进行性病理过程。近年大量研究证实,氧化应激(OS)与AS的发病关系密切,在AS发生发展中发挥了重要作用。研究拟从抗氧化应激角度探讨富硒灵芝防治AS的作用机制。

  1实验材料

  1.1实验动物成年健康雄性sD大鼠5O只,体质量180200g,由河北省实验动物中心提供,动物合格证号:708056。

  1.2实验药物及试剂富硒灵芝:在液体培养基中加入亚硒酸钠培养出富硒灵芝(含硒量为4.32mgr/g),[23课题组实验室培养,8O℃烘干,超微粉碎备用。血脂康:北大维信生物科技有限公司,国药准字:Z10950029,实验时配置成0.02g/mL的水溶液。SOD、MDA、GSHPX试剂盒:均由南京建成生物工程研究所提供。

  2实验方法

  2.1大鼠动脉粥样硬化模型的建立5O只大鼠除10只正常饲料饲养外,其余4JD只大鼠以促动脉粥样硬化饲料、普通饮水饲养9周。促动脉粥样硬化饲料在正常饲料基础上加入2%胆固醇、0.5%胆酸钠、0.2%丙基硫氧嘧啶、维生素D粉剂(1.25×106U/kg饲料)、3%猪油,实验开始予每只大鼠30万U/kg体质量的维生素D。右下肢肌肉注射,此后每3周重复给予上述剂量维生素D,右下肢肌肉注射。

  2.2分组与给药5O只大鼠饲养于18℃~22℃明暗各12h的清洁级动物实验室内,喂养1周后,分为5组。正常对照组、模型对照组均灌服生理盐水;富硒灵芝低、高剂量组分别灌服富硒灵芝(含药量分别为0.02g/mL、0.08g/mL);血脂康对照组灌服血脂康(0.02g/mL)。每日1次,给药体积为1mL/100g。连续9周,第9周末各组大鼠末次给药后禁食禁水12h,10%水合氯醛4mL/kg腹腔注射麻醉后腹主动脉取血。

  2.3检测方法SOD、MDA、GSHPX检测:采用黄嘌呤氧化酶法测定血清SOD的含量,硫代巴比妥酸(TBA)法测定血清MDA的含量,DTNB法测定血清GSHPX活性。

  2.4统计学分析采用SPSS12.0统计软件进行数据的输入和计算,其数据用(±s)来表示,多组均数比较,用单因素方差分析法(OnewayANOVA),当P<0.05时差异有显著性。

  3结果与正常对照组比较,模型对照组SOD含量、GSHPX活性均显著降低(P<0.01),MDA含量显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,各治疗组均可显著升高SOD含量,降低MDA含量(P<0.05或P<0.01),各治疗组间比较,差异无显著性(P>0.05)。富硒灵芝高、低剂量组又可升高GSHPX活性(P<0.01)。

  4讨论

  灵芝是一种珍贵的药用真菌,具有养心安神、补气益血、补肺平喘、滋补强壮、扶正固本等功效。灵芝含有多种有效成分,多糖类是其主要有效成分之一。灵芝多糖具有多方面的生物活性和药理作用,能有效调节高血脂动物血脂水平。硒是人体必需的微量元素,具有保护肌体免受氧化损害的功能。硒通过增强谷胱甘肽过氧化物酶GSHPX的活性,催化氧化型谷胱苷肽(GSSG)还原为还原型谷胱苷肽(GSH),使生物膜和细胞免遭自由基的损害而减轻脂质过氧化反应。人体的硒主要来源于食物,从营养学和生化代谢角度考虑,生物源有机硒以其吸收利用率高、毒副作用小等特点优越于元机硒。灵芝对某些微量元素特别是硒具有高度的富集作用,并把无机硒转化为有机硒,利于人体摄人。本实验采用的富硒灵芝是灵芝在加硒深层培养中,对无机硒进行生物转化而成为35肝肾功能全部病例治疗后肝肾功能检查均未出现异常。

  4讨论恶性肿瘤化疗过程中,由于肿瘤细胞与正常细胞间缺少根本性的代谢差异,化疗药物都不能完全避免对正常细胞的损害。在这些正常细胞中,首当其冲的是生长增殖旺盛的细胞,如骨髓造血细胞、消化道黏膜上皮细胞等,使患者免疫力下降,骨髓机能明显受到抑制,致白细胞下降,严重时红细胞、血小板也下降。

  中医学认为本病的病因是受化学药物或放射线损伤,骨髓抑制,此乃外邪侵袭致癌症患者体内热毒过盛,津液受伤,气血不和,气血损伤,脾胃失调及肝肾受损所致。

  脾胃为后天之本、气血生化之源,脾胃失调则饮食之水谷不能化生气血精微;肾主骨藏精生髓,精血互化,肾虚则骨髓空虚,精血生化无源。再生胶囊中淫羊藿、鹿角胶补肾填精为君;党参益气健脾,熟地黄滋阴补血,一阴一阳,不燥不腻,作为臣药,辅助君药补肾填精;黄芪、当归补气养血,鼓舞正气;虎杖清热解毒,使毒邪在内消解,并制约党参、黄芪、鹿角胶等温热太过,防燥热动血;仙鹤草、三七活血止血而不留瘀;白术、茯苓健脾利湿。诸药共奏扶正固本,清热解毒,活血散瘀之效。

  现代药理研究证实,淫羊藿苷具有促进小鼠免疫功能,逆转化疗后小鼠免疫抑制状态的作用;还可逆转环磷酰胺化疗后小鼠骨髓造血和免疫功能的抑制状况。鹿角胶能促进周围血液中的红细胞,白细胞,血小板的量增加。党参中的CPP具有免疫活性,可显著提高淋巴细胞增殖并呈剂量依赖性关系。熟地黄及其提取物对小鼠外周血WBC、BMC的增殖具有促进作用,并能增强免疫系统功能。黄芪注射液具有提高肌体对损伤的防护作用,能显著增加骨髓细胞数及外周白细胞数,对红细胞及粒细胞系统具有保护作用。

  临床研究结果表明,再生胶囊能明显提高恶性肿瘤化疗后白细胞及粒细胞数量,临床疗效明显。