摘要:目的观察二甲戊灵(Pendimethalin)经口急性毒性和亚慢性毒性。方法采用SPF级SD大鼠进行经口急性及亚慢性毒性实验,试验期间观察动物一般情况,每周称量体重,试验结束后麻醉大鼠,检测血常规、血生化、尿常规、观察脏器系数及病理变化。结果二甲戊灵大鼠急性经口LD。雌性为2710mg/kg·bw/d,雄性为3160mg/kg·bw/d;亚慢性染毒后:240mg/kg·bw/d剂量组大鼠体重降低,雌雄性大鼠肾重量升高,脑、心、肝、脾、。肾上腺脏器系数升高;雌性大鼠BUN,CHOL和CREA均升高,雄性大鼠BUN和CREA升高,但TBIL降低;少数雌性大鼠肾小管上皮细胞轻度空泡样变性;多数雄性大鼠出现不同程度的。肾小管萎缩、管型、间质炎细胞浸润等。60mg/kg·bw/d剂量组第3、4周体重降低,雌性大鼠BUN、肾脏器系数、肝脏器系数均升高,雄性大鼠CREA升高,AIB降低。15mg/kg·bw/d剂量组各项指标与对照组相比,差异无统计学意义。结论本试验条件下,大鼠亚慢性经口毒性试验对SD大鼠的大无作用剂量为15mg/kg·bw/d。二甲戊灵属低毒类农药。

  关键词:二甲戊灵;急性毒性;亚慢性毒性;大无作用剂量;大鼠中图分类号:R一331文献标识码:B文章编号:10069070(2013)01006703

  二甲戊灵(Pendimethalin)属低毒高效广谱除草剂,由德国巴斯夫公司于1972年研制成功。其商品名称有除芽通、施田补等,化学名称为N一(1-乙基丙基)一2,6一二硝基一3,4一二甲基苯胺。二甲戊灵除草活性高,且可被土壤中的微生物分解,因而被广泛使用。但二甲戊灵对水生动物有一定的毒性,而且是人类可疑致癌物。为了解二甲戊灵的毒性,本文以大鼠为模型动物开展急、亚慢性毒性研究,以期为该农药的安全生产和使用提供依据。

  1材料与方法

  1.1材料二甲戊灵原药(纯度为96),固体,由江苏某化学有限公司提供。

  1.2动物来源与饲养SPF级SD大鼠由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供,动物许可证号:SCXK(沪)20070005。急性经口试验大鼠体重186~205g,亚慢性试验大鼠体重90~109g。实验期间动物房环境保持在温度2O℃~25℃、相对湿度4O~7O,其他指标均等符合SPF环境要求。

  1.3试验方法依据GB156701995(农药登记毒理学试验方法》的要求进行设计和实施。

  1.3.1急性经口毒性试验:试验前按体重随机分成雌、雄各4组,每组各5只。剂量设置为10000、4640、2510、1000mg/kg。受试物溶于玉米油中,动物隔夜禁食后按2mL/lO0g体重经口灌胃染毒。染毒后观察14d,每天观察并记录中毒症状和死亡情况。

  1.3.2亚慢性毒性试验:试验前大鼠随机分为4组,每组2O只,雌、雄各半。设240、60、15mg/kg-bw/d3个剂量组和1个对照组。将二甲戊灵按不同剂量采用逐级稀释的方法,均匀混入饲料中制成颗粒饲料,辐照灭菌后供动物食用,连续喂养90d;对照组给予不加受试物的正常饲料。试验期间观察动物的一般情况,包括外观体征和行为活动、粪便性状、食物摄入量及体重变化等。试验结束时,收集尿样测定尿液常规。隔夜禁食后1O水合氯醛麻醉经腹主动脉采血,按常规方法测定血液学和血液生化指标。动物解剖后取脑、心、肺、肝、脾、肾、肾上腺、睾丸或卵巢等,称重后置于10福尔马林溶液中固定,用于组织病理学检查。

  1.4统计学分析急性经口毒性试验采用Horn氏法,计算IDoo及其95可信区间。亚慢性毒性试验结果经正态性检验后,符合正态的指标采用SPSS13.0统计软件进行单因素方差分析,否则经变换后分析。

