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麻红止哮合剂是我们应用多年的有效方药,方中麻黄辛、微苦、温,归肺、胃、膀胱经,具有宣肺平喘之功,研究表明,麻黄除具有平喘镇咳作用外还具有抗急性血瘀证形成作用[4]；红景天味甘、涩、性平,归肺经,具有清肺止咳之功,研究表明,红景天能够解除支气管平滑肌痉挛,抑制兔缺氧性肺动脉平滑肌细胞增殖,增加血液的载氧能力。
观察麻红止哮合剂对与哮喘气道重塑密切相关的血管内皮生长因子(VEGF)与碱性成纤维细胞生长因子(b-FGF)的影响,探讨其治疗哮喘慢性持续期的作用途径。方法 SD大鼠40只,随机分为正常组、造模组、激素组和中药组。以腹腔注射100 g/L卵蛋白(OVA) 1 mL和10 g/L 的OVA吸入激发制成支气管哮喘模型。激素组和中药组在每次雾化前20 min给予强的松或中药干预。空白组和造模组在每次雾化前20 min给予2 mL生理盐水。用ELISA法测定血清VEGF与b-FGF浓度。结果 造模组血清VEGF与b-FGF浓度较正常组、激素组和中药组明显增加(P<0.05)。正常组、激素组和中药组组间比较,血清VEGF浓度有显著差异(P<0.05)；正常组、激素组和中药组组间比较,血清b-FGF浓度无显著性差异(P>0.05)。
1 实验材料
1.1 动物
健康雄性SD大鼠40只,体重(200±10)g,北京维通利华实验动物技术有限公司提供[许可证号：SCXK(京)2002－0003]。
1.2 药物
卵蛋白(ovalbumin,OVA)GradeⅡ,购于Sigma公司。灭活百日咳杆菌苗,购于北京生物制品研究所。氢氧化铝,批号20050412。3.5%水合氯醛,批号 20060315,西苑医院制剂室提供。强的松,购于天津力生制药股份有限公司,批号0512056。血清VEGF试剂盒、血清b-FGF试剂盒,购于北京金鑫然医药有限责任公司,批号20050615。麻红止哮合剂(炙麻黄、红景天、白果、生地黄、穿山龙、川芎、黄芩等),中国中医科学院西苑医院制剂室(批号 20060321), 1 mL药液相当于4 g原药材,再根据实验要求进行稀释。
1.3 主要仪器和设备
402型医用雾化器,上海合力医疗器械厂生产；80-2台式离心机。
1.4 大鼠分组及哮喘模型的建立
参考文献[1-3]方法制作哮喘模型。配置成每1 mL含OVA 100 mg、氢氧化铝100 mg、灭活百日咳杆菌约6×109个的溶液。第1天每只大鼠腹腔注射以上溶液1 mL,第8天重复腹腔注射1 mL。第15天将致敏大鼠置于密闭喷雾箱,给予10 g/L的OVA生理盐水溶液,超声雾化,每天激发20 min,连续14 d,制成支气管哮喘模型。
40只大鼠随机分为4组,每组10只,中国中医科学院西苑医院二级动物室[饲养设施合格证号SYXK(京)2003－0008]适应性喂养1周后开始实验。正常对照组(正常组)：腹腔注射及雾化均用生理盐水,每天雾化吸入前20 min用2 mL生理盐水灌胃；空白造模对照组(造模组)：OVA造模后,每天激发前20 min用2 mL生理盐水灌胃；激素对照组(激素组)：OVA造模后,每天激发前20 min用2 mL强的松溶液灌胃(每日强的松0.3 mg/100 g体重)；中药实验组(中药组)：OVA造模后,每天激发前20 min用2 mL麻红止哮合剂灌胃(每日1.8 g/100 g体重)。
1.5 标本的采集
各组大鼠在末次激发后24 h内收集标本,用3.5%水合氯醛(1 mL/100 g体重)腹腔注射麻醉大鼠,腹主动脉取血,静置1 h后,2 500 r/min离心15 min,分离血清,分别用血清VEGF试剂盒、血清b-FGF试剂盒,采用ELISA方法测定VEGF、b-FGF浓度。
2 结果
正常组大鼠呼吸平稳,行动灵活,反应灵敏,体重稳定增长,毛色光泽。造模组出现呼吸急促,轻度紫绀,行动迟滞或俯伏不动,反应迟钝,体重减轻,毛色失去光泽。激素组、中药组大鼠体重增长低于正常组,其它体征变化不明显。 各组大鼠血清VEGF、b-FGF水平变化(略) 注：与模型组比较,＃P<0.05；与正常组比较,*P<0.05。
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