口传染人炀道后会引起婴儿腹碍。大肠菌侵入人体其它部位还会引起尿道炎、膀脱炎，有时引起输卵管炎、肾孟肾炎、胆道炎、子宫炎，并能引起产后败血症及新生儿败血症等。大肠菌群还是小儿消化不良症、胃肠障碍的→个病源学因素。我国现行检测大肠菌群的方法有国家标准方法GB4789.3-1994(三步多管发酵法)和行业标准SN0168-1992。国标法的检验程序较复杂，需经过初发酵试验→确定试验→终结试验(复发酵试验)。一般需3-4d，不适于卫生监测。如果不能及时监测食品卫生，常常使肠道传染病在夏秋季直线上升。为了积极预防肠道传染病，保护消费者的合法权益和身体健康，为了改变目前检验不能适应生产和消费的状况，许多学者研究了快速检验大肠菌群方法，如快速酶法、滤膜法、纸片法、平板法等。本文就国内外的一些快速检验大肠菌群方法的研究现状做一综述。

　　1快速酶法

　　1978年Warren率先研究检测半乳糖苦酶(β-GA-LA)，作为快速检测大肠菌群的手段，而后Mobery1985)，Berg(1988)，edberrg(1990)都研究了酶检测技术。美国公共卫生协会(1989)编《水与废水检查标准方法》一书中，规定β-GALA和氧化酶(oxidase)的检测为快速确定(24h)大肠菌群的方法。其原理是使用人工合成的半乳糖与色基的结合物作为β-半乳糖背酶底物，当底物被细菌产生的酶水解后色基游离，显色或发荧光，证明有大肠菌群的存在。(细菌分解乳糖需要两种酶:一是半乳糖背渗透酶，另一种是β-半乳糖昔渗透酶，它存在于菌体中，它可将进入菌体细胞的乳糖分解为葡萄糖和半乳糖。)目前，常用底物有5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-gal)、3、4-环己酮-β-D-半乳糖苷、8-羚基喳琳-β-D-半乳糖昔等。

　　1.1 4-甲基伞型酮-β-D-半乳糖背(4-MU-β-D-galactoside)为底物的快速酶法底物被细菌分解为4-甲基伞型酮和糖苷，其中4-甲基伞型酮是荧光物质。从国标法初发酵管中，吸取产酸产气的菌液，滴于滤纸上进行β-半乳糖背酶及氧化酶检测。若试验的滤纸在长波段紫外线灯下发绿荧光，而氧化酶试验为阴性的革兰氏阴性杆菌，则确定该初发酵管存在大肠杆菌，无须再作平板分离与复发酵。

　　1.2茜素-β-D-半乳糖苷酶(Aliz-gal)为底物的快速酶法 2000年James等报道了一种新的检测大肠菌群的酶底物:茜素-β-D-半乳糖苷酶(Aliz-gal)。该试剂具有较其它试剂更灵敏的性能，可提高检测的灵敏度。茜素-β-D-半乳糖背酶(Al泣-gal)的合成:将茜素悬浮于丙酮和氢氧化仰的混合液内，加入漠代乙酷半乳糖的丙酮溶液，搅拌lOh。减压蒸馆除去丙酮，将产物过滤、水洗、干燥，溶于二氯甲烧，用氧化铝吸除游离茜素，过滤，蒸发除去二氯甲烷，在乙醇中重结晶，得茜素乙酸半乳糖，再于甲醇碱溶液中脱酷而得。茜素-β-D-半乳糖苷酶(Aliz-gal)培养基的制备:茜素-β-D-半乳糖昔酶(Aliz-gal)50mg，蛋白腺20g，无水磷酸氢二饵2.75g，氧化纳掠，月桂基硫酸纳O.lg，异丙基硫代半乳糖背0.03g，硫酸铝饵(或拧橡酸铁镀)O.5g，拧橡酸铁镀O.1g，琼脂15g，蒸馆水100Oml。调pH值至7.4，116°C高压灭菌lOmin。研究结果表明，茜素-β-D-半乳糖苦酶(A1iz-gal)是检测食品中大肠菌群的一个很好的试剂，它具有高度的敏感性和准确性，可在18-24h内显示出半乳糖酶反应，达到准确测定大肠菌群的目的。在同类性质的酶底物中，茜素-β-D-半乳糖昔酶(Aliz-gal)的用量较低，可以和不同的阳离子(Fe、AI)形成带色的混合物，这样就便于和其他的显色剂合用，组成具有多种性能的鉴别培养基。与同类培养基相比，茜素-β-D-半乳糖昔酶(Aliz-gal)可做倾注培养，在琼脂深层菌落特征仍很明显，而其他同类培养基只能做涂布培养。总之，试验证明用茜素-β-D-半乳糖苷酶(Aliz-gal)底物检测食品中的大肠菌群，具有特异性强、速度快、准确率高的特点，且稳定性较高，可作为标准方法加以应用。

　　1.3大肠菌群产色基质试验 大肠菌群产色基质试验，也称为Autoanlysiscolilert(AC)法。此法1992年已被美国标准方法委员会在18版《水与废水检验标准方法》中选用。(1)AC法原理:将一种可被微生物水解的基质作为待测微生物的特殊基质，这种基质也称为营养物，它具有指示剂和营养物的双重作用，在微生物作用下产生颜色变化或进一步发生荧光，通过肉眼观察或再配一个手持式长波紫外线灯(波长为366nm)即可获得结果。产色基质如邻-硝基苯-β-D-毗喃半乳糖苷(ONPG)被用于检测由总大肠菌群细菌产生的β-D-半乳糖苦酶，该酶水解基质使产生一种颜色变化，在24-28h内不需增加其它的手续即可指示和证实该实验结果为阳性。产色基质4-甲基伞型基-β-D-葡糖苷酸(MUG)被用于检测大肠埃希氏菌(大肠杆菌，Escherichiacoli)。(2)AC法培养基配方。粉末状配方含有如下无水化合物(制备每升基质):(NH4)2S04 5.00g，MnS04O.0005g，ZNso4 O. 0005g， MgS04 O. 10g， Nacl10. 0g， CaCl2 O. 05g， Na2S03 O. 04g，AmpHotericin B O.OOlg，ONPG(邻-硝基苯-β-D-口比喃半乳糖昔) O. 50g，MUG( 4-甲基伞型基-β-D-毗喃葡糖背酸) O. 075g，Solanium o. 50g， N~m咱46. 2g， KH2P04 O. 9g，铀 盐5. 3g，N -2 - hy由oxyethylpiperazine - N - 2 - ethane sul-fonic acid 6. 9g。以上培养基中Solanium为一种专利商品， 含有起乳化剂作用的植物提取物，并含有某些抗生素。为确保良好的试剂质量和结果的一致性，需要使用配置好的商品基质试剂。