  2结果2.1急性经口毒性试验动物经口染毒后,部分动物出现萎靡、流涎、毛蓬松、蜂腰、呼吸困难、四肢无力、小便黄等毒性症状及死亡现象,未死亡的动物第3d'N复正常。雌性LD。为2710mg/kg(95可信区间:2000~3690mg/kg),雄性LD5。为3160mg/kg(95可信区间:2050N4880mg/kg)。

  2.2亚慢性毒性试验

  2.2.1一般状况及体重变化:在连续染毒90d内,各剂量组动物一般行为表现未见明显异常,均无大鼠死亡。240mg/kg·bw/d剂量组雌性大鼠第1~13周体重降低,雄性大鼠第9周体重降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05);60mg/kg·bw/d剂量组第3周和第4周体重降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<O.05));15mg/kg·bw/d剂量组动物未见明显异常。

  2.2.2脏器系数:240mg/kg·bw/d剂量组雌性大鼠脑、心、肝、脾、肾上腺、肾脏系数升高,与对照组比较有显着性差异(P<0.05)。6Omg/kg·bw/d剂量组肾脏器和肝脏器系数升高,与对照组比较有显着性差异(P<O.05)。其他脏器分数与对照组相比,差异无统计学意义。见表1。2.2.3血液生化指标:240mg/kg·bw/d剂量组雌性大鼠BUN、CH0I和CREA均升高,雄性大鼠BUN和CREA升高,TBIL降低,与对照组比较有显着性差异(P=0.05);60mg/kg·bw/d剂量组雌性大鼠BUN,雄性大鼠CREA升高,ALB降低,与对照组比较有显着性差异(P<0.05);15mg/kg·bw/d剂量组所有指标与对照组相比无显着性差异(P>0.05)。

  见表2。

  2.2.4尿常规检查:结果显示240mg/kg·bw/d剂量组少数雄性大鼠尿蛋白阳性,60mg/kg·bw/d剂量组个别动物尿蛋白阳性。其他指标未见异常变化。

  2.2.5病理组织学检查:肉眼观察各剂量组雌、雄性大鼠主要脏器大体形态均未见明显异常病变。光学显微镜下对高剂量组和对照组进行病理组织学观察,240mg/kg·bw/d剂量组雌性大鼠肾小管上。肾小球无炎性改变、纤维化、玻璃样病变等变化。肾小管出现不同程度的萎缩、管型、间质炎细胞浸润等。60、15mg/kg·bw/d2个剂量组镜检均未见明显异常。

  3讨论目前,对二甲戊灵的毒性作用研究主要侧重于其对植物杂草及土壤的危害研究。本次急性经口毒性试验结果表明,二甲戊灵对雌、雄性大鼠ID。分别为2710、3160mg/kg;亚慢性实验结果显示,240mg/kg组雌性动物体重增长缓慢,高剂量组大鼠体重下降明显,雄性大鼠尤为明显,而其脏器系数却明显升高。

  60mg/kg剂量组动物肾脏系数增大可能与体重下降有关。因此,二甲戊灵属低毒类农药。

  试验结果显示,240mg/kg剂量组大鼠,肝、脾、肾上腺、肾脏系数升高,与潘红梅等研究二甲戊灵能加强肝细胞代谢结果一致。雄性大鼠的’肾脏脏器系数与对照组比较有明显增高,这一方面可能是由于毒性作用致其体重下降所致,另一方面也可能与二甲戊灵对肾脏的损害有关。在生化检测中,雌性大鼠BUN,CH0L和CREA均升高,病理切片也发现。肾小管上皮细胞轻度空泡变性;雄性大鼠BUN和CREA升高,TBII和AIB降低,而肾脏的脏器系数变化不明显,但在病理切片中出现不同程度的肾小管萎缩、管型、问质炎细胞浸润等,可能与二甲戊灵能够使大鼠血浆胆固醇水平显着升高、肝脏和肾上腺重量明显增加有关。

  本次试验证明,二甲戊灵有肾毒性,但对大鼠的肝脏的影响并不明显。流行病学研究发现,长期接触二甲戊灵的人群,肝癌和直肠癌的相对危险度(RRs)分别达5.2和9.2,这种结果的差异性可能与接触二甲戊灵的时间成正相关,具体的发病机制还需要进一步的深入研究。本试验表明二甲戊灵的大无作用剂量为15mg/kg·bw/d,该剂量对大鼠的胃肠道未造成可见的损伤。

  综上所述,二甲戊灵对动物以及人体都可能具有一定的毒性作用,因此在施用二甲戊灵除草剂时,应加强个人防护。