黄芩是我国一种传统中草药，始载于 神农草本经 ，传统用根入药，但野生资源十分有限，近年来国内外研究学者开始对黄芩茎叶进行研究。黄芩茎叶总黄酮是从黄芩的茎叶中提取的有效成分。研究表明，黄芩茎叶总黄酮具有较强的抗氧化、抗炎、降压、降血脂、解热、镇痛、提高机体免疫力等功效，但对其抗肿瘤功效的研究很少 叫。国内有研究报道，黄酮类化合物可以抑制肿瘤细胞增殖，可能发展成为抗肿瘤药物 。本研究采用MTT法观察了不同浓度黄芩茎叶总黄酮对宫颈癌Hela细胞增殖的影响，以期为黄芩茎叶总黄酮用于治疗宫颈癌提供实验依据。

　　1材料与方法

　　1．1 材料黄芩茎叶总黄酮：由承德医学院中药研究所提供(含量98％)；宫颈癌Hela细胞株：购白上海细胞库。

　　1。2 仪器和试剂CO，孵育箱：德国Heraeus公司；净化工作台：上海新苗医疗器械制造有限公司；MultiskanMK3酶联仪：芬兰Thermo公司；显微镜及摄像装置：日本Olympus公司；6孔、96孔细胞培养板：无锡Biousing生物科技有限公司；DMEM培养基：美国GIBCO公司；MTI"及胰酶：美国Sigma公司；二甲基亚砜(DMSO)：天津市标准科技有限公司；无支原体胎牛血清：杭州四季青生物工程材料有限公司。

　　1．3 方法

　　1.3．1 细胞培养：宫颈癌Hela细胞贴壁生长于DMEM完全培养基中(含10％胎牛血清，青霉素和链霉素各100L／m1)，置于37°C、饱和湿度、5％ CO，培养箱中培养。

　　细胞分为实验组和对照组：实验组细胞加入用DM配制的不同浓度的黄芩茎叶总黄酮，终浓度分别为0．04mg／ml、0．06mg／ml、0．08mg／ml、0．mg／ml、0．14mg／ 、0．16mg／ml，每组设6个平行孔；对照组细胞只加培养液。

　　1．3．2 MTT法检测Hela细胞的增殖情况：取对数生长期Hela细胞，用胰酶消化后接种于96孔培养板，每孔加入细胞5X l 个，培养液200l常规培养，细胞贴壁后加药。加药培养24h后，每孔加入MTT(smg／m1)溶液20l，继续培养4h后终止培养，小心吸去孔内培养液。每孔加入150;l二甲基亚砜，低速振荡10min，使结晶物充分溶解。在酶联检测仪上测定490rim处各孔的吸光值(OD值)，并按照下列公式计算各组细胞的生长抑制率，其中加药组细胞的OD值为同一浓度处理的不同样品的平均值。

　　1．3．3 形态学观察：取对数生长期的Hela细胞接种于6孔细胞培养板，细胞贴壁后，实验组加入黄芩茎叶总黄酮(终浓度为0．1mg／m1)，对照组不加药物，加相应体积的培养基，培养24h后在倒置显微镜下观察Hela细胞形态的变化。

　　1．4 统计处理采用SPss 15．0统计软件进行统计分析，计量资料以( ±s)表示，多个样本的比较采用单因素方差分析(LSD法)，两两比较采用口检验，检验水准Ⅸ=0．05。

　　2结果

　　2．1 黄芩茎叶总黄酮对Hela细胞生长的抑制作用不同浓度的黄芩茎叶总黄酮处理后，Hela细胞的增殖被明显抑制，黄芩茎叶总黄酮各剂量组Hela细胞的抑制率均明显高于对照组。p<0．01)。随着黄芩茎叶总黄酮剂量的增加，Hela细胞的抑制率逐渐升高 <0．01，P<0．05)；但黄芩茎叶总黄酮0．1mg／inl、0．14mg／ml、0．16mg／ml组Hela细胞的抑制率比较，差异无统计学意义p>0．05)。

　　2．2 形态学观察对照组宫颈癌Hela细胞呈多角形，核圆，细胞边缘清楚，背景清晰；实验组Hela细胞数量明显减少，形态发生明显变化，呈圆形或长条形，悬浮的细胞增多。

　　3讨论本研究发现，一定浓度的黄芩茎叶总黄酮可明显抑制Hela细胞的生长繁殖，且在一定范围内随着给药剂量的增加，抑制作用逐渐增强。黄芩茎叶总黄酮抑制Hela细胞增殖的机制尚不明确，还需进一步研究。

　　目前，对黄芩茎叶总黄酮功效的研究主要集中在保护心肌缺血／再灌注损伤、对心血管及其功能的作用、调血脂作用、神经保护作用、保护肝组织损伤、解热镇痛、抗炎作用、抗病毒作用、对免疫系统的影响等方面，对其抗肿瘤功效的研究较少。但有研究表明，黄芩茎叶总黄酮具有抑制肿瘤转移、侵袭等作用。如杨鹤松的研究发现倒，黄芩茎叶总黄酮及野黄芩苷对体外培养的小鼠肺腺癌LA795细胞系有明显的抑制作用；刘金霞 应用W256引起的大鼠骨组织吸收和溶解动物模型，发现黄芩茎叶总黄酮能抑制肿瘤细胞增殖、侵袭和转移，作用机制可能是双向调节免疫功能。本研究以宫颈癌Hda细胞作为研究对象，证实黄芩茎叶总黄酮能够抑制肿瘤细胞的增殖，为将黄芩茎叶总黄酮开发成为抗肿瘤药物提供了实验依据。

　　宫颈癌是常见的女性生殖器官肿瘤，在女性恶性肿瘤中发病率仅次于乳腺癌，位居第二位。目前，宫颈癌的首选疗法仍是手术和放疗。但放疗的不良反应较大，部分患者难以坚持。本研究初步表明一定浓度的黄芩茎叶总黄酮对Hela细胞的生长具有明显的抑制作用，可为黄芩茎叶总黄酮在宫颈癌治疗中的应用提供一定的实验依据。