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不同栽培类型铁皮石斛之间品质差异研究-骨科健康教育论文

时间:2012-04-19 12:30来源:未知 作者:360期刊网2 点击:

骨科健康教育论文    幼儿健康教育论文     健康教育论文    医学教育论文发表
  1  材料与仪器
  1.1  材料
  铁皮石斛ⅠDendrobium candidum采集于2007-11-20,铁皮石斛ⅡDendrobium candidum 采集于2008-01-14,齿瓣石斛Dendrobium devonianum采集于2007-11-20,采样产地均为云南西双版纳。
  1.2  试剂与仪器
  苯酚、浓硫酸、无水乙醇、氯仿、正丁醇等均为分析纯。旋转蒸发器R-210(瑞士布奇),TU-1901新世纪紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司), 数显恒温水浴锅HH-4(常州国华电器有限公司),GZX-9140恒温数显鼓风干燥箱(上海博讯设备有限公司),METTLER TOLEDO分析天平AB135-S,PL203。
  2  方法
  2.1  折干率分别将新鲜采集的铁皮石斛样品(5种10份,勐海县),齿瓣石斛样品(5种5份,勐海县,景洪市普文镇)晾干,切成小段(约1 cm),在恒温鼓风干燥箱中50℃干燥,称重,计算折干率。
  2.2  线性关系精确称取在105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品100 mg,置100 ml量瓶中,用蒸馏水溶解、定容。精取10 ml于100 ml量瓶中,用蒸馏水定容即得。每1 ml溶液含葡萄糖0.1 mg。
  精取葡萄糖对照液0.1,0.2 ,0.3, 0.4,0.5 ,0.6.,0.7 ml,分别置于量瓶中,加蒸馏水使成2.0 ml,各加苯酚试剂1.0 ml,在旋转混匀器上摇匀,迅速滴加浓硫酸5.0 ml,摇匀,放置5 min,置沸水浴中加热15 min,冷水迅速冷却至室温。另以蒸馏水2.0 ml同法操作,作为空白对照,在490 nm处测其吸光度。
  2.3  多糖提取参照李满飞[5]方法改良,精密称取各石斛干燥后粗粉10 g ,加入石油醚(60~90℃)50 ml,回流提取1 h脱脂。过滤,挥干溶媒,以80%乙醇回流提取1 h(提取分离干扰组分),趁热过滤,挥干溶媒,加入蒸馏水250 ml回流提取2次,1 h/次,趁热过滤,减压浓缩至30 ml,用0.1%活性炭脱色,过滤,加入95%乙醇使溶液含醇80%,静置过夜,分出沉淀物溶于蒸馏水,Sevag法脱蛋白。上清液如上述醇沉,沉淀物依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤。将沉淀再如上脱色、醇沉,得到多糖精制品于60℃烘干备用。
  2.4  换算因素精确称取60℃干燥至恒重的石斛多糖精制品各10 mg,分别置于100 ml量瓶,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,作为储备液。分别精取多糖储备液0.3 ml,按照标准曲线制备的方法操作,测定吸收度。另精取葡萄糖标准溶液0.3ml(含葡萄糖30 μg),同法操作,求出石斛多糖溶液中的葡萄糖含量,按下式计算换算因素,F= 多糖浓度(μg·ml-1)/多糖溶液的葡萄糖含量(μg·ml-1)×稀释倍数。
  2.5  样品多糖测定精密称取60℃恒重的各石斛粗粉0.5 g,置圆底烧瓶,用石油醚(60~90℃)脱脂1 h,加入80%乙醇100 ml回流提取1 h,趁热过滤。药渣用80%热乙醇8 ml洗涤3次,再用85 ml蒸馏水回流提取1 h,趁热过滤,用热水洗涤药渣和烧瓶,冷却后在250 ml量瓶中以水定容。分别精取0.3 ml,按标准曲线项下操作,按下式计算样品中多糖的含量。多糖含量(%)=Cs·D·F·V/ W。式中:Cs为供试品溶液中葡萄糖浓度(μg·ml-1),D为供试品溶液的稀释因素,F为换算因素,V为供试品的体积(ml),W为供试品的质量(mg)。
  3  结果
  本实验中,冬末采收的铁皮石斛的多糖含量及折干率(20.29%,20.16%)高于秋末采收的铁皮石斛(14.86%,16.9%),因此选择冬末作为铁皮石斛的采收季节较为适宜。在相同栽培条件下,1号样品多糖含量(22.27%)与4号样品多糖含量(17.75%)的最大差值为4.52%,而1号样品折干率(22.1%) 与5号样品折干率(17.0%)之间最大差值5.1%,由此可推断,不同栽培类型铁皮石斛之间品质存在一定的差异。
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