胃癌在我国发病率较高，在我国其发病率和死亡率居各类肿瘤的首位，严重威胁人们的健康。但胃癌的发病机制目前尚未完全明确，随着分子生物学的发展，胃癌发病机制的研究成为了目前的研究重点。Smad4作为一种肿瘤抑制基因，是TGFp。信号转导通路必须的中介分子，对维持细胞的正常生长发育具有重要作用。Smad4功能失活或下调会使信号转导中断，胃腺上皮细胞失去TGFp／Smads信号通路的正常抑制性调节作用，细胞增殖和分化异常进而导致肿瘤的发生发展。本研究通过免疫组化法，观察Smad4蛋白在胃癌组织的表达情况，探讨Smad4在胃癌进展中的作用及其与胃癌临床病理特征的关系，为临床判断胃癌预后提供实验依据。

　　1材料与方法

　　1．1 标本来源承德医学院附属医院2010年9月-2012年2月手术切除经病理证实为胃癌的标本60例，以及25例胃癌远端的正常黏膜。所有患者术前未经放疗、化疗。

　　组织常规取材后固定于中性甲醛，常规石蜡包埋，连续切片，厚4m。由2名有经验的病理医师进行双盲独立阅片，镜检胃癌组织学类型、分化程度及淋巴结转移情况。

　　1．2 患者一般情况60例胃癌患者中，男48例、女12例，年龄45-77岁，平均年龄(58．5±10．0)岁；高中分化24例、低分化者36例，无淋巴结转移者25例、有淋巴结转移者35例，I+Ⅱ期28例、Ⅲ+Ⅳ者32例。25例正常胃黏膜，男l6例、女9例，年646-72岁，平均年龄(60．0±6)岁。

　　1．3 免疫组化染色检测smad4蛋白的表达及结果判定小鼠抗Smad4单克隆抗体，购自福州迈新生物技术开发有限公司，采用SP免疫组化法，Smad4单克隆抗体稀释倍数为1：200。实验步骤按说明书进行，DAB显色，苏木素复染细胞核。以PBS代替一抗作为阴性对照，用已知正常胃黏膜组织的标准阳性切片作为阳性对照。以胞浆中出现棕色或棕褐色颗粒为Smad4阳性反应。每例标本随机选取5个高倍镜视野(x4oo)，每个视野计数200个细胞，以>50％ 的细胞出现棕色或者棕褐色，作为Smad4蛋白阳性表达，<50％判定为阴性 。

　　1．4 统计处理采用SPsS 17．0统计软件进行统计分析，行卡方检验，P<0．05为差异有统计学意义。

　　2结果

　　2．1 Srmd4蛋白在不同胃组织中的表达正常胃黏膜可见Smad4蛋白阳性表达，以腺体颈部和底部较多，在胞浆内可见棕色颗粒，着色深浅不一。25例胃正常黏膜Smad4蛋白阳性表达率为92．00％(23／25)，60例胃癌组织Smad4蛋白阳性表达率为70．00％(42／60)；胃癌组织Smad4蛋白阳性表达率明显低于胃正常黏膜P<0．05)。见附表。

　　2．2 Smad4蛋白表达与胃癌临床病理特征的关系 胃癌组织Smad4蛋白的表达与胃癌分化程度、淋巴结转移和TI 压分期有关(P<0．0l，P<0．05)：高中分化明显高于低分化，无淋巴结转移高于有淋巴结转移， 分期I+Ⅱ期高于Ⅲ+Ⅳ期。见附表。

　　3讨论Smad4基因定位于染色体18q21，所编码的Smad4蛋白是TGFD信号转导通路所必须的中介分子，对维持细胞的正常生长发育起重要作用，使TF能在不同的环境下发挥多种功能产生各种效应，并可能与肿瘤的发生发展密切相关。有研究发现，多数胰腺癌存；Smad4基因的缺失或突 ，而Smad4的失活也可见于胃 剐、结直肠癌州等。

　　Smad4被认为是通用调节因子，它几乎能与所有活化的受体调节型Smads蛋白结合形成低聚体复合物。

　　Smad4基因通过TGFp 信号通路抑制上皮细胞的生长，Smad4蛋白的缺乏或下调可能是胃癌细胞逃逸TGFD系统生长抑制的原因之一。目前认为，胃癌是正常胃黏膜细胞在各种致癌因素的作用下，通过肠上皮化生、不典型增生等癌前病变，逐渐演变而来。Smad4作为一种肿瘤抑制基因，突变后的Smad4蛋白构象发生改变，不能与磷酸化的Smad2和Smad3结合，从而不能发挥调控转录的作用 。

　　Leng等 报道，胃癌组织Smad4蛋白的表达明显低于癌旁组织，并且Smad4蛋白表达与胃癌组织分化程度有关，分化程度低的胃癌组织Smad4的表达明显低于分化程度高的胃癌组织，这与本研究结果一致。李强 的研究表明，贲门癌Smad4表达与分化程度和年龄有关，而发生于胃其它部位的肿Smad4表达与分化程度和年龄无关，因此表明Smad4蛋白表达下降是胃腺上皮细胞癌变过程中频发的分子事件，并且与细胞恶变的进展程度和分化程度密切相关。

　　本研究发现，胃癌组织Smad4的表达明显低于正常胃黏膜，并且胃癌组织Smad4蛋白的表达与胃癌分化程度、淋巴结转移和TNM分期有关：低分化明显低于高、中分化，有淋巴结转移明显低于无淋巴结转移，TNMⅢ+Ⅳ期明显低于I+Ⅱ期。因此表明，Smad4蛋白表达降低在胃癌的发生发展过程中具有重要作用。