结肠癌是我国常见的消化道恶性肿瘤，严重危害着人们的身体健康。基因水平及表观遗传学的改变是结肠癌发病的重要原因，癌基因的激活与抑癌基因的突变在结肠癌的发生发展中起到了重要作用。
p53是目前研究广泛的抑癌基因之一，它的突变与结肠癌发生密切相关。星形细胞上调基因一1(AEG一1)是近几年新发现的与多种肿瘤关系密切的癌基因。我们应用免疫组化方法检测了结肠癌中癌基因AEG一1和抑癌基因p53的表达，并分析其临床意义。
对象与方法
1．对象：收集河北省保定市第一中心医院2007年1月～2012年12月间手术切除并经病理检查证实的结肠癌组织63例，均为腺癌，其中男性35例，女性28例，年龄2988岁，中位年龄61岁。分化程度为高分化30例，中分化19例，低分化14例。依据国际抗癌联盟(UICC，2010)结肠癌TNM分期：I～Ⅱ期39例，Ⅲ～Ⅳ期24例。另取距肿瘤边缘5．0cm以上的癌旁正常组织30例作为对照。
2．方法(1)兔抗人AEG一1多克隆抗体购自英国abeam公司(编号ab76742)；鼠抗人p53单克隆抗体、免疫组化试剂盒均购自福州迈新生物技术公司。应用免疫组化EnVision二步法对石蜡包埋的肿瘤组织及癌旁正常组织进行上述指标免疫组化染色。染色步骤严格按照试剂盒说明书进行操作。
(2)AEG．1以胞浆中出现淡黄色至褐黄色的细小颗粒为阳性表达。p53以细胞核出现棕黄色颗粒为阳性。每张切片随机观察5个高倍镜视野(×400)，每个视野计数100个细胞。按阳性细胞所占比例计分：<5％为0分，5％～25％为1分，26％～50％为2分，51％一75％为3分，>75％为4分；按着色强度计分：
无着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，褐黄色为3分。将两种计分相乘：01分为阴性(一)，2～4分为弱阳性(+)，58分为阳性(++)，9～12分为强阳性(+++)。
3．统计学处理：应用SPSS17．0软件进行统计分析，计数资料采用x检验，相关性采用Spearman相关分析。
结果
1．AEG-1在结肠癌中的表达：AEG-1定位于肿瘤细胞的细胞质中，AEG-1在结肠癌组织及癌旁正常组织中的阳性表达率分别为68．3％(43／63)和26．7％(8／30)，两者比较差异有统计学意义(P<0．05)。
2．p53在结肠癌中的表达：p53主要表达于细胞核，在结肠癌组织及癌旁正常组织中的阳性表达率分别为61．9％(39／63)和0．00％(0／30)，两者比较差异有统计学意义(P<0．05)。
3．AEG-1表达与结肠癌临床病理特征参数的关系：AEG．1的表达水平与结肠癌分化程度、临床分期呈正相关(P<0．05)，与患者性别、年龄及肿瘤大小无关(P>0．05)。
4．结肠癌组织中AEG一1与p53的关系：AEG·1阳性组p53的阳性表达率为72．1％，明显高于阴性组的表达率(40．0％)，两者比较差异有统计学意义(P<0．05)。AEG一1表达与p53呈正相关(P<0．05)。
讨论AEG一1是近年来新发现的癌基因，该基因位于人类8号染色体上(8q22)，全长3611bp，包含11个内含子和12个外显子。研究表明，AEG．1与多种恶性肿瘤的发生、发展密切相关。对乳腺癌患者的研究发现，乳腺组织中AEG一1呈异常高表达，其表达水平与患者生存时间及临床分期高度相关，并有试验证实，AEG-1是乳腺癌发展过程中重要的临床病理指标。有研究显示，AEG一1可通过影响PI3K／Akt、Wnt／[3一catenin、NF．KB等多条信号通路的功能，从而介导肿瘤细胞的异常增殖与抗凋亡能力。我们应用免疫组化方法检测63例结肠癌组织及30例癌旁正常组织中AEG一1的表达，结果显示AEG一1在结肠癌中的表达水平显著高于癌旁正常组织。临床资料分析表明，AEG一1的表达水平与患者性别、年龄及肿瘤大小无关，与结肠癌分化程度、临床分期呈正相关，随着结肠癌分化程度降低，AEG．1表达水平逐渐升高，且AEG一1在～T4组中的表达水平明显高于T1～T2组的表达水平，提示AEG一1过度表达与结肠癌的发生、发展密切相关，其是肿瘤发展过程中的一个敏感指标。为更深入了解AEG一1在结肠癌中的作用机制，我们联合检测了与肿瘤细胞增殖、凋亡密切相关的p53基因。p53是目前研究较深入的抑癌基因之一，其产物是一种核蛋白，它能引起细胞周期阻滞，诱导调亡和促进分化，而突变型p53则失去原有功能，从而成为肿瘤发生发展过程中的一个重要因素。陈敏等研究提出在结肠癌癌前病变、低度异常增生和高度异常增生中存在高比例p53阳性表达。马鹏等。。研究显示，p53蛋白在结肠癌组织中表达高于癌旁及正常组织。突变型p53基因的表达产物半衰期长，易在细胞核内积聚。因此，我们应用免疫组化方法检测到的是突变型p53基因的表达水平。本研究结果表明，p53在结肠癌中的表达水平明显高于癌旁正常组织，且AEG一1与p53的表达水平呈正相关。
AEG一1与p53在结肠癌的发生、发展中起到了重要作用，而且存在一定的关联性。AEG一1过表达可能影响p53的表达而导致肿瘤细胞出现凋亡耐受。但AEG一1在结肠癌中是如何被激活的，以及它与p53的相互作用机制需要更进一步研究。